蛋白质铜染色方法

蛋白质铜染色方法 1. 配液:0.3M CuSO4水溶液 2. 将电泳胶折下后,用双蒸水漂洗2-3min 3. 然后将胶浸入0.3M CuSO4水溶液中染色2-5min,此时蛋白质应显色(半 透明条带、胶的本底色为浅兰色) 4. Cu染色后的胶还可进行考马氏亮蓝染色。 5. 染色的灵敏度与考马氏亮蓝染色相当; (一)用CTLL-2细胞检测IL-15的生物学活性方法 1. 将培养到对数生长期的CTLL-2细胞离心后,用不含血清的1640培养液洗涤 2次;计数后,调整细胞浓度为4×105 2. 在96孔板的每孔上用多道加样枪加50μl含10%FCS的RPMI-1640 培养液。 3. 在第2-4排加入标准品;标准品的起始浓度为200U/ml. 4. 在5-12排加入适当浓度的待检样品,每个样品设3个复孔; 5. 采用多道枪倍比稀释到第8孔。 6. 更换加样枪的枪头后,每孔加入50μl的CTLL-2细胞悬液;注意从第8孔开 始往每孔的方向加; 7. 将培养板在37 ℃5 % CO2的饱和水汽二氧化碳培养箱中培养24 小时 8. 每孔加10μl MTT 染液(5mg / ml 溶于PBS 中,滤过除菌,4 ℃避光 保存),在37 ℃5 %CO2二氧化碳培养箱中培养4~6 小时。 9. 每孔加入含20mM HCl的10% SDS溶液,待结晶完全溶解后,测OD570值。 10. 将所测值输入电脑,计算出待测样品的活性;