[经典]纯麦麸制备

[经典]纯麦麸制备 纯麦麸降解法快速评价非淀粉多糖酶的功效 1. 纯麦麸的制备 麦麸是最常见的非淀粉多糖复合物。常见的商品麦麸中含有大量的淀粉，对饲料酶的快速有很大的干扰。为了提高反应的精度，需要提前把麦麸中残留的淀粉清除掉。 称取10kg麦麸，用60kg清水在常温(20,30?)浸泡24小时，清洗其中的泥渣和其它可溶性杂物，撇除漂浮的皮壳和麦秸等粗纤维。用清水反复清洗3,4次，然后再过滤、挤压，获得洁净的麦麸(含水量大约在65%)，这些麦麸的总重量大约为25kg。 把这些麦麸分批平摊在托盘上，挑除其中没有破碎的麦粒(有完整的麦粒，也有不完整的麦粒)。这部分没有破碎的麦粒虽然很少，但是对后期实验结果的精度有影响，所以必须剔除。 在容量为100升的不锈钢容器中，加入上述获得的清洁麦麸，再加入40,45kg蒸馏水，然后加热(可以通蒸汽，也可以电加热)。升温至95,100?，保持10,15分钟，充分糊化麦麸中残留的淀粉。然后冷却至65,70?，加入10克淀粉液化酶(α-淀粉酶，酶活为4000u/g)，保持25,30分钟。然后逐步加热至95,100?，再加入20克糖化酶(酶活为80000u/g)，保温60分钟，以充分糖化残留的淀粉成为溶解于水的葡糖糖和麦芽糖。自然冷却至室温，过滤，挤压，获得渣滤，再用蒸馏水清洗滤渣3,4次，以充分滤除残留的葡萄糖和麦芽糖，获得纯净的麦麸。这时获得麦麸的含水量在65%左右，重量为22kg。 把含水量为65%左右的22kg麦麸分批平摊在托盘上进行常温气流干燥，24小时以后基本达到恒重，获得含水量为8.0%的纯麦麸7.6kg。把它们分装在密封在容器中，保存在4?冰箱中。 2. 非淀粉多糖酶的效价评价方法——干重法 实施例1: 取5个500ml的三角瓶，在每个三角瓶中都加入10克含水量为8.0%的纯麦麸和250ml缓冲液(pH5.5，醋酸——醋酸钠溶液，醋酸根离子的浓度为0.1mol/L)。在37?恒温放 置在水浴中，然后在这5个三角瓶中加入等量的待分析饲料酶A。每隔1小时抽取一个三角瓶，进行过滤。过滤结束后，用250ml蒸馏水清洗，3次过后取过滤渣，平摊在不锈钢托盘上，80?气流干燥8小时至恒重，再常温冷却2小时，然后称重。分析比较经过不同时间降解以后底物的残留重量。 实施例2: 有3个饲料用非淀粉多糖酶样品，分别标记为:A、B和C。采用纯麦麸降解法测定它们的效价。 在屠宰场收集10个猪胃，取它们的内容物，混合均匀。然后用纱布过滤，获得过滤液，待用。 取5个500ml的三角瓶，分别放入A、B和C饲料用非淀粉多糖酶样品各0.1克，再分别加入250ml猪胃过滤液，在37?恒温水浴2分钟，使酶蛋白充分溶解。然后同时加入10克纯麦麸。60分钟以后，同时进行过滤，洗涤。取过滤渣，在常温下气流干燥12小时 至恒重，然后比较它们的干重。 这种测定分析方法很直观，不需要很精密的分析仪器，但是对比结果很能说明问。目前国内外有很多饲料酶生产企业和大量的销售服务人员，饲料生产企业和养殖户完全可以参照上述方法对非淀粉多糖酶的效价进行比较。 16 14 12 10 8 6麦麸降解率(%) 饲料酶A 4 饲料酶B 2 0 01234567 降解时间(小时) 缓冲液中的麦麸降解效果