【推荐】蔗糖酯培养基中果蝇体内SOD和MDA的随龄变化趋势

【推荐】蔗糖酯培养基中果蝇体内SOD和MDA的随龄变化趋势 蔗糖酯培养基中果蝇体内SOD和MDA的 随龄变化趋势 河南预防医学杂志2005年第l6卷第5期HenanJPreyMed,2005,Vo1.16,No.5?273? ? 论着? 蔗糖酯培养基中果蝇体内SOD和MDA的随龄变化趋势 王浩.徐思红 (1.复旦大学上海医学院功能学科实验室,上海200032; 2.同济大学医学院预防医学教研室,上海200092) 摘要:观察蔗糖酯对果蝇体内SOD活力和MDA含量的影响.将饲养在含有蔗糖酯培养基中不同天龄的雌雄果蝇分别制成 匀浆,测定匀浆中SOD活力和MDA含量.果蝇体内SOD活力随增龄保持相对平稳的趋势,仅在30天龄时略有降低;MDA 含量随增龄的变化呈现先升后降的趋势,在50天龄时降至l0天龄水平. 关键词:蔗糖酯;超氧化物岐化酶;丙二醛;果蝇;黑腹 中图分类号:R343.8文献标识码:A文章编号:1006—8414(2005)05—0273—01 蔗糖脂肪酸简称蔗糖酯,为白色至象牙色粉状 和块状固体,由于蔗糖酯分子中含有8个一OH基 因(具有很高的亲水性)和脂肪酸分子具有许多的 一 CH:单位(有很高的亲脂性),所以蔗糖酯具有很 高的亲水亲脂性,是一种性能优良的非离子表面活 性剂.广泛应用于医药,食品,生物工程酶制剂,日 化,农业等领域.有报道指出蔗糖酯具有明显的抗 老化作用.本研究旨在观察蔗糖酯对果蝇体内抗 氧化酶系统变化趋势的影响. 1材料与方法 1.1试剂与材料蔗糖酯(上海伊尔凡精细化工 有限公司SE一15型),白砂糖(食品级),琼脂(食 品级),玉米粉(食品级),酵母粉(食品级),丙酸, 乙醚(国产试剂均为纯);果蝇麻醉瓶,果蝇培 养试管. 1.2实验动物黑腹果蝇(drosophilamelano— gaster),野生型OregonK品系. 1.3实验方法 1.3.1收集8h内新羽化未交配的果蝇11000只, 雌蝇5000只,雄蝇6000只.将雌雄果蝇分开饲养 在含有1%蔗糖酯的培养基中,置于(25?1)?,相 对湿度(45—75)%环境中培养.每隔1O天龄取存 活的同一性别果蝇称重80mg作为1个样本制成匀 浆,每次雌雄各5个样本,分别取测定平均值. 1.3.2果蝇匀浆的制备果蝇(雌或雄)在乙醚麻 醉下称重80mg,加入lml生理盐水,在冰水浴中以 次,制成果蝇含量 3000r/min匀浆10s,反复进行3 收稿日期:2005—05—26 为8%的匀浆;再以6000r/min离心10min,取上清 液待测. 1.3.3SOD测定采用羟胺比色法.试剂盒由南 京建成生物工程研究所提供,按SOD测定试剂盒说 明操作,测定结果以每毫升匀浆的SOD活力单位数 表示(U/m1). 1.3.4MDA测定采用硫代巴比妥酸法.试剂盒 由南京建成生物工程研究所提供,按MDA测定试 剂盒说明操作,测定结果以每毫升匀浆的MDA纳 摩尔数表示(nmol/m1). 2结果 2.1不同天龄果蝇体内SOD活力变化由表1可 见随天龄的增长雌雄果蝇体内SOD的活力有所降 低,但变化不显着相对呈现平稳的趋势,仅3O天龄 时SOD活力明显低于1O天龄(P<0.05). 