荧光法检测海味中的组胺

荧光法检测海味中的组胺 荧光法检测海味中的组胺 荧光法 〔适用前，以HCl(1+3)和水洗涤全部塑料及玻璃容器〕 A 仪器 A.a 色谱管 200×7mm〔内径〕聚丙烯管，配有Kontes No. K-422,372Kel-F卡套和约45cm聚四氟乙烯管，以调节与柱相连的出口管高度，控制流速大于3ml/min。或用二通阀〔生物实验室产品〕代替管子。 A.b 荧光计 Perkin-Elmer型203或204，带中压汞灯。或带有在350nm激发光和在444nm测量发射光的仪器。 A.c 重换移液管 1和5ml。 B 试剂 B.a 离子交换树脂 Bio-Rad AG/-X8 50,100目。或Dowex 1-X8 50,100目，以约15ml 2N NaOH/g树脂加入烧杯，使其转变为,OH形式，旋摇混合，静置30min。倒出液体并加碱重复操作。用水洗透树脂，糊状物倒进折叠滤纸，再用水洗。每周制备新树脂并浸在水中保存。$$在管(a)底塞上玻璃棉，填上足以形成8cm树脂床层的糊状物，无论何时，都须使树脂层上保留水层。再生树脂，不在填充柱内进行，需要时，可在烧杯里分批再生，每次提取前，用约10ml水洗柱。 B.b 磷酸 3.57N。稀释121.8ml、85%的H3PO4至1L。如用其他浓度磷酸，配1L 3.57N的H3PO4所需体积V,17493/〔密度H3PO4×%H3PO4〕。标定;吸取5ml H3PO4，以酚酞为指示剂用1.00N NaOH滴定至终点。如需要，可调整浓度。 B.c 邻苯二甲酸二羰基乙醛〔OPT〕溶液 0.1%。100mg OPT溶于100ml，经玻璃容器蒸馏过的甲醇中，装在棕色瓶中，于冰箱内贮存，每周新配。 B.d 组胺溶液 冰箱里贮存。 B.d.1 贮备液 1mg/ml。无碱性。准确称取约169.1mg组胺?2HCl(98%)于100ml容量瓶中，用0.1N HCl溶解并稀释到刻度，每周新配。 B.d.2 中间溶液 10μg/ml。吸取1ml贮备液放进100ml容量瓶，用0.1N HCl稀释到刻度，每周新配。 B.d.3 工作溶液 0.5,1.0和1.5μg/5ml。吸取1，2和3ml中间溶液，分别于100ml容量瓶中，各用0.1N HCl稀释至刻度，每天新配。 化工原料,化学试剂,化玻仪器,食品添加剂，医疗辅料 C 标准曲线的绘制 吸取平行的各标准工作液5ml于50ml的玻璃或丙烯锥型瓶中，各瓶加10ml 0.1N的HCl并混匀。加入3ml 1N NaOH并混匀;在5min内，加入1ml OPT溶液并立即混合;准确于4min后，加入3ml 3.57N H3PO4并立即混匀。每次加液后，至少在OPT反应期间〔顺序加入试剂到一组锥型瓶里，可同时进行6,10个OPT反应〕，充分混匀是很重要。用5ml 0.1N HCl代替组胺溶液作为空白，在1.5h内，以水为参比记录工作标准液的荧光强度(I)，用350nm吸收波长，和444nm发射波长，以(I)〔经空白校正〕对μg组胺/5ml试样作图。 D 测定 E 计算 绘制I对μg组胺/5ml溶液用绕度计或记录仪响应测量并经空白校正过的图一条过原点的直线，斜率,m,[(Ia/1.5)+Ib+2Ic]/3mg组胺/100g鱼,(10)(F)(1/m)(Is)$$式中:Is、Ia、Ib、Ic分别为样品、1.5、1.0和0.5μg组胺标准的荧光强度。F,稀释倍数,ml洗脱液+ml 0.1N HCl/ml洗脱液，未稀释的洗脱液F,1 $$如果校正图形呈非线性，直接用标准曲线定量。横座标上每一分度应小于等于0.1μg组胺/5ml溶液，从曲线最靠近0.05μg组胺/5ml溶液处，读出所有值。$$ mg组胺/100g鱼,(10)(F)(W) $$式中:W,μg组胺/100g鱼〔用标准曲线测得〕 荧光法，海味中的组胺 ----------------------------------?????------------------------------------- 昆明能振商贸有限公司供应/提供荧光法检测海味中的组胺化学试剂及大批量的荧光法检测海味中的组胺工业级/食品级/医药级原料或检验，天天为客户发货至:云南省内各州市，含昆明、曲靖、玉溪、昭通、楚雄、红河、文山、普洱、西双版纳、大理、保山、德宏、丽江、怒江、迪庆、临沧等辖下县级市(www.nengzhen.com.cn )。 化工原料,化学试剂,化玻仪器,食品添加剂，医疗辅料