盐酸小檗碱的提取

盐酸小檗碱的提取、精制及检识小檗碱又称黄连素，是在高等植物中散布比较普遍的、有明显生理活性的化学成份。要紧存在于黄连、黄柏、三颗针等中草药中。小檗碱具有显著的抗微生物、抗原虫的作用，临床用其盐酸盐（即盐酸黄连素）医治细菌性感染如痢疾、急性肠胃炎、呼吸道感染等症。黄连为毛茛科黄连属植物黄连（CoptischinensisFranch.），三角叶黄连（.ChengetHsiao）或云连（）的根茎，含有小檗碱(1)、巴马汀(2)、黄连碱(3)、甲基黄连碱(4)、药根碱(5)等生物碱，其中以小檗碱含量最高，可达10%左右，小檗碱以盐酸盐的形式存在于黄连中。目前制药工业提取小檗碱主要以三颗针为原料。三颗针来源于小檗科小檗属（Berberis）多种植物，其根皮含生物碱约2%，要紧含小檗碱、小檗胺、药根碱、巴马汀等生物碱。RRRRR123451CHCHHCH33RO212CHCHCHCHHN+OH£-3333RO2OR3CHCHHR32254CHCHCHOR23425HCHCHCHH333小檗碱(Berberine)属异喹啉类生物碱，自水和乙醇中结晶出来的小檗碱为黄色长针状结晶，含5个结晶水，在100℃干燥时即失去结晶水，转为棕黄色，加热至110℃时，其颜色加深变暗色。℃至160℃即分解。HCOOCH33NCHHNN33OCHHH3OOOH小檗胺小檗碱有三种互变异构体：其中以季铵碱式结构状态最稳固，能够离子化呈强碱性，用过量的氢氧化钾处置小檗碱盐类时，可转变成醇式叔胺碱和醛式仲铵碱，季铵碱式小檗碱可离子化，故有必然亲水性，因此，游离小檗碱能缓缓溶于水，在热水及热乙醇中易溶，而在冷乙醇中溶解度为1：100，但难溶于苯、氯仿、丙酮等溶剂。醇式和醛式小檗碱那么具有一样生物碱的通性，难溶于水，易溶于有机溶剂。小檗碱的盐类除中性硫酸盐、磷酸盐外，一样在水中的溶解度均较小。小檗碱及其盐类在水、乙醇中的溶解度如下表：名称水乙醇小檗碱1：201:100盐酸小檗碱1:500几乎不溶酸性硫酸小檗碱1:100微溶中性硫酸小檗碱1:30可溶中性磷酸小檗碱1:15可溶小檗碱还能与苯、氯仿、丙酮等溶剂结合成份子缩合物，有完好的结晶状态，可作为小檗碱的识别之用。如用过量的氢氧化钠处置小檗碱盐类，使其转变成醇式小檗碱，就能够与丙酮缩合成结晶型的丙酮小檗碱。一、实验目的1.把握从黄连中提取、精制盐酸小檗碱的方式；2.学习小檗碱的化学性质与检识方式。二、实验原理利用小檗碱的硫酸盐在水中的溶解度较大，而盐酸盐几乎不溶于水的性质，先将药材中的小檗碱转变成硫酸盐用水提出；再使其转化为盐酸盐，结合盐析法降低其在水中的溶解度，制得盐酸小檗碱。三、实验内容（一）盐酸小檗碱的提取称取黄连粗粉100g，加%硫酸热浸三次，温度操纵在65℃~70℃，第一次加%硫酸300ml时，热浸一小时，第二、三次别离加%硫酸200ml，热浸半小时，趁热过滤，归并三次提取液，加入浓盐酸调至pH2~3，再加入提取液量8%(W/V)的固体氯化钠，搅拌使之充分溶解；冷却即析出大量黄色沉淀，放置留宿，常压过滤，即得盐酸小檗碱粗品，于80℃以下干燥，称重。（二）盐酸小檗碱的精制取盐酸小檗碱粗品加于20倍量的沸水中，加热数分钟，搅伴使其溶解。然后加入石灰乳调至pH8～9，趁热过滤，滤液于65℃左右加浓盐酸调至pH2，放置冷却，即析出大量黄色沉淀，过滤，沉淀用蒸馏水洗至pH2，抽干，于80℃以下干燥，即得精制盐酸小檗碱，称重，计算产率。（三）盐酸小檗碱的检识1.取自制精制盐酸小檗碱50mg，加水5ml，缓缓加热溶解后，加5%氢氧化钠溶液2滴显橙红色，放冷，加丙酮4滴，即发生浑浊，放置后，生成黄色沉淀，即为丙酮小檗碱，然后取上清液，加丙酮1滴，如仍发生浑浊，再加适量丙酮使沉淀完全；过滤，取滤液2ml，加10%稀硝酸1ml，摇匀，再加L硝酸银试液2滴，即有白色沉淀产生。2.取自制精制盐酸小檗碱约2mg，置白瓷蒸发皿中，加浓硫酸lml溶解，加5%没食子酸乙醇溶液5滴，置水浴上加热，即显翠绿色。3.取自制精制盐酸小檗碱约5mg，加水1m1使溶解后，加锌粉少量，再分数次加入浓硫酸数滴，每隔10分钟加一次，观看其黄色是不是消退。5.盐酸小檗碱的薄层层析（氧化铝薄层层析法）吸附剂：中性氧化铝（Ⅱ级，过160目筛），干法铺板（软板）。样品：①自制精制盐酸小檗碱乙醇溶液②盐酸小檗碱标准品乙醇溶液展开剂：①氯仿－乙醇(9:1)②甲醇－丙酮－乙酸(4:5:1)显色剂：先置于紫外光灯(365nm)下检视，再喷雾改良碘化铋钾试剂，观看斑点颜色，并与标准品对照。四、实验注意事项一、用硫酸浸泡时，硫酸的浓度以％为宜，现在生成的硫酸小檗碱在水中溶解度较大，假设加入过量，小檗碱就形成酸式硫酸盐，水中溶解度就降低(1：100)，阻碍小檗碱的提取量。二、在pH～时小檗胺沉淀较完全，但不易凝聚，故80℃保温，使凝聚而沉降。4、小檗碱精制时调pH至2，是为了使小檗胺等叔胺型生物碱留在溶液中除去，以便取得较纯的小檗碱，操作时假设溶液己冷却析出结晶，就应加热成澄明溶液再用盐酸调pH2。五、现象及结果六、试探与作业（1）季铵型生物碱提取经常使用的溶剂有哪些？分离方式有哪些？（2）生物碱沉淀反映条件如何？如何能够取得正确的结论？（3）生物碱薄层色谱辨别中采纳硅胶作吸附剂时，如何幸免拖尾现象？