【doc】槟榔碱对湖北钉螺足肌胆碱能受体的作用

【doc】槟榔碱对湖北钉螺足肌胆碱能受体的作用 槟榔碱对湖北钉螺足肌胆碱能受体的作用 国血吸虫病防治杂志—99生箜鲞釜 槟榔碱对湖北钉螺足肌胆碱能受体的作用 \,一 耿辉夏国瑾何昌浩 一 【摘要】目的观察湖北钉螺足肌的正常收缩及槟榔碱对其收缩功能的影响一例明槟榔碱对足【 胆碱能受体的作用方法以湖北钉螺足肌为标本,采用药理学方法研究药物对其啦缩活动的影 响结果湖北钉螺足肌的收缩有自发节律性并可持续收缩10h不表现疲劳低壤度槟榔碱'3× 1O-M)能兴奋足肌的收缩,10sM摈榔碱用药后表现为先兴奋后抑制.高浓度摈榔碱(3×1『r'Mj 对足肌的收缩有抑制作用.10M的槟榔碱能完全抑制足肌收缩.6×10M的阿托品能阻断3× 1O-M槟榔碱的兴奋作用.tOM的槟榔碱不能阻断10叫M氨甲酰胆碱的作用结论摈榔碱能 够影响足肌的啦缩活动.低浓度槟榔碱作用于胆碱能受体兴奋足肌的收缩活动高浓度摈榔碱抑制 足肌收缩与胆碱能受体无关 【关键词】槟榔碱湖北钉螺足肌熙碱能受傩,住1iK2寸 THEEFFECTOFARECOLINEONCHoLINoCEPToROF?1.fA_v,AHUPENSISFOOT MUSCLEGengHui,XiaGuofin,HeChanghao1DepartmentParasitology,TongfiMedi cdiUrttzserseityIi/uhan4300302Depctr~ment.fPharmacolog2~,Tongjis~IedlcalUnivers eity [ABSTRACT]ObjectivesTostudythenorma]contractionofOncomelaniahupensisfootmuc1 andthe;nfiueofarecoliandf0elucidacethee{feelo{arecotjneoncholinocepcorMethods EmployedpharmacoIogicaItechnigues,thenormalcontractionandcontractileresponsestodrugsfife recordedResultsAtn0rma】cond】 tion,cot~ttactionolthefootmusc1eshowsspontaneousrhythm and1astsahouttenhour51ncreasingconcentFacionoIarecolinefrom10一Mro10一 'Mq1301]titatirel iscarriedotlc.3×10一Marecol】neisthelowesteffectiveconcertrrationwhichhr】 ngoutio.ero_&s~itx akndfre口 tlencv,rheeffectlastsabolitfiveminutesWhentheconceTl[rationofarecofineexceeds 10M.theresponses.Ithemuscleshowincreaseincontractionamptitudeandfrequencyfirstly, fhenreducecontractionpeakandfrequency3×1O-aMatec~tinereducescont 【actl0npeakand[re quencymakedly,and1O,Marecolinecandepressthecontractioncompletely.6× 10-6Matropine reducestheheightandfrequencyof3×】0一Marecolinecontraction.10一 Marecotineconnotinflu eiicetheeffeccof10一'Mc&rbamvchohneConelusionLowconce? ra"onofarecoiinecanacton