速效枣仁安神胶囊中酸枣仁皂苷A,B的TLC鉴别和含量测定

华 w 西 c 药 J 竿 ~ 杂 P 志 S 1999．14(5～ 6)I 397～ 398 一 巾 速效枣仁安神胶囊中酸枣仁皂苷 A、B的 TLC鉴别和含量测定 x／ 东 代 青 笪 篮： —’、～ ————一 (第三军医大学西南医院药剂科 重庆 400038) 站 iR 2靠 提要 用薄层色谱法对速效枣仁安神胶囊中的酸枣仁皂苷 A、B进行 TLC鉴别 ．用单波长薄层扫 描法在同一薄板上测定皂苷 A、B的含量．方法简便 、灵敏．结果准确可靠，适用于含酸枣仁制剂中酸枣 仁皂苷 A、B的含量涮定。 荚键调 奎巡 A、B 薄层层析 台量测定 ●_ ’’、 速效枣仁安神胶囊 由酸枣仁、左旋延胡索 乙素等组成，临床用于治疗失眠，多梦、心悸等。 制剂中的酸枣仁具镇静、催眠作用口]，酸枣仁皂 苷 A B为其镇静、催眠的主要成份[1 】。该药的 质量中无酸枣仁皂苷 A、B的含量测定，现 用薄层色谱法对酸枣仁皂苷 A、B进行定性鉴 别并用薄层扫描法在同一薄层板上测定二者含 量。 1 实验部分 1．1 仪器、试药及材料 CS一9000型双 波长薄 层扫 描仪 (日本 岛 津)；微量定 量毛 细管 (Brummond Sei Co美 国)；微量注射器(宁波市镇海玻璃仪器厂)；高 速离心机(美国雅培公司)；索氏提取器 (重庆玻 璃仪器厂)。速效枣仁安神胶囊(重庆中药厂){ 酸 枣仁皂苷 A、B对 照品(中国生物 制品鉴定 所)；酸枣仁药材(重庆市药材公司)}高效硅胶 G板(青岛海洋化工厂分厂)；其它试剂均 为分 析纯 。 1．2 TIC鉴别 1-2．1 辞试品及对照溶液 的制备 取速效枣 仁安神胶囊内容物 2 g，置索氏提取器中，用氯 * 贵阳中医学院 药学系实习生 翘二亥神酶 仿适量加热回流提取至无色，弃氯仿，药渣挥尽 氯仿后，再加甲醇回流提取至无色，甲醇提取液 置水浴上 蒸干，残 渣加 甲醇适 量溶解，离 心 (13 000 r／rain，5 rain)，上清液用甲醇定容 ，制 成供试品溶液。将酸枣仁药材粉碎，过 4O目筛 ， 称取酸枣仁粉 2 g，置索氏提取器中，按上述方 法提取，制成酸枣仁阳性对照液 。另取不舍酸枣 仁皂苷 A、B的阴性样品，依法提取，制成阴性 样品液 分别取酸枣仁皂苷 A、B对照品适量， 用甲醇溶解，制成每 ml含酸枣仁皂苷 A和B 2 mg的对照液。 1．2 2 TLC鉴别 吸取酸枣仁皂苷 A、B对 照液 2．0 l，供试液、酸枣仁阳性对照液及阴性 样品液 10．0 v1分别点于 同一薄层板 上，正丁 醇一冰醋酸一水(ZO；6：25)上层，饱和 20 min， 上行展开 10 cnl，取 出薄层板挥干溶剂 ，喷 以 2 的香草醛硫酸乙醇溶液 ，在 100"C烘 2～3 min，可观察到供试 品及酸枣仁药材色谱 中在 与两种对照品色谱相应位置处有相同的深蓝色 斑点，而阴性对照液色谱中无此斑点。 1．3 含量测定 1．3．1 供试品液和对照液的制备 取速效枣 仁安神胶囊 10粒 ，倾出内容物 ，混匀。精密称取 样品 2 g置索氏提取器中 ，按“1．2．1”操作 ，甲 ⑦ 维普资讯 http://www.cqvip.com 华 西 药 学 杂 志 第 14卷 醇定容为 1 m1，作为供试品溶液。