α甲酰基辅酶A消旋酶在结直肠癌中的表达及临床意义

  α甲酰基辅酶A消旋酶在结直肠癌中的达及临床意义  陈萍万霞刘琼茹[Summary]目的研究α甲酰基辅酶A消旋酶（P504S）在结直肠癌（CRC）和正常结直肠黏膜中的表达及其临床意义。方法采用免疫组织化学方法检测江门市中心医院2017年1～12月共77例首发CRC手术根治切除标本和30例癌旁正常黏膜中P504S的表达水平。结果P504S在CRC中的阳性表达率为76.6%（59/77），显著高于正常大肠黏膜组织的3.3%（1/30），差异有统计学意义（P0.05）;有淋巴结转移CRC中P504S的阳性表达率为83.3%（40/48），无淋巴结转移CRC中的阳性表达率为65.5%（19/29），两者比较，差异无统计学意义（P>0.05）。结论P504S参与介导CRC的发生发展进程，对CRC进展、预后及指导肿瘤的术后辅助治疗有重要的临床意义。[Key]结直肠肿瘤;P504S;免疫组织化学;临床意义[]R735.3+     []A     []1674-4721（2019）7（c）-0012-03[Abstract]ObjectiveTostudytheexpressionandclinicalsignificanceofα-methylacyl-CoAracemase（P504S）incolorectalcancer（CRC）andnormalcolorectalmucosa.MethodsImmunohistochemicalmethodwasusedtodetecttheexpressionlevelofP504Sin77specimenswithprimaryCRCresectionand30casesofadjacentnormalmucosafromJanuarytoDecember2017inJiangmenCentralHospital.ResultsThepositiveexpressionrateofP504SinCRCwas76.6%（59/77），whichwassignificantlyhigherthan3.3%（1/30）innormalcolorectalmucosa，andthedifferencewasstatisticallysignificant（P0.05）.ThepositiveexpressionrateofP504SinCRCwithlymphnodemetastasiswas83.3%（40/48），thepositiveexpressionrateinCRCwithoutlymphnodemetastasiswas65.5%（19/29），andthedifferencewasnotstatisticallysignificant（P>0.05）.ConclusionP504SisinvolvedinmediatingthedevelopmentofCRC，andithasimportantclinicalsignificancefortheprogression，prognosisandpostoperativeadjuvanttherapyofCRC.[Keywords]Colorectalneoplasms;P504S;Immunohistochemistry;Clinicalsignificance结直肠癌（colorectalcancer，CRC）是我国常见的消化系统恶性肿瘤之一，近年来世界范围内的发病率逐年上升，位于恶性肿瘤的第3位[1-2]。随着人们饮食习惯、生活结构的变化以及环境的影响，其发病率和死亡率仍在继续增加[3-4]。多项研究证实CRC的发生和发展是多种因素及一系列基因共同作用的结果[5-7]，但其内在的发病机制和具体的信号转导通路仍未彻底阐明，還需要进一步探索。α甲酰基輔酶A消旋酶（α-methylacyl-CoAracemase）也被称为P504S，其是胞质内一种参与脂肪酸的β氧化和衍生过程的蛋白质，是目前公认的用于前列腺癌诊断高度敏感和特异性的标志物[8-9]。多项研究表明，PS04S在其他许多正常组织和肿瘤组织中也呈阳性表达，但PS04s在正常结直肠黏膜及其肿瘤中的表达研究较少且研究结果不甚一致[10-12]。本研究应用免疫组化检测CRC中PS04s的表达及临床意义，现报道如下。1材料与方法1.1材料收集江门市中心医院2017年1～12月首发CRC手术根治切除标本77例，且病理标本经HE染色确诊为CRC患者的石蜡切片和蜡块，术前均未接受化疗，其中男41例，女36例，年龄37～84岁，平均（58.0±5.7）岁。参照WHO推荐的分化分级标准[13]，其中高-中分化腺癌58例，低-未分化腺癌19例;浸润深度T1+T226例，T3+T451例;有淋巴结转移48例，无淋巴结转移29例。同时选取CRC周围正常黏膜组织30例。本研究经江门市中心医院医学伦理委员会审核批准。1.2方法所有标本经10%福尔马林液固定，常规石蜡包埋。以4μm厚度切片，1张行HE染色，1张以PBS溶液代替一抗进行阴性对照，1张行P504S免疫组化染色。选用确切阳性的前列腺癌组织切片作阳性对照，P504S单克隆抗体和SP免疫组化试剂盒均购自福州迈新公司，常规SP法染色。所有实验步骤均按说明书操作。1.3染色结果判定标准免疫组化阳性染色为细胞质内弥漫淡黄、棕黄色颗粒，采用半定量积分法判断结果[10]，具体如下。①阳性细胞数≤5%为0分，6%～25%为1分，26%～50%为2分，51%～75%为3分，>75%为4分;②阳性强度无色为0分，淡黄色为1分，黄色为2分，棕黄色为3分。将①②两者积分相乘，0分为阴性（-），1～4分为弱阳性（+），5～8分为阳性（++），9～12分为强阳性（+++）。1.4统计学方法采用SPSS16.0统计学软件进行数据，计数资料采用率表示，组间比较采用χ2检验，以P<0.05为差异有统计学意义。