choIinoceptorandexcitethecontraccionofIOOt~105C】 e,whilethedeglressedeffecfofhighconcen TatlonofarecO.irte1snot1avolved1nthecholinoceptor. [KeywordslAreco[ineO~tcomelaniahupensis,Footmusde,Cholinoceptor 药物灭螺是控制血吸虫病传播的一项重要措 施,流行血吸虫病的发展中国家探索当地天然的植 物杀螺药是经济可取的槟榔碱(ArecolineAre)系 从棕榈科植物槟榔种子中提取的生物碱.它具有杀 螺作用及杀螺增效活性lIj.槟榔碱与氯硝柳胺,五氯 酚钠台用进行直接浸泡杀螺实验.能有效地降低氯 硝柳胺的剂量.提高杀螺效果.国内外对杀螺增效剂 的研究才刚刚开始.Stein等报道苯骈噻吩磷酸酯与 五氯酚钠组成1:1复方对光滑双脐螺的杀灭有增 ? 车课系国家自然科学基金资助项gtNo39670661 作者单位:1同薪医科大学寄生虫学教研室(武汉430030) 2同济医科大学药理学教研室 例. /fc-~i,2./ /j 效活l胜【戴建荣等报道苯骈噻吩磷酸酯与五氯酚 钠合用对钉螺的杀灭有明显的增效作用01.但对于 增效作用的机制的研究未见报道本文通过研究槟 榔碱对湖北钉螺足肌胆碱能受体的作用,探讨槟榔 碱的杀螺增效机制,为药物灭螺提供有用的资料. 材料和方法 1材料 1.1钉螺采自湖北武汉东西湖,以群体逸蚴法 筛除阳性钉螺.经室外饲养一段时间后取成熟(螺龄 7,8旋),活动力强的钉螺进行实验. 1.2药品氨甲酰胆碱系Sigma公司生产;氢溴 酸槟榔碱由同济医科大学化学教研室提供;硫酸阿 托品为杭州民生药厂生产,批号931029—2 1.3液体Ringer's液含以下成分6.76g/LNa— CI.0.09g/LKCI,0.117g/LCaC1:,0.025g/[NaH— CO!,用蒸馏水配制而成,pH值7.6,7.8. 2方法 取钉螺1只.按李氏方法迅速压破钉螺外壳. 立即将螺体放人经95.0O+5.0CO2混台气体 饱和的Ringer~液中在双目解剖显微镜下剔去破碎 的外壳.用解剖针轻轻拔去厣和软体组织?分离出足 部.用两个不锈钢小钩分别固定在足肌的左右两侧, 一 不锈小钩固定在标本板上,置人盛有1OmI Ringer's液的浴槽中.浴槽中连续通人混合气体.另 一 不锈小钩与肌力传感器相联.静息张力500mg, 平衡lh后,记录结果钉螺足肌的收缩活动经肌力 传感器将收缩信号转变为电信号.记录在XWT一204 型台式自动平衡仪上为测验药品的作用,首先记录 一 段正常的反应曲线,再用微量注射器抽取对应浓 度的药品加人浴槽中,再记录用药后反应曲线.实验 血吸虫 温度控制在2O,25C. 3数据处理 以收缩力,收缩频率为统计指标.测量结果以i 士s表示.t检验统计?检验P<0.05. 结果 1湖北钉螺足肌的正常收缩活动 湖北钉螺足肌收缩呈现的特征:白发节律性;可 持续收缩达l0个小时不表现疲劳,这一收缩特性有 利于观察用药前后药物对足肌收缩活动的影响. 2槟榔碱用药前后对足肌收缩活动的影响 测试了10tool/L至1o_mol/L不同浓度槟 榔碱对足肌收缩活动的影响.10mol/L槟榔碱不 影响足肌的收缩.3×10_.mol/L槟榔碱能使足肌收 缩力增强.频率加快.l0nmL/L槟榔碱表现出先兴 奋后抑制效应,抑制效应呈现时间依赖性.3×1o_ M槟榔碱抑制足肌收缩.而10M槟榔碱用药后能 完全抑制足肌收缩.结果见表1. 表1不同浓度槟榔碱对湖北钉螺足肌收缩活动的影响 TableIEffectofarecolineonthecontractionofOncoraelaniahupensisfootmuscle 3阿托品用药前后槟榔碱对足肌收缩活动的影响 先加人3×10mol/L槟榔碱.