一种藤梨根药材、颗粒及标煎液干粉的快速多信息薄层鉴别方法

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利(10)申请公布号CN111089932A(43)申请公布日2020.05.01(21)申请号202010018968.2(22)申请日2020.01.08(71)申请人河北中医学院地址050200河北省石家庄市鹿泉区经济开发区杏苑路3号(72)发明人牛丽颖　田伟　姜晓娅　张泽昭　(74)专利代理机构石家庄开言知识产权代理事务所(普通合伙)13127代理人李志民(51)Int.Cl.G01N30/90(2006.01)权利书1页3页附图2页(54)发明名称一种藤梨根药材、颗粒及标煎液干粉的快速多信息薄层鉴别方法(57)摘要本发明涉及一种藤梨根药材、颗粒及标煎液干粉的快速多信息薄层鉴别方法。其特征在于：用简便、快捷的前处理方法得到供试品与藤梨根药材溶液，分别点于同一块薄层板上，展开后，在3种不同的检视条件下，检视到藤梨根药材、颗粒及标煎液干粉的7种信息斑点，相互交错，但互不干扰，具有相互补充信息斑点的作用。目前还未查阅到有关藤梨根药材、颗粒及标煎液干粉薄层鉴别报道。本发明不但提供了藤梨根药材、颗粒及标煎液干粉多信息鉴别方法，提高了其质量可控性，有利于质量监督管理，且方法简便、快捷，高效率、成本低、无环境污染。CN111089932ACN111089932A权　利　要　求　书1/1页1.一种藤梨根药材、颗粒及标煎液干粉的快速多信息薄层鉴别方法，其特征在于：取藤梨根颗粒和藤梨根标煎液干粉各0.3g，分别加甲醇3ml，超声处理10分钟，离心，上清液作为各自供试品溶液；另取藤梨根药材粉末0.3g，加甲醇2ml，超声处理15分钟，离心，上清液作为药材溶液；吸取颗粒供试品溶液4μl、标煎液干粉溶液4μl、药材溶液7～8μl，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以体积比7∶6∶3∶0.1∶0.1的环己烷-乙酸乙酯-甲醇-甲酸-水为展开剂，展开，取出，热风吹干，置紫外光灯254nm下检视，供试品色谱中，在与藤梨根药材色谱相应的位置上，显相同颜色主斑点；喷以10％硫酸乙醇溶液，105℃加热至斑点呈色，置紫外光灯365nm下检视，供试品色谱中，在与藤梨根药材色谱相应的位置上，至少显2个亮蓝色荧光斑点；再喷以体积比1∶7的5％香草醛硫酸溶液-乙醇的混合液，105℃加热至斑点显色清晰，置暗室内，透过灯光检视，供试品色谱中，在与药材色谱相应的位置上，至少显4个相同颜色斑点。2.根据权利要求1所述的一种藤梨根药材、颗粒及标煎液干粉的快速多信息薄层鉴别方法，其特征在于所述的每1g颗粒相当原生药材15g；每1g标煎液干粉相当原生药材15g。3.根据权利要求1所述的一种藤梨根药材、颗粒及标煎液干粉的快速多信息薄层鉴别方法，其特征在于采用同一展开剂，在同一块薄层板，3种不同的检视条件下检视到藤梨根药材、颗粒及标煎液干粉的7种信息斑点。2CN111089932A说　明　书1/3页一种藤梨根药材、颗粒及标煎液干粉的快速多信息薄层鉴别方法技术领域[0001]本发明涉及一种藤梨根药材、颗粒及标煎液干粉的快速多信息薄层鉴别方法。属于中药薄层鉴别领域。即，采用薄层色谱鉴别，在同一块薄层板上，3种不同的检视条件下，共检视到藤梨根药材、颗粒及标煎液干粉的7种信息斑点。背景技术[0002]所谓的快速多信息薄层鉴别方法，顾名思义就是薄层鉴别简便、快捷、高效，供试品溶液和对照药材溶液，不需要反复提纯处理，无蒸发、浓缩等污染环境的操作程序，用适宜的溶剂超声提取后，都不需滤过，上清液点样、展开、检视、即可，很开就能得到薄层结果。所谓的多信息系指一块薄层板，展开1次，可获得不同检视条件下的多信息斑点。与常规的薄层鉴别相比，大幅度提高了被检测物的质量可控性，有利于市场质量监督，确保人民用药的安全与有效。[0004]藤梨根是猕猴桃科植物猕猴桃的根，可做药用，具有清热解毒，清热利湿，祛风除湿，利尿止血，解毒消肿，止血的功效，适用于多种疾病的治疗。藤梨根常被用于主治黄疸，消化不良，呕吐，风湿痹痛，消化道癌肿，痈疡疮疖，跌打损伤，外伤出血，乳汁不下等。