各浓度TBE聚丙烯酰胺凝胶电泳凝胶的配方TBE聚丙烯酰胺凝胶电泳胶的配方:
50ml体系:
丙烯酰胺
有效分离(bp)
二甲苯青
溴酚蓝
丙烯酰胺30%(ml)
10×TBE(ml)
ddH2O(ml)
TEMED(μl)
过硫酸铵10%(μl)
3.5%
100-1000
460
100
5.83
5
39.17
25.0
250
5.0%
100-500
260
65
8.33
5
36.67
25.0
250
8.0%
60-400
160
45
13.33
5
31.67
25.0...
TBE聚丙烯酰胺凝胶电泳胶的配方:
50ml体系:
丙烯酰胺
有效分离(bp)
二甲苯青
溴酚蓝
丙烯酰胺30%(ml)
10×TBE(ml)
ddH2O(ml)
TEMED(μl)
过硫酸铵10%(μl)
3.5%
100-1000
460
100
5.83
5
39.17
25.0
250
5.0%
100-500
260
65
8.33
5
36.67
25.0
250
8.0%
60-400
160
45
13.33
5
31.67
25.0
250
12.0%
40-200
70
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20.0
5
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15.0%
25-150
60
15
25.0
5
20.00
25.0
250
20.0%
5-100
45
12
33.33
5
11.67
25.0
250
5ml体系:
丙烯酰胺
丙烯酰胺30%(ml)
10×TBE(ml)
ddH2O(μl)
TEMED(μl)
过硫酸铵10%(μl)
3.5%
0.583
0.5
3.917
2.5
25
5.0%
0.833
0.5
3.667
2.5
25
8.0%
1.333
0.5
3.167
2.5
25
12.0%
2.00
0.5
2.5
2.5
25
15.0%
2.50
0.5
2.0
2.5
25
20.0%
3.333
0.5
1.167
2.5
25
1、丙烯酰胺30%为29:1(质量比,丙烯酰胺:双甲叉丙烯酰胺)
2、TEMED 可以加到1ul/ml。
不同浓度丙烯酰胺和DNA的有效分离范围表
丙烯酰胺(%)
有效分离范围(bp)
溴酚兰*
二甲苯青*
3.5
100~2000
100
460
5.0
80~500
65
260
8.0
60~400
45
160
12.0
40~200
30
70
15.0
25~150
15
60
20.0
10~100
12
45
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