记录收缩曲线, 冲洗平衡待曲线恢复正常.加人6×10mol/L阿 托品:8rll[n后再加入3×10mo[/L槟榔碱,记录 收缩曲线.共测试9例标本.未用阿托品时,3×10 mol/L槟榔碱引起的足肌收缩力为72.5mg?21.8 mg,频率为0.5次/min?1.1次/min.加人终浓度 为6×10mol/L阿托品8min后.再加入相关浓度 的槟榔碱t足肌的收缩力为34.1mg?30.1mg,频率 为14次/rain?1.0次/min.用药前后t检测结果. 收缩力变化有显着性差异频率变化有显着性差异 (尸<005). 4槟榔碱用药前后氨甲酰胆碱对足肌收缩活动的 影响 实验步骤同结果3共测试9例标本未加人槟 榔碱时,10mol/L氨甲酰胆碱可引起足肌的强直 性收缩,收缩力为139.6mg?48.2mg,加人10 mo[/L槟榔碱15rain后,足肌的收缩被完全抑制后. 再加人相同浓度的氨甲酰胆碱.仍能引起足肌的强 直性收缩?收缩力为142.0rag=67.8mg,用药前后 收缩力变化无显着差异(P>0.05). 讨论 李赋京用光学显微镜观察了湖北钉螺足肌的组 织结构.王根法用透镜电镜观察了头足部软体组 织.根据其足肌形态学特征,多者认为湖北钉 螺足肌应归属于平滑肌.本实验记录的湖北钉螺足 肌的正常收缩活动有自动节律性,并可持续收缩达 1oh一此项实验结果同平滑肌生理学的一个重要特 征缓慢而持久的收缩相吻合. 国血吸虫病防治杂志!!!垩筻IJ 槟榔碱作为杀虫剂已有很久的历史,该胆碱能 作用于绦虫的神经肌肉系统,使其产生松驰麻痹 摈榔碱也能影响钉螺足肌的收缩.低浓度槟榔碱能 兴奋足肌的收缩,而高浓度的摈榔碱则能抑制足肌 的收缩.由此提示钉螺的神经肌肉系统可能是槟榔 碱的作用靶.阿托品阻断3×10mol/L槟榔碱的兴 奋作用.提示槟榔碱通过作用于钉螺胆碱能受体发 挥作用.10too]儿槟榔碱不能影响氨甲酰胆碱的 作用,提示高浓度槟榔碱抑制足肌收缩的作用但与 胆碱能受体无关,这可能与阻止ca'内流有关 通过对槟榔碱作用机制的初步研究,推测钉螺 的神经肌肉系统可能是槟榔碱的作用靶槟榔碱通 过影响足肌的收缩活动,促进其开厣.头足部的软体 伸出壳外与药物充分接触,同时能抑制钉螺上爬延 283 长药物作用时间其确切作用机制有待深入研究. 参考文献 1何昌洁夏国瑾,李桂铃.等.摈榔碱与灭螺药合用的增效作用研 究中国血暖虫病防治杂志1999_lr4):215 2slclnRobertGUni~eJSta?sPatanl1q80,4238,484 3戴建荣.吴中兴.张燕萍.等.2o种苯骈噻吩磷酸酯娄化合物的杀螺 趋增艘作用.中国血吸虫病防治杂忐一】g93j(】):26 I李赋京钉螺解剖与比较解剖武槛:湖北^民出版杜,19561—44 5王报法,宋赓明,马积庆,等溴乙酰胺对钉螺超徽结构的影响动 物学杂志,991,26(2:5 6GcaryTG,K[elnRD—JerryW【V作为药物作用靶的蠕虫神经系 统国外医学寄生虫病分册.19?3,2u(2o 1999雎一05收稿1999一O4—14修回 (编辑:奏时君) 两种粪检方法检出土源性线虫卵的比较 叶丽萍祝传根孙亚雏许国章王仁元李加成 1材料方法 1.1改良加薜氏厚涂片法将尼龙 绢(jcm×5cm)救在粪便上,用刮片从 尼龙绢上方刮取粪便.将定量板放在载 玻片中部,并蒋通过尼龙绢刮出的粪样 填人定量板的中央L中,填满刮平为止 定量板孔中的粪便量为41.7mg小心 取下定量板.粪便就留在载玻片上.取一 张经透明液提泡的亲水玻璃纸,盖在粪 便上用另一块载玻片轻压,使粪便均匀 展开止玻璃纸边缘,待粪便透明后丑时 镜检. 1?2加藤氏厚涂片法将两块定量 板摞在一起,置载玻片中部随后取粪便 放人定量板孔中t填满为止.约83mg, 再用经透明液浸泡过的亲水玻璃纸覆 盖.然后用另一块载玻片轻轻按压粪便. 使之均匀铺开到不选出玻璃片为度.经 过15min的晾干透明,即可镜幢. 上两种粪检