藤梨根化学成分复杂，至今已从藤梨根中分离并鉴定了90余种化学成分，共分为6大类，分别为五环三萜类化合物38个，黄酮类化合物16个，蒽醌类化合物6个，甾体类化合物5个，生物碱类化合物5个和其他类化合物25个；在抗肿瘤药理活性研究方面，其在抗胃癌，食管癌，结肠癌，肺癌等方面均显示了较好的活性。但还未收入中国药典，所以有关其质量一直无人报道，出现了不少在网上求助其薄层鉴别的帖子。[0005]为提供多品种中药配方颗粒，以适用患者临床应用便捷，首先进行了藤梨根颗粒、标煎液干粉制备工艺研究；又本着简便、快捷、低成本、高效率、多信息的宗旨，对藤梨根药材、颗粒及标煎液干粉进行了专题薄层鉴别研究。获得了一套简便、快捷、无环境污染的的快速多信息薄层鉴别方法。现就藤梨根药材、颗粒及标煎液干粉的制备工艺叙述如下：[0006]藤梨根药材系指按中药炮制规范，将采集的藤梨根，除去杂质，洗净，切片，晒干或适宜温度烘干，即为藤梨根饮片(也称药材)。[0007]藤梨根颗粒系指将藤梨根饮片，用水煎煮2次，每次1～2小时，滤过，合并滤液，减压浓缩到适宜的相对密度，喷雾干燥，将干燥粉，加适量糊精，混合均匀，制成颗粒，即得。[0008]藤梨根标煎液干粉系指将藤梨根饮片，用水煎煮2次，每次1～2小时，滤过，合并滤液，常温浓缩到适宜相对密度，置60℃烘箱内，烘干，粉碎，即得。发明内容[0009]首次创建了一种藤梨根药材、颗粒及标煎液干粉的快速多信息薄层鉴别方法。即，用简便、快捷的前处理方法得到供试品与藤梨根药材溶液，分别点于同一块薄层板上，展开后，在3种不同的检视条件下，检视到藤梨根药材、颗粒及标煎液干粉的7种信息斑点成分，3CN111089932A说　明　书2/3页既有呈现荧光的，又有无荧光的，还有遇10％硫酸乙醇溶液，激发产生荧光的，继而再用硫酸香草醛试剂显色，呈现多种颜色斑点的，它们相互交错，但互不干扰，发挥了不同检视条件下的信息斑点互补。目前还未查阅到有关藤梨根药材、颗粒及标煎液干粉薄层鉴别报道。本发明不但提供了藤梨根药材、颗粒及标煎液干粉多信息鉴别方法，提高了其质量可控性，有利于质量监督管理，且方法简便、快捷，高效率、成本低、无环境污染。[0010]本发明解决其技术问题所采用的为：[0011]取藤梨根颗粒和藤梨根标煎液干粉各0.3g，分别加甲醇3ml，超声处理10分钟，离心，上清液作为供试品溶液；另取藤梨根药材粉末0.3g，加甲醇2ml，超声处理15分钟，离心，上清液作为药材溶液；吸取颗粒供试品溶液4μl、标煎液干粉溶液4μl、药材溶液7～8μl，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以体积比7∶6∶3∶0.1∶0.1的环己烷-乙酸乙酯-甲醇-甲酸-水为展开剂，展开，取出，热风吹干，置紫外光灯254nm下检视，供试品色谱中，在与藤梨根药材色谱相应的位置上，显相同颜色主斑点；喷以10％硫酸乙醇溶液，105℃加热至斑点呈色，置紫外光灯365nm下检视，供试品色谱中，在与藤梨根药材色谱相应的位置上，至少显2个亮蓝色荧光斑点；再喷以体积比1∶7的5％香草醛硫酸溶液-乙醇的混合液，105℃加热至斑点显色清晰，置暗室内，透过灯光检视，供试品色谱中，在与药材色谱相应的位置上，至少显4个相同颜色斑点。[0012]本发明的原理如下：[0013]依据中药各有效成分的化学结构与性质，遵循相似相容的提取原则，采用适宜的提取溶剂，简便、快捷地制备供试品与对照药材溶液。再采用适宜的展开剂，进行展开，各种化学成分就会随着选用的展开剂，依据吸附、解吸附、再吸附、再解吸附的能力不同，而在薄层板上得以良好分离。再借助各种极性近似的有效成分，在同一块薄层板上，不同的检视条件下，虽然重叠，但在不同的层次上，互不干扰，呈现出各自不同的颜色斑点，获得多信息的薄层色谱图。[0014]本发明的创新点及有益效果如下：[0015]1.首次创建了一种藤梨根药材、颗粒及标煎液干粉的快速多信息薄层鉴别方法。