HPLC法测定复方曲安奈德二甲基亚砜溶液中醋酸曲安奈德和氯霉素的含量

HPLC法测定复方曲安奈德二甲基亚砜溶液中醋酸曲安奈德和氯霉素的含量 HPLC法测定复方曲安奈德二甲基亚砜溶 液中醋酸曲安奈德和氯霉素的含量 武警医学院(ActaAcaderaiaeMed/einaeCPAPF)Val10No4 【文章编号】1008—5041(2001)04-0272—02 HPLC法测定复方曲安奈德二甲基亚砜溶液中醋酸曲安奈 德和氯霉素的含量 武警医学院附属医院药剂科朱铁梁张莉都素云0(天津300162) 【摘要】目的:建立同时测定复方曲安奈德二甲基亚砜液中醋酸曲安奈德和氯霉素的方法. 方法:采用反相高教液相色谱法,以Shim—packvp-ODS柱(4.6ram×150ram,5m)作分析柱, 甲醇一水(70:30,v/v)为流动相,流速1ml/min.地塞米松为内标,24Onto紫外检测.结 果:二组分分离良好:平均回收率:醋酸曲安奈德101.70%(RSD=1.65%,n=5),氯霉素 9948%(RSD=1.59%,n=5).结论:该法快速简便,准确可靠,适于该制剂的含量测定 【关键词】反相高教液相色谱法;醋酸曲安奈德;氯霉素 【中围分类号】TQ460.6【文献标识码】A Determinationof~inolonea~etonideacetateandehloraml~cnicoiin compoundsolutionbyRP-HPLC ZIIU1语1',ZitANGLi,HAOSwyun.Departt~ntofPharmacy,Affiliated胁妇fMedical 0强ofChinesePeople'ArmedPoli~Foro~-rianjin300162 【Abstract】0I畸ectToestablishara#methodforthedeterminationofbothTriamclnoloneAce— torddeAcetateandChlorampheuio31incompoundsolution.M目蛐:RP-HPLCwasadoptedwith Shim—packvp-ODSc4.6ram×150mm,5pro)衄analyticalcolumn,methanol-water(70:30,v), 1ml/mln'asthemobilephase.detectionwavelengthof24012111andI)examethasoneasinter nalstart— d丑rd.Re~tlls:Theaveragerecoveryrate:TriamcinoloneAcetonldeAcetatewa8101.70%RSD = 1.65%fIn,=5)andCMoramphe~ficolwas9948%RSD=159%(n=5)Omehtslon:The methodissimple,rapid,reliableandsuitableforassayofthepreparation. 【Key】RP-HPLC;Triamcinoloneacetonideacetate;Chlorampheuio31 复方曲安奈德二甲基亚砜溶液是我院配制的 院内制剂,具有较好的局部抗炎和抗菌效果该 两组分的单一含量测定方法药典己有收载,本文 以HPLC法同时测定复方曲安奈德二甲基亚砜 溶液中二组分含量,方法简便,快速,分离效果 好,适用于该制剂的质量控制. 1仪器与试药 SHIMADZU型色谱仪,LC一10ATvp泵, lOASvp柱箱,SPD—lOAvpLV检测器, CTO— C—R8A积分仪.醋酸曲安奈德,氯霉素,地塞 ? 论着? 米松对照品(均由中国药品生物制品检定所提 供).复方曲安奈德二甲基亚砜溶液(本院制剂 室配制)甲醇为色谱纯,水为重蒸馏水 2方法与结果 2.1色谱条件 色谱柱:Shim-p~VP-ODS柱(4.6mm× 150mm,5/an);流动相:甲酗水(70:30,v/v); 紫外检测波长:2ZlOnm;柱箱温度:50?;积分 仪:衰减(ATTEN)=6,纸速:2mm/min.地 塞米松为内标,进样量10~(附图). 【作者简介】朱铁梁(196B一).男,籍贯河北大城,主管药师,主要从事临床药学,药 物{6覃剂工作.?武警医学院药学教研室 ?武警医学院附属医院内一一科. 武警医学院(ActaAcademi凸eMedicinaeCPAPF)Vo1.10No4?273' 1氰霉紊tR=2.4nfin 2地塞米松=3.8nfin 3醋酸曲安奈穗=69rain 附图HPLC色谱图 2.2标准曲线建立 分别精密称取醋酸曲安奈德对照品150m 氯霉素对照品200mg,地塞米松对照品100mg, 各置1000ml量瓶中,以甲醇水(50:50)溶解并 稀释至刻度,制成对照储备液分别精密量取对 照储备液适量,制成混合对照液,其中醋酸曲安 奈德浓度为1.5,3,6,9,12gg?rnl,,氯霉素 浓度为50,100,200,300,400gg?ml,,内标 地塞米松均为20gg?ml-.在选定的色谱条件 下,进样l0,以样品峰面积与内标峰面积比值 A_/A标(R)对药物浓度(C)进行回归,得醋 酸曲安奈德线性方程:C(g/m1)=45.17R一 2.08,r=0.9914(n=3),得氯霉素线性方程: C(m1)=96.33R-29.44,r=0.9976(n= 3),可见醋酸曲安奈德在1.5,12gg?mlI1范围 内,氯霉素在50,400gg?ml0范围内线性关系 良好. 2.3重现性考察 在上述色谱条件下取样品溶液1ml置10ml 量瓶中,精密加内标液2mi,用甲醇水(S0:50) 稀释至刻度,摇匀,分别在日内的不同时间(0, 2,4,6,8h)和日间(1,2,3,4,5,6,7, 8d)进样10Vl,进行HPLC分析.