精密称取酸 枣仁皂苷 A和 B对照品适量，用甲醇溶解定 容，制成含酸枣仁皂苷 A 1．15 mg／ml及酸枣 仁皂苷 B 0．95 mg／ml的对照品混合液。 1．3．2 扫描条件 单波长反射法锯齿扫描，测 定波长 一620 rllTl，sx一3。 1．3．3 线性关系 准确吸取酸枣仁皂苷 A、B 对照品液 2．0、3．0、4．0、5．0 6．0 1，在同一块 薄层板上点样 ，按上述层析条件及扫描条件操 作，测定各斑点的面积积分值。以点样量x为 横座标，斑点面积积分值 Y为纵座标 ，求得酸 枣仁皂苷 A、B的回归方程为： Y 一^ 0 973X+ 9 122×10一 r一 0．9997 YB—O．678X+7．524×10 r一0．9999。皂苷 A点样量在 2．3～6．9 ，皂苷 B点样量在 1．9 ～5．7 范围内与峰面积呈良好的线性关系。 1．3．4 空白试验 制备缺酸枣仁皂苷 A、B的 阴性样品液。精密吸取对照品液、供试品液和阴 性对照液各 3 ，分别点于 同一薄层板上，依法 展开、显色、扫描，结果供试品溶液与对照品溶 液在相应位置有吸收峰，而阴性对照液无对照 品溶液相应的吸收峰，对皂苷 A、B测定无干 扰，供试品可得到分离 良好的色谱图。 1．3．5 精密度和稳定性试验 精密吸取酸枣 仁皂苷 A、B对照品液 2．0 1，点于同一薄层板 上，共 6个点，展开，显色，扫描测定 。结果 R D 分别为 2．97 、1．4g 。另准确吸取酸枣仁皂 苷 A、B对照品液 2．0 1点于硅胶 G薄层板 上，按上述层析条件展开，显色，每隔 30 rain扫 描测定 1次。结果表明 ，薄层板显色后 2．5 h内 测定结果稳定，其皂苷 A、B的 尼SD分别为 1． 97 、1．71 。 1．3．6 加样回收率测定 准确称取已知含量 的样品 3份，精密加入一定量 的酸枣仁皂苷 A 和 B对照液；另取该胶囊 1O粒，倾出内容物， 混匀，按“1．2．1”项下制备样品供试液，点样，展 开，显色，扫描测定 ，计算回收率(表 1)。 1．3．7 样品测定 精密吸取对照液 2．0 1、 衰 1 酸枣仁皂苷 A、B的回收串实驻( 4) 3．O ，供试品溶液 4．0 分别交叉点干同一 薄层板上，依法操作，用外标二点法测定供试品 中酸枣仁皂苷 A、B的含量 衰 2 酸枣仁皂苷 A、B的测定结果h一4) 2 讨论 2．1 考察了药典和文中两种展开剂，结果文中 所选展开剂分离效果好，显色后斑点清晰、圆 整、无拖尾。 2．2 对样品进行索氏提取时，分别考察了用乙 醚和氯仿加热回流去除样品中的左旋延胡索乙 素及脂溶性杂质，结果证 明，用氯仿能更完全地 除去左旋延胡索乙素和脂溶性杂质，使样品液 在展开时，酸枣仁皂苷 A、B分离彻底 ，斑点层 析后通道干扰小。显色后，仅待测成分显深蓝 色，因而背景干扰小，使皂苷 A、B的含量测 定 更准确。 参 考 文 献 1 壬健生．炒 酸枣仁中镇静、催眠成分初探．中成药，1989，l1 (1)I18 2 吴树勋．张建新，棣游等．酸枣(仁 、叶、内)与酸枣皂苷 A对 中抠神经 系统作用的 宴验研究．中国中药杂 志，1993，18 (11)'685 维普资讯 http://www.cqvip.com