即，用简便、快捷的前处理方法得到供试品与藤梨根药材溶液，分别点于同一块薄层板上，展开后，在3种不同的检视条件下，检视到藤梨根药材、颗粒及标煎液干粉的7种信息斑点成分，既有呈现荧光的，又有无荧光的，还有遇10％硫酸乙醇溶液，激发产生荧光的，继而再用硫酸香草醛试剂显色，呈现多种颜色斑点的，它们相互交错，但互不干扰，发挥了不同检视条件下的信息斑点互补。目前还未查阅到有关藤梨根药材、颗粒及标煎液干粉薄层鉴别报道。本发明不但提供了藤梨根药材、颗粒及标煎液干粉多信息鉴别方法，提高了其质量可控性，有利于质量监督管理，且方法简便、快捷，高效率、成本低、无环境污染。[0016]2.以体积比7∶6∶3∶0.1∶0.1的环己烷-乙酸乙酯-甲醇-甲酸-水为展开剂，展开藤梨根药材、颗粒及标煎液干粉后，置紫外光灯254nm下，药材检视到1个棕褐色斑点，而供试品则出现了3个斑点，2个斑点比药材的极性小，说明在煎煮和浓缩过程中成分发生了分解(图1)；置紫外光灯365nm下检视，药材无任何斑点，供试品呈现了1个荧光斑点，不能作为鉴别特征点；喷雾10％硫酸乙醇溶液后，置紫外光灯365nm下检视，药材呈现了4个荧光斑点，供试品呈现了2～3个，而且含量较药材量低，说明了用水煎煮的脂溶性成分损失较多，所以规定：供试品色谱中，在与藤梨根药材色谱相应的位置上，显2个亮蓝色荧光斑点(图2)；因4CN111089932A说　明　书3/3页为10％硫酸显色的颜色斑点清晰度差，斑点个数少，所以又继续喷雾香草醛硫酸乙醇溶液显色后，药材和供试品出现了多个清晰的不同颜色斑点，药材呈现了7个斑点，而供试品呈现了5个，且提取的脂溶性成分明显低于药材的(图3)。同一块薄层板，经前后2种显色，共检出7种信息斑点成分。不但弥补了藤梨根无薄层鉴别的空白，还寻找到水提取的颗粒和标煎液干粉的鉴别特征点。为藤梨根药材、颗粒及标煎液干粉的多信息、快速质量评价，提供了薄层鉴别方法。[0017]3.本鉴别方法只需藤梨根药材粉0.3g、颗粒和标煎液干粉各0.3g、甲醇共8ml、时间20分钟，即可获得样品和药材溶液，加上展开剂12ml，展开时间30分钟，总花费1小时，即可对样品质量做出多指标评价，简便、快捷，具有很高的实用价值。[0018]4.还要说明一下，10％硫酸乙醇显色，可以激发某些化合物的荧光，使其呈现出荧光斑点，但香草醛硫酸乙醇溶液显色后，是没有任何荧光斑点的，所以本创新之处，还在于继10％硫酸乙醇显色后，又进行了香草醛硫酸乙醇溶液显色，前者检视激发的高灵敏度的荧光斑点，后者检视呈现的不同颜色的斑点，增加了检视信息量，实现了快速多信息控制质量的目的。附图说明[0019]图1为藤梨根药材、颗粒及标煎液干粉在紫外光灯254nm下的薄层TLC图。[0020]图2为藤梨根药材、颗粒及标煎液干粉用10％硫酸乙醇溶液显色后，在紫外光灯365nm下检视的薄层TLC图。[0021]图3为藤梨根药材、颗粒及标煎液干粉继硫酸乙醇溶液显色后，又用香草醛硫酸溶液显色，置灯光下检视的薄层TLC图。[0022]图1、2、3为同一块薄层板，不同检视条件下的薄层色谱图，其中，1.2.3.为藤梨根药材；4.为藤梨根标煎液干粉；5.6.为藤梨根颗粒；本发明具体实施方式如下：[0023]取藤梨根颗粒和藤梨根标煎液干粉各0.3g，分别加甲醇3ml，超声处理10分钟，离心，上清液作为供试品溶液；另取藤梨根药材粉末0.3g，加甲醇2ml，超声处理15分钟，离心，上清液作为药材溶液；吸取颗粒供试品溶液4μl、标煎液干粉溶液4μl、药材溶液7μl，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以体积比7∶6∶3∶0.1∶0.1的环己烷-乙酸乙酯-甲醇-甲酸-水为展开剂，展开，取出，热风吹干，置紫外光灯254nm下检视，供试品色谱中，在与藤梨根药材色谱相应的位置上，显相同颜色主斑点；喷以10％硫酸乙醇溶液，105℃加热至斑点呈色，置紫外光灯365nm下检视，供试品色谱中，在与藤梨根药材色谱相应的位置上，至少显2个亮蓝色荧光斑点；再喷以体积比1∶7的5％香草醛硫酸溶液-乙醇的混合液，105℃加热至斑点显色清晰，置暗室内，透过灯光检视，供试品色谱中，在与药材色谱相应的位置上，至少显4个相同颜色斑点。5CN111089932A说　明　书　附　图1/2页图1图26CN111089932A说　明　书　附　图2/2页图37