维生素C含量测定方法综述

维生素C含量测定方法综述 钼蓝比色法逯家辉等提出了一种测定维生素C的新方法，它是基于Folin B试剂与抗坏血酸在pH=3的三氯乙酸酸性介质中反应生成脱氢抗坏血酸，反应产物在910 nm波长处有最大吸光度进行定量分析。该方法的线性范围为0,50(0μg,mL，相关系数r=0(999 86，回收率为98(12,,102(15,。 ――差示旋光法原理方法结果维生素C片在不同PH值的溶液中旋光度有显著差异，而片剂辅料旋光度保持不变差示旋光法消除辅料的影响，直接测出该制剂的含量讨论与 ――差示旋光法方法TEXT 1)溶液的配制准确称取维生素C精制品5.0g，乙二胺四乙酸钠0.37g,置于100mL容量瓶中,用新沸冷却的蒸馏水溶解,加水到指定刻度,配制成50mg/mL的维生素C标准溶液。TEXT 原理方法结果讨论与 ――差示旋光法2)比旋光度与溶液pH值的关系量取10.0mL维生素C标准液于50mL量瓶中,用水稀释至50mL。测定溶液的pH及旋光度,然后逐次分批加入氢氧化钠固体(每次约50mg),每次溶解后,测定一次溶液的pH及其旋光度,得到维生素C溶液的pH及旋光度关系原理方法结果讨论与――差示旋光法选定pH为2.2和6.2 ――差示旋光法2)差示旋光度与溶液浓度关系吸取2.0、4.0、8.0、16.0、20.0mL的维生素C标准液各两份,分别置于50mL的容量瓶,一份用pH2.2的盐酸盐缓冲液定容;一份用pH6.2的磷酸盐缓冲液定容，静置3min后,用220mm测定管，以前者为空白，测定后者的差示旋光度(?a)。文献结果:线性方程为?a=0 205*C+ 0(05，r=0(9964 原理方法结果讨论与――差示旋光法3)辅料干扰试验取混 合辅料20mg(淀粉、硬脂酸镁、EDTA、糊精等按处方比例混匀)两份分别置于50mL的容量瓶,一份用pH2.2的盐酸盐缓冲液定容,一份用pH6.2的磷酸盐缓冲液定容,滤去不溶物,滤液在两种pH值测定差示旋光度。文献结果:辅料的差示旋光度为零，说明辅料对维生素C含量的测定不干扰。原理方法结果讨论与 ――差示旋光法4)稳定性试验同一测试样品，在120min内，每隔3min测定一次差示旋光度。文献结果:差示旋光度基本不变原理方法结果讨论与 ――差示旋光法5)回收率试验精密称取维生素C精制品500.0mg两份，分别置于50mL容量瓶中，各加入20mg辅料，分别用盐酸盐缓冲液及磷酸盐缓冲液配制成50mL溶液，测定差示旋光度。文献结果:平均回收率为97.8,，变异系数cv为1.03,原理方法结果讨论与 ――差示旋光法方法TEXT 6)样品测定取维生素C片剂10片，称重研碎后分别用盐酸盐缓冲液及磷酸盐缓冲液配制成50mL溶液(相当于含Vc 20mg/mL)，滤去不溶物，测定滤液的差示旋光度，根据回归方程计算其含量。TEXT 原理讨论方法结果与――差示旋光法方法TEXT 1)维生素易被氧化,空气及水中的氧均可使其氧化分解，配制溶液时使用新沸冷却水, 同时加人ED TA作为稳定剂;2)样品测定时，片剂部分物质不能完全溶解，必须过滤除去，然后测定滤液的差示旋光度。TEXT 原理讨论方法结果与3 高效液相色谱法测定维生素C 3.1 HYPERSIL―C8色谱柱法3.2 VenusilXBP―C18柱法3.3 其他方法HYPERSIL―C8色谱柱法 采用HYPERSIL―C 8色谱柱，用0(1,低浓度的草酸作流动相，陈昌云等采用0(05 mol,L磷酸二氢钾缓冲液:甲醇=80:20 (v,v)作流动相。流速为1(0mL,min，二极管阵列检测器，检测波长为254 nm。3.2 VenusilXBP―C18柱法系统采用VenusilXBP―C18柱(4(6x250 mm，5μg)，用0(2,的偏磷酸的水溶液作为流动相，流速1 ml,min，检测波长240 nm;维生素C浓度在 0(1-1(0 mg,mL范围内有良好的线性关系。该方法回收率99(89,，标准偏差0(91，操作简便、灵敏、可靠薄层扫描法原理维生素C具有较强还原性，可使蓝色染料2，6-二氯靛酚钠定量地还原成无色的酚亚胺，而本身被氧化成去氢抗坏血酸，利用此特征进行薄层扫描法测定含量。