2021年葡萄糖杂质检查及葡萄糖注射液分析实验报告

2021年葡萄糖杂质检查及葡萄糖注射液实验2021年葡萄糖杂质检查及葡萄糖注射液分析实验报告PAGE/NUMPAGES2021年葡萄糖杂质检查及葡萄糖注射液分析实验报告试验汇报葡萄糖杂志检验名字:学号:11450393月28日检品名称:葡萄糖批号:规格:__一、目要求1.掌握药品通常杂质检验原理与试验方法。2.掌握杂质程度试验概念及计算方法。3.熟悉通常杂质检验项目与意义。二、关键仪器与药品50mL纳氏比色管、坩埚、鼓风干燥箱、马弗炉、药品天平、葡萄糖、氯化钠原料药等。三、原理:葡萄糖是用淀粉以无机酸水解或在酶催化下经过水解得稀葡萄糖液,再经脱色、浓结晶制得。 1．中国生产方法有以下多个: ⑴酸水解法:以无机酸将淀粉水解为葡萄糖。 ⑵双酶水解法:以生物酶为催化剂将淀粉水解为葡萄糖。 ⑶酸酶水解法:以盐酸为液化剂,糖化酶为催化剂,将淀粉水解为葡萄糖。依据葡萄糖生产工艺特点,应进行氯化物、重金属、砷盐等通常杂质检验,进行蛋白质、可溶性淀粉等特殊杂质检验。试验方法1.酸度取本品2.0g,加水20mL溶解后,加酚酞指示液3滴与氢氧化钠滴定液（0.02mol/L）0.20mL,应显粉红色。2.氯化物取本品0.6g,加水溶解使成25mL,再加稀硝酸10mL;溶液如不澄清,应滤过;置50mL纳氏比色管中,加水使成约40mL,摇匀,即得供试溶液。另取氯化钠溶液6.0mL,置50mL纳氏比色管中,加稀硝酸10mL,加水使成40mL,摇匀,即得对照溶液。于供试溶液与对照溶液中,分别加入硝酸银试液1.0mL,用水稀释,使成50mL,摇匀,在暗处放置5分钟,同置黑色背景上,从比色管上方向下观察、比较（附录A）。供试溶液所显浑浊度不得较对照液更浓（0.01%）。3.硫酸盐取本品2.0g,加水溶解使成约40mL;溶液如不澄清,应滤过;置50mL纳氏比色管中,加稀盐酸2mL,摇匀,即得供试溶液。另取标准硫酸钾溶液2.0mL,置50mL纳氏比色管中,加水使成约40mL,加稀盐酸2mL,摇匀,即得对照溶液。于供试溶液与对照溶液中,分别加入25%氯化钡溶液5mL,用水稀释至50mL,充足摇匀,放置10分钟,同置黑色背景上,从比色管上方向下观察、比较（附录B）。供试溶液所显浑浊度不得较对照液更浓（0.01%）。4.亚硫酸盐与可溶性淀粉取本品1.0g,加水10mL溶解后,加碘试液1滴,应即显黄色。5.干燥失重取本品,在105℃干燥至恒重,减失重量不得过9.5%（附录C）。6.炽灼残渣不得过0.1%（附录D）。7.蛋白质取本品1.0g,加水10mL溶解后,加磺基水杨酸溶液（1→5）3mL,不得发生沉淀。8.铁盐取本品2.0g,加水20mL溶解后,加硝酸3滴,缓缓煮沸5分钟,放冷,加水稀释使成45mL,加硫氰酸铵溶液（30→100）3mL,摇匀,如显色,与标准铁溶液2.0mL用同一方法制成对照液比较,不得更深（0.001%）。9.重金属取25mL纳氏比色管两支,甲管中加标准铅溶液一定量与醋酸盐缓冲液（pH3.5）2mL后,加水稀释成25mL。取本品4.0g,置乙管中,加水适量溶解后,加醋酸盐缓冲液（pH3.5）2mL,加水使成25mL;若供试液带颜色,可在甲管中滴加少许稀焦糖溶液或其她无干扰有色溶液,使之与乙管颜色一致。