化妆品中对羟基苯乙酮的测定方法验证

  化妆品中对羟基苯乙酮的测定方法验证  李宁刘昶李镇宏摘要：目的：建立一个用高效液相色谱法测定化妆品中对羟基苯乙酮的含量的方法。方法：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以甲醇–水（20：80）为流动相;检测波长为275mn，柱温30℃，流速1ml/min。0μg～0.98538644μg范围内线性关系良好，得对羟基苯乙酮线性回归方程y=344515x+125.58（R2=0.9998），回归系数大于0.999。结论：该方法简便、准确，可用于化妆品中对羟基苯乙酮的含量控制。Key：化妆品;对羟基苯乙酮;含量;方法确认对羟基苯乙酮又名4-羟基苯乙酮（4-Hydroxyacetophenone），常温下为白色针状结晶，可燃，天然存在于菊科植物滨蒿的茎、叶，茵陈蒿、萝藦科植物人参娃儿藤等植物的根中。但对羟基苯乙酮吞食会有害，接触对眼睛、呼吸系统和皮肤有刺激作用在我国《化妆品安全技术规范》（2015版）中没有对它进行限用和禁用，就连一个系统的检验方法都还不全。由此可见的缺失，可能导致对羟基苯乙酮在化妆品中的滥用给消费者带来伤害。本次验证需对可能出现的技术难点和安全风险进行验证，找出一个较为满意的实验方法。1. 仪器与试药1.1 仪器  Agilent1260系列高效液相色谱仪1.2 试药甲醇，色谱级，德国默克。对羟基苯乙酮，来源中国食品药品检定研究院.2. 方法与结果含量测定色谱条件：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以甲醇–水（30：70）为流动相;检测波长为275mn，柱温30℃，流速1.0ml/min。对照品峰理论塔板数和分离度均符合要求。对照品溶液的制备 精密称取对羟基苯乙酮对照品21.44mg，置于25ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度摇匀做为对羟基苯乙酮对照溶液。供试品溶液的制备 精密称取本品约一片的重量为0.5152g，置于50ml量瓶中，用甲醇定容至刻度，超声处理10min。将提起液离心至澄清，用0.45um滤膜过滤，取续滤液作为供试品。测定法 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10uL，注入液相色谱仪，测定，即得。测试结果：供试品和对照品色谱峰保留时间一致，分离度和理论板数均满足要求，说明系统适用性满足要求。精密度试验：分别精密吸取浓度为0.00262769761mg/ml的对羟基苯乙酮对照品溶液10μl，按测定方法重复进样6次，测定峰面积值。各次测得的峰面积值分别是926.6、926.6、928.2、927.0、926.4、926.8。平均值为4082.4，相对标准偏差RSD为0.07%。相对标准偏差小于2.0%，说明仪器精密度良好。线性关系与线性范围考察：精密量取按上述对照品溶液制备方法制备的浓度约为0.6569429mg/ml的对羟基苯乙酮对照品储备液，分别按照0.4ml→100ml、0.5ml→50ml、1.0ml→50ml、0.5ml→10ml、0.8ml→10ml、1.0ml→10ml、1.5ml→10ml将溶液稀释成对照品溶液系列，就得到7个浓度的对照品溶液，分别取上述7个浓度的对照品溶液10ul注入高效液相色谱仪，按上述色谱条件测定峰面积;以峰面积为纵坐标，以对照品浓度（mg/ml）为横坐标作线性回归，绘制标准曲线。得对羟基苯乙酮线性回归方程y=344515x+125.58（R2=0.9998）结论：对羟基苯乙酮线性回归方程y=344515x+125.58（R2=0.9998），相关系数满足要求，说明对羟基苯乙酮在0μg～0.98538644μg范围内线性关系良好。加样回收率试验（准确度试验）采取全程加样法。取9份采之汲光感亮颜面膜约0.5g，精密称定，精密量取浓度为0.8567424mg/ml的对羟基苯乙酮对照溶液分别按照0.5ml、2.5ml、5.0ml各加三份，按含量测定方法进行处理，同时取对羟基苯乙酮对照品溶液，依法测定，并计算出对羟基苯乙酮的含量。以下式计算回收率。以下式计算回收率。试验结果：三个浓度的回收分别为98.43%，98.43%，99.83%，平均为98.9，RSD为0.81%。试验表明本试验方法可行有效准确。三、结论试验通过了系统适用性试验、精密度试验、线性关系与线性范围考察、准确度试验（加样回收试验），各项试验测试結果均能满足要求，仪器性能稳定，质控结果满意。从以上数据可以看出用该方法检测化妆品中的对羟基苯乙酮的含量，结果准确可靠，可以在本实验室运用此方法检测化妆品中的对羟基苯乙酮的含量。该方法中对羟基苯乙酮的线性范围为对羟基苯乙酮。Reference[1]国家药典委员会.中华人民共和国药典2015版（四部）[M].北京：化学工业出版社，2005.[2]日用化学工业.分析与检测 -全文完-