蛋白质分子量标准（高）

蛋白质分子量标准（高） Protein Molecular Weight Marker (High) 使 用 说 明 TaKaRa Code：D531A ●浓 度：10 μg/μl ●制品内容（约 200 次量） Protein MW Marker（high） 50 μl 5×Loading Buffer 1000 μl 1 M DTT（Dithiothreitol） 100 μl ●制品说明 Protein Molecular Weight Marker（High）是由 五种纯化好的不同分子量的蛋白质组成的，它的分 子量范围为：44.3 KDa～200KDa。进行聚丙烯 酰胺凝胶电泳时，经考马斯亮蓝 R－250 染色后的 各种蛋白质的条带强度均一。每微升本制品的蛋白 量为 10 μg，稀释 20 倍后进行聚丙烯酰胺凝胶电 泳，每次取 5 μl（for SDS-PAGE mini gel）。以 每次使用 5 μl（20 倍稀释液）计算时本制品约可 使用 200 次。 V2010.04 ●保存条件 制品原液可在-20℃下长期保存，制品的 20 倍稀释液 可在-20℃下保存 2～3 个月，制品的原液和制品的 20 倍稀释液都应避免多次反复冻融。 ●制品中的各种蛋白质种类 蛋白种类 来 源 MW（Da） 肌球蛋白 猪 200，000 β 半乳糖苷酶 大肠杆菌 116，000 磷酸酶 b 兔子肌肉 97,200 牛血清蛋白 牛 66,409 卵清蛋白 鸡蛋白 44,287 ●使用注意 推荐使用 7.5～10.5％的聚丙烯酰胺凝胶。浓度太 高，高分子量的蛋白分离效果不好，有可能聚集于 分离胶的上部。 ●使用方法 1. 首先按以下方法配制“稀释液”。 1 M DTT 2 μl 5×Loading Buffer 20 μl * 稀释液可于室温下放置一个月左右。 2. 按以下方法稀释本制品。 Protein MW Marker（high） 5 μl 稀释液 22 μl 灭菌蒸馏水 73 μl * 20 倍的制品稀释液可在-20℃下保存 2～3 个月，但应 避免多次反复冻融。如果一次稀释量较多时，可以小 量分装后在-20℃下保存，以避免反复冻融。 3. 均匀混合后，100℃加热处理 5 分钟，然后取 5 μl 进行 7.5～10.5％的聚丙烯酰胺凝胶电泳（for SDS-PAGE mini gel）。 4. 7.5%、10%的聚丙烯酰胺凝胶电泳后，经考马斯 亮蓝 R-250 染色后的结果如下。 KDa 200.0 116.0 97.2 66.4 44.3 200.0 116.0 97.2 66.4 44.3 KDa 7.5% 10%