再在甲乙两管中分别加硫代乙酰胺试液各2mL,摇匀,放置2分钟,同置白纸上,自上向下透视,乙管中显出颜色与甲管比较,不得更深（附录E）,含重金属不得过百万分之五。五、试验结果1．酸度原理:检品中酸性杂质被碱中和,过量碱使酚酞显粉红色。试验现象:显粉红色。见图一。结论:符合要求。2.氯化物检验原理:Cl－＋Ag＋HNO3AgCl↓（白色）试验现象:样品管浑浊度浅于标准管。见图二。结论:符合要求（﹤0.01%）。硫酸盐原理:SO4 2-  十Ba2+  —→ BaS04↓试验现象:样品管浑浊度浅于标准管。见图三。结论:符合要求（﹤0.01%）。亚硫酸盐与可溶性淀粉原理:黄色为碘试液本身颜色,证实无亚硫酸盐与可溶性淀粉存在。当有亚硫酸盐与可溶性淀粉存在时,淀粉遇碘遍蓝色,亚硫酸盐与碘发生氧化还原反应生成碘离子,变为无色。试验现象:溶液显黄色。见图四。结论:符合要求。干燥失重原理:干燥失重是指药品在要求条件下经干燥后所减失重量,依据所减失重量和取样量计算供试品干燥失重百分率。试验现象:干燥失重8.0%结论:符合要求（﹤9.5%）。6.炽灼残渣试验现象:m0=20.0014gm1=22.7435gm2=22.7410g残渣重=(m1-m2)/(m1-m0)*100%=0.09%结论:符合要求（﹤0.1%）7.蛋白质试验现象:没有发生沉淀。见图五。结论:符合要求。铁盐原理:Fe3++6SCN- —→  [Fe(SCN)6]3-    红色试验现象:样品管颜色浅于标准管。见图六。结论:符合要求。重金属原理:硫代乙酰胺在弱酸性(pH约3.5)溶液中水解,产生硫化氢,可与重金属离子结合生成有色硫化物均匀沉淀,可与对照标准液同法处理比较。试验现象:样品管颜色浅于标准管。见图七。结论:符合要求。六、结果分析图一葡萄糖酸度图二葡萄糖氯化物注:葡萄糖中酸性杂质被碱中和,注:左为供试管,右为标准管碱使酚酞显粉红色左管浊度浅于右管图三葡萄糖硫酸盐图四亚硫酸盐与可溶性淀粉注:左管为标准管,右管为供试管注:溶液显黄色左管浊度深于右管图五葡萄糖蛋白质试验图六葡萄糖铁盐试验注:葡糖糖水溶液与磺基水杨酸注:上管为标准管,下管为供试管溶液不产生沉淀上管溶液颜色深于下管图七葡萄糖重金属试验注:左管为标准管,右管为供试管左管颜色深于右管七、讨论1.观察试验结果时,比色方法通常是将两管同置于白色背景上,从侧面观察;比浊方法是将两管同置于黑色或白色背景上,自上而下地观察。 2.精密称定,选择是正确度为千分之一称量天平。3.铁盐试验中,因为缓缓煮沸叫麻烦,可在温度80。C水中水浴约五分钟,试验结果也十分显著。4.酸度试验中,氢氧化钠溶液可添加至0.4mL,若还不显粉色,可再滴加氢氧化钠溶液。试验汇报葡萄糖注射液分析名字:开德美学号:11450393月28日检品名称:葡萄糖注射液批号:规格:一、目要求1.掌握pH值测定原理和pH计正确操作。2.掌握比旋度概念、求算方法和旋光法测定旋光性物质含量原理与计算。3.熟悉紫外法检验杂质原理与方法。4.了解注射液杂质检验通常项目。二、关键仪器与药品WZZ-1自动指示旋光仪、pH酸度计、PH试纸、纳氏比色管、紫外分光光度仪、10%葡萄糖注射液。原理本品为无水葡萄糖灭菌水溶液。含葡萄糖（C6H12O6·H2O）应为标示量95.0%~105.0%。[判别]取本品,缓缓滴入温热碱性酒石酸铜试液中,即生成氧化亚铜红色沉淀。