结果醋酸曲 安奈德日内精密度为RSD=2.29%(n=5),日 间为RSD=4.68%(=8);氯霉素日内精密度 为RSD=1.73%(n=5),日间为RSD=3.75% (n=8).表明方法的重现性良好. 2.4精密度实验 在上述色谱条件下取样品溶液置10ml量瓶 中,精密加内标液2ml,用甲醇水(50:50)稀释 至刻度,摇匀,取1O进样,测得醋酸曲安奈德 RSD=1.08%(n=5),氯霉素RSD=0.416%(n :5).表明方法的精密度较好. 2.5加样回收率实验 精密量取已知确切含量的样品l0倍稀释液 0.4ml置10ml量瓶中,加人内标液对照储备液 2ml,醋酸曲安奈德对照储备液2OOgl,氯霉素 对照储备液1ml,用甲醇水(50:50)稀释至刻 度,摇匀,过滤,取10进样,进行色谱分析. 计算加样回收率,结果:平均回收率:醋酸曲安 奈德101.70%(RSD=1.65%,n=5),氯霉素 99.48%(RSD=1.59%,n=5). 2.6样品含量测定 取复方曲安奈德二甲基亚砜溶液样品3批, 分别精密量取样品lml,用甲醇水(50:50)稀 释l0倍,取0.4ml稀释液精密加人2ml内标液, 用甲醇水(50:5o)稀释至刻度,摇匀.过滤, 进样10gl进行色谱分析(附表). 附表样品含量测定结果(=3) 3讨论 因醋酸曲安奈德,地塞米松在240rim处有 最大吸收,氯霉素的最大吸收值在278nm处, 而氯霉素在240rim处恰有最小吸收,但由于 处方中醋酸曲安奈德(1.5g?L)与氯霉素 (25g?L)含量差异较大,为了提高醋酸曲安 奈德的检测灵敏度,实验选择240nm作为测定 波长.(下转第277页) 武警医学院学摧(AclaAcad~miaeMedicinaeCPAPF)Vol1004 的CSF中NO水平又较正常对照组高,且与病 变严重程度及病程有关,认为NO参与了这些病 理过程圳.关于接触脑脊液神经元.目前认 为它有如下作用:(1)接收功能,即接受来自脑 脊液中各种化学成分的刺激并将这些信息传递到 脑的不同部位的神经元和神经内分泌器官;(2) 即向脑脊液中分泌一些神经肽或其他 分泌功能, 神经活性物质.通过上述途径形成脑.脑脊液环 路,发挥调节作用,.到目前为止,尚未见国 外有关NOS触液神经元的报道,国内学者仅对 大鼠下丘脑第三脑室周围的NOS阳性触液神经 元进行了观察,发现有NOS阳性神经纤维自室 旁核和室周核伸向3V腔,分布于室管膜内,有 些NOS阳性神经元胞体位于室管膜卜,膜内及 膜下.并认为这些神经元胞体和纤维即是所谓的 接触脑脊液神经元I9,10].本研究对整个大鼠脑 的室管系统周围及脑表面分布于室管膜和软脑膜 内的NOS阳性触液神经元进行了详细观察,获 得了较全面的资料,发现NOS阳性纤维在室管 膜内及膜下分布最密集的部位主要是3V及中脑 水管处;第四脑室,中央管及大,小脑表面的室 管膜(软膜)内阳性纤维略少;左右侧脑室周围 未见该阳性纤维分布虽未做组化电镜观察,但 按照通常的概念,具备这种分布特征的胞体和纤 维即可初步认定为触液神经元(纤维).它们合 成并向CSF中释放NO,作为CSF中NO的主要 来源.并通过脑.脑脊液途径(分泌作用)或脑 脊液,脑途径(感受作用),介导对其他部位神经 元的影响,或介导脑血管张力的调节以及病理过 程中的神经毒性作用. 4参考文献 【1chaCI,UhmMR,ShinDH,a/Immunocytochamical study0nthedH【bu0nolNOS—Lmmtuaor~tiven?nhat cerebralcor【exofagedrats.】Neuror@port,1998.9: 2I7I一2174 2李,胡秉诫,沈健康,等重型脑外伤后脑血管痉挛与 内皮素及NO的关系[J.上海第二压科大学,2000, 20(1):55—58. [3]_+围平,李淮玉,郏元悦,等一氧化氨古量在蛛网膜下 腔出血不同时期的临床研究[J.中国神经免疫学和神羟 病学杂志,1999,6(3):179—182 [4]朱凯云,谭利明.黄焙,等脑梗塞患者脑脊液中一氧化 氨的代谢变化一J]湖南匡科大学,1999,24(4) 374—376 5]毕国荣,卢丽萍瘴痛患者血浆及脑脊滩中一氧化氨含量 变化与临床意义.J]脑与神经疟病杂志.1998,6(6): 333—335. L6]赵刚,粟秀招,杨毅宁,等.中枢神经系统炎症患者脑脊 藏一氧化翥古量的检测及其意义[J]临床神经病学杂志, 1998.1I(6):353—354 [7]KorfHW,FahrenkrugJ.Epe~dyrealmdneuronalsp~ializa- tionsinthelateralventricleofthePekinduck,Ariasphttyrhyn- chasLJj.&ttn胤R群,1984,236:217,227 [8]V1B,Vigh—Teichmann1Actualproble~ofthece br0snflind-cont~ting日[J]MicroTeeh, I998.4I:57—83. 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