薄层扫描法操作方法与结果(1)试纸的制备2,6-二氯靛酚钠(DCP-Na)溶于无水乙醇配成0.05%的DCP-Na乙醇溶液，滤纸在盛有DCP-Na乙醇溶液的展开缸中浸渍3min，边浸边摇展开缸，使滤纸均匀着色，充分被染料溶液所饱和。取出悬挂于暗处，晾干后，立即放入干燥器中避光保存，备用。薄层扫描法(2)缓冲溶液的配制称取柠檬酸水合物10g，放入1000ml容量瓶中，加入1M 氢氧化钠420ml，并用蒸馏水稀释至刻度，此溶液的pH应为3.5。否则，用酸或碱调整pH值，保存于冰箱中。薄层扫描法3)扫描条件确定在制备的染料试纸上定量点上维生素C对照品进行扫描，维生素C在290nm 处有最大吸收，420nm处无吸收，故选择1=290nm，2=420nm(双波长反射式锯齿扫描。原理方法结果讨论与薄层扫描法4)线性实验4.1)对照品溶液的配制精密称取维生素C标准品100mg，用缓冲溶液配成lmg/ml的标准溶液。精密称取维生素C标准溶液1、2、3、4、5ml，分别置于10ml容量瓶中，用缓冲溶液稀释至刻度。4.2)测定用5 l定量毛细管，分别吸取上述溶液各5 l，点于试纸上。点样后晾干，并将试纸固定在20cm×20cm玻璃板上，放入薄层扫描仪。测定?A 的积分值(峰面积)作为纵坐标Y ，点样量为横坐标X，得一直线方程Y=15692X+130225，r= 0(9991 原理方法结果讨论与 薄层扫描法方法TEXT 5)样品的含量测定取维生素C片10片，研细，精密称取平均片重一片的粉末，放入100ml容量瓶中，加入缓冲液至刻度，振摇，使维生素C溶解，放置、澄清，用吸液管取3ml 移至10ml容量瓶中，用缓冲液稀释 至刻度。用5 l定量毛细管点样品溶液与不同浓度的标准液于同一试纸上，然后扫描测定峰面积，由工作曲线法计算维生素C片中的维生素C含量。TEXT 原理方法结果讨论与薄层扫描法6)回收率实验精密称取维生素C对照品20mg，其它原辅料适量，置10ml容量瓶中，加缓冲液稀释至刻度，振摇，滤过，弃初滤液。分别吸取续滤液与对照品维生素C液各5 l点于同一试纸上，按上述条件进行扫描测定。薄层扫描法点样时各点间距应大于10mm，扫描测不定期波长可做少量变动，但每次测定必须固定同一测定波长点样量在3,8 l之间线性关系较好，当点样量为10 l，线性关系较差。原理方法结果讨论与结束语总之，维生素C的测定方法很多，各种方法各有特点，常用的滴定法方法简单，但在滴定有色物质终点不易判断，分光光度法操作费时，高效液相色谱法是目前发展较快的一种方法，方法灵敏，选择性好，有较好的发展前景。毛细管电泳n51是近几年新兴的分析方法，具有效率高、分析时间短、样品处理简单等特点，但有待于进一步完善。参考文献[1]吴春艳(水果中维生素C含量的测定及比较[J](武汉理工大学学报，2oo7，29(3):90―91([2]王元秀，庄海燕(微量滴定法测定猕猴桃中维生素C的含量[J1(济南大学学报(自然科学版，2001，15(4):374，[3]张颖，等(不同产地枸杞子中维生素C含量测定[J](中国医院药学杂志，2004，24(8):500―501([4]袁叶飞，甄汉深，欧贤红(分光光度法测定大枣中的维生素C含量[J](安徽中医学院学报，2006，25(2):40--41([5]马占玲，等(青椒中还原型维生素C含量的测定[J](渤海大学学报(自然科学版)，2006，27(2):111-113(参考文献[6]逯家辉，等(F0lin B分光光度法测定蔬菜中维生素C的含量[J](分析检测，2oo5，26(8):171―172([7]王艳颖，等(高效液相色谱法测定草莓中维生素C含量[J](大连大学学报，2006，27(2):21―22([8]姜 波，范圣第，刘长建，花艳红(菠萝中维生素C的高效液相色谱分析[J](大连民族学院学报，2003，5(1):52―53([9]刘长建(青椒中维生素C的高效液相色谱分析[J](大连轻工业学院学报，2004，23(3):229―230([10]陈昌云，李小华，刘莉莉(高效液相色谱法测定蜜柚中维生素C的含量[J](化工时刊，2oo7，21(8):19―21(参考文献[11]王爱月，张向兵，李发生(高效液相色谱法测定食品及保健品中维生素C含量的研究[J】(中国卫生检验杂志，2006，16(10):1175-11