原理:5-羟甲基糠醛原理:葡萄糖注射液在高温加热灭菌时,易分解产生5-羟甲基糠醛:利用5-羟甲基糠醛在284nm波优点有吸收,而葡萄糖无吸收,将样品配制成一定浓度溶液,在284nm波优点测定,要求吸收度不得大于0.32来控制5-羟甲基糠醛量。[含量测定]旋光法（原理:葡萄糖分子中含不对称碳原子,含有旋光性,在一定条件下,其水溶液比旋度[α]tD为＋52.5°～＋53.0°,依据旋光度α与浓度C百分比关系可进行含量测定:式中L为液层厚度（dm）,C为溶液百分浓度（g/mL,按干燥品或无水物计算）。所以:四、试验方法1.判别取本品,缓缓滴入温热碱性酒石酸铜试液中,即生成氧化亚铜红色沉淀。[检验]pH值应为3.2~5.5。2.精密量取本品适量（约相当于葡萄糖1.0g）,置100mL量瓶中,加水稀释至刻度,摇匀,在284nm波优点测定,吸收度不得大于0.32。3.重金属取本品30ml（约相当于葡萄糖3g）,必需时,蒸发至约20mL,放冷,加醋酸盐缓冲液（pH3.5）2mL与水适量使成25mL,置25mL纳氏比色管中。另取标准铅溶液1ml与醋酸盐缓冲液（pH3.5）2mL后,加水稀释成25mL,置另一25mL纳氏比色管中。若供试液带颜色,可在标准管中滴加少许稀焦糖溶液或其她无干扰有色溶液,使之与样品管颜色一致;再在两管中分别加硫代乙酰胺试液各2mL,摇匀,放置2分钟,同置白纸上,自上向下透视,样品管所显颜色与标准管比较,不得更深）。按葡萄糖含量计算,含重金属不得过百万分之五。4.含量测定精密量取本品100ml（约相当于葡萄糖10g）,置100mL量瓶中,加氨试液0.2mL（10%或10%以下规格本品可直接取样测定）,用水稀释至刻度,摇匀,静置10分钟,测定旋光度。用读数至0.01°并经过检定旋光计,将测定管（长度为1dm）用供试液体冲洗数次,缓缓注入供试液体适量（注意勿使发生气泡）,置于旋光计内检测读数,统计旋光度,同法读取旋光度3次,取3次平均值作为样品旋光度。与2.0852相乘,即得100mL供试液中含有C6H12O6·H2O重量（g）。测定前用水校正零点,测定后再用水查对零点,若零点变动,应重测。五、试验结果1.判别原理:试验现象:生成红色沉淀。见图一。结论:符合要求。检验试验现象:pH为结论:符合要求。（3.2~5.5）吸光度试验现象:吸光度为0.142结论:符合要求（<0.32）重金属试验现象:样品管颜色浅于标准管。见图二。结论:符合要求。含量测定试验现象:旋光度为5.35,100mL供试液中含有C6H12O6·H2O重量（g）为11.16g。结论:符合要求。结果分析图一判别试验图二葡萄糖注射液重金属试验注:葡萄糖注射液与碱性酒石酸铜溶液反应注:左为样品管,右为标准管,成红色,pH约为4.8。左管颜色浅于右管。讨论1．pH值测定时,每次更换标准缓冲液或供试液前,应用纯化水充足洗涤电极,然后将水吸尽,也可用所换标准缓冲液或供试液洗涤。配制标准缓冲液与溶解供试品水,应是新沸过冷蒸馏水,其pH值应为5.5~7.0。2．旋光仪接通电源后需预热5～20分钟。每次测定前后应用溶剂作空白校正。配制溶液及测定时,均应调整温度至20℃±0.5℃（除另有要求外）。供试溶液应澄清,如显浑浊或含有混悬小粒,应预先滤过,并弃去初滤液。旋光管装样时应注意光路中不应有气泡,使用后应立刻用水洗净晾干,切勿用刷子刷,也不能用高温烘烤。3、用旋光度法测定葡萄糖含量时,要加氨试液,是加速变旋作用,促进达成平衡,不然测得旋光度数据不准。