2结果2.1P504S在正常大肠黏膜组织与CRC中的表达情况P504S在CRC中的阳性表达率为76.6%（59/77），显著高于正常大肠黏膜组织的3.3%（1/30），差异有统计学意义（P<0.01）（表1、图1，见封三）。2.2P504S在各项不同临床病理特征CRC中的表达情况P504S在高-中分化腺癌中的阳性表达率为93.1%（54/58），显著高于低-未分化腺癌中的26.3%（5/19），差异有统计学意义（P0.05）;有淋巴结转移CRC中P504S的阳性表达率为83.3%（40/48），无淋巴结转移CRC中的阳性表达率为65.5%（19/29），两者比较，差异无统计学意义（P>0.05）（表2）。3讨论P504S是一种存在线粒体和过氧化物酶体特异性分子标志物，在脂肪酸及其衍生物的β氧化过程中起作用，多项研究表明P504S可能与肿瘤的发生、发展存在密切关系[14-16]。P504S标志物最早应用于前列腺癌的免疫组织化学诊断，是目前公认前列腺癌的高度敏感和特异的标志物。越来越多研究显示，P504S在乳头状肾细胞癌、尿路上皮癌、乳腺癌、肺癌及喉癌等其他许多肿瘤组织中也呈阳性表达，而且其表达水平与肿瘤的生物学行为及预后有关[17-19]。Jiang等[20]研究242例结肠肿瘤中P504s表达水平，发现P504S在高、中分化结肠腺癌和腺瘤中表达阳性率分别是76%、75%和79%，在增生性息肉和正常黏膜中呈低表达，阳性率只有4%。国内文献报道显示，P504S在CRC高中分化组和低分化组表达率分别为85.7%和25.0%[11]。本研究结果显示，P504S在CRC和正常结直肠黏膜中的表达率分别为76.6%和3.3%，并且P504S在CRC高-中分化组和低-未分化组表达率分别为93.1%和26.3%，这与国内外文献报道相一致[11，15]，进一步提示P504S与CRC的发生发展密切相关。P504S在CRC低-未分化组的阳性表达率显著低于高中分化组可能存在以下两个原因：①P504S可能仅在CRC发生的起始阶段起作用，参与CRC早期癌变的细胞信号转导通路，一旦该信号因子启动，在肿瘤的发展进程中便不再发挥作用;②高-中分化CRC与低-未分化CRC的发生发展由各自不同的信号因子参与介导，并且P504S在高-中分化CRC中发生发展中作用更明显。国内文献报道显示，P504S与CRC浸润深度和Duke′s分期有关，与淋巴结有无转移无关[10]，而本研究结果显示，P504S与CRC浸润深度、有无淋巴结转移均无关（P>0.05），其结果不甚一致提示可能与标本选择、检测方法以及肿瘤类型不同有关，其实际情况如何相信随着笔者研究的进一步深入会得以阐明。综上所述，P504S在CRC发生发展进程中发挥重要作用，可应用于肿瘤早期诊断和筛查，判定肿瘤患者的预后及肿瘤复发等方面，并可作为CRC进展、预后及指导肿瘤的术后辅助治疗，并为肿瘤基因靶向治疗提供新的方向。[Reference][1]陈万青.2012年中国恶性肿瘤发病和死亡分析[J].中国肿瘤，2016，25（1）：1-8.[2]李道娟.结直肠癌流行病学趋势[J].肿瘤防治研究，2015，42（3）：305-310.[3]陈功.结直肠癌防治研究最新进展[J].广东医学，2016，37（22）：3323-3328.[4]崔瀚文.结直肠癌的研究进展[J].世界最新医学信息文摘（连续型电子期刊），2015，21（1）：157-158.[5]欧阳方丹.结直肠癌的分子生物学诊断进展研究[J].中国继续医学教育，2016，8（16）：25-26.[6]史艳春.结直肠癌信号通路及相关基因的研究进展[J].中华生物医学工程杂志，2016，22（5）：433-438.[7]ShiX，GongE，WuX.Alpha-methylacyl-CoAracemase/P504Soverexpressionincolorectalcarcinomaiscorrelatedwithtumordifferentiation[J].ApplImmunohistochemMolMorphol，2007，15（2）：175-180.[8]何乾.前列腺肿瘤标志物的研究进展及临床意义[J].癌症进展，2017，15（1）：7-9.[9]李龙.P504s在前列腺癌中的表达研究[J].中国现代医生，2017，55（29）：6-8.[10]陈金培.P504S在结直肠癌中的表达及其意义[J].现代医院，2009，9（9）：32-34.[11]徐元成.P504S在结直肠癌及上皮内肿瘤中的表达及意义[J].肿瘤学杂志，2008，14（4）：280-282.[12]SeipelAH，SamaratungaH，DelahuntB，etal.Immunohistochemistryofductaladenocarcinomaoftheprostateandadenocarcinomasofnon-prostaticorigin：acomparativestudy[J].APMIS，2016，124（4）：263-270.[13]中华人民共和国卫生和生育委员会医政医管局.中国结直肠癌诊疗规范（2017年版）[J].中华外科杂志，2018，56（4）：241-258.[14]LinF，BrownRE，ShenT，etal.ImmunohistochemicaldetectionofP504Sinprimaryandmetastaticrenalcellcarcinomas[J].ApplImmunohistochemMolMorphol，2004，12（2）：153-159.[15]NgoNT，TanE，TekkisP，etal.Differentialexpressionofp53andp504sinhyperplasticpolyp，sessileserratedadenomaandtraditionalserratedadenoma[J].IntJColorectalDis，2010，25（10）：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