表l不同天龄果蝇体内SOD活力变化(U/m1) 注:与10天龄组比较差异有显着性(P<0.05) 2.2不同天龄果蝇体内MDA含量变化由表2 可见随天龄的增长雌雄果蝇体内MDA含量出现升 高的趋势,其他天龄组(除5O天龄组外)均明显高 于10天龄组(P<0.05);而当果蝇天龄为5O天时, 其体内MDA含量却明显降低与1O天龄水平接近. (下转275页) 河南预防医学杂志2005年第16卷第5期HenanJPreyMed,2005,Vo1.16,No.5?275? 验方法,求出所称样品中的水份含量,与标准方法2.5%,相对误差为2.5%. 测得的结果比较,数据见表1,得到相对标准偏差为 表l大豆超微细精粉中含水量的测定 2.6标准加入回收率的测定准确称取1g大豆 粉,分别加入(0.10,0.20,0.30,0.40,0.50)ml 水,按样品处理方法处理后进行测定,数据见表2, 回收率为(97,101.4)%. 表2大豆超微细精粉中含水量的测定 结论 实验表明,利用氯冉酸与水生成荷移络合物的 反应,可以测定大豆超微细精粉中的微量水份,方 法简便,快速,灵敏度高,重现性好.不需要特殊仪 器,测定需要时间短,与国标比较,结果相当,不失 为一种测定微量水份的好方法. 参考文献- [1]王放,周晓静.大豆超微细精粉的生产及其在食品工业 中的应用[J].郑州粮食学院,1996,17(2):88—93. [2]中华人民共和国国家标准.食品卫生检测方法,理化部 分(一)GB/T5009.3—2003【S】. [3]刘雪静,李娜,赵凤林等.有机溶剂中微量水的荷移光 谱法测定[J].分析化学,2002,30(5):583—585. (上接273页) 表2不同天龄果蝇体内MDA含量变化(nmol/m1) 注:与10天龄组比较差异有显着性(P<0.05) 3讨论 果蝇是一种真核多细胞的需氧生物,具有生存 期短,繁殖量大,饲养简便,反应灵敏等优点,其代 谢系统,生理功能,生长发育等同哺乳动物基本相 似,其体内也含有SOD和MDA,故在目前进行的衰 老研究中常将果蝇作为研究对象.卫生部将果蝇 生存实验作为延缓衰老作用的检测指标之一,以往 水溶性较差的样品用吐温一8O作为乳化剂,使实验 结果受到影响,有研究指出吐温一80具有一定的急 慢性毒性作用,影响寿命,可能与抗氧化系统损伤 有关,..蔗糖酯因其本身具有较高的安全性已被 联合国粮农组织,世界卫生组织批准作为食品添加 剂,目前在我国也被广泛应用.本研究利用蔗糖酯 替代吐温一80作为乳化剂进行果蝇实验中,观察蔗 糖酯培养基中生长的果蝇,其体内SOD活力变化趋 势相对于普通培养基下的果蝇平稳没有明显的起 伏,保持相对的恒定状况;而MDA的情况则不同, 蔗糖酯培养基中的果蝇MDA在生长早期,中期的 变化趋势同普通培养基下的果蝇],但在50天龄 左右MDA出现明显的下降趋势,接近于10天龄时 水平,说明果蝇体内脂质过氧化的产物有所下降. 结合有关蔗糖酯具有一定抗老化作用的报道],可 能为蔗糖酯作用使果蝇的抗氧化系统保持相对平 衡,延缓了失衡状况的出现,而其作用的机理有待 进一步研究发现. 参考文献: [1]徐思红,等.吐温一8O对果蝇急性毒性及寿命的影响 fJ].同济大学,2003,24(6):460—462. [2]张欣文,等.果蝇体内SOD和MDA随增龄变化及其与 寿命的关系[J].中国公共卫生,2000,16(3):222—223. [3]禾伟.蔗糖酯用途广泛开发潜力巨大[N].中国化工报, 2001,11.