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免疫荧光步骤免疫荧光步骤 (1) 细胞在盖片上生长融合到95,,100,时，从孵箱中取出; (2) 用预温的1×PBS洗3次，每次10分钟; (3) 预冷的冰甲醇室温固定20,30分钟; (4) 1×PBS洗3次，每次10分钟; (5) 0.2,Triton X,100透化2,5分钟; (6) 1×PBS洗3次，每次10分钟; (7) 5%BSA室温封闭30分钟; (8) 加一抗(用1,BSA稀释)放在湿盒里，4度过夜; (9) 1×PBS洗3次，每次10分钟; (10) 加二抗(用1,BSA稀释)30分钟，闭光; (11) ...

免疫荧光步骤 (1) 细胞在盖片上生长融合到95,,100,时，从孵箱中取出; (2) 用预温的1×PBS洗3次，每次10分钟; (3) 预冷的冰甲醇室温固定20,30分钟; (4) 1×PBS洗3次，每次10分钟; (5) 0.2,Triton X,100透化2,5分钟; (6) 1×PBS洗3次，每次10分钟; (7) 5%BSA室温封闭30分钟; (8) 加一抗(用1,BSA稀释)放在湿盒里，4度过夜; (9) 1×PBS洗3次，每次10分钟; (10) 加二抗(用1,BSA稀释)30分钟，闭光; (11) 1×PBS洗3次，每次10分钟; (12) 含DAPI的荧光封片剂封片; (13) 共聚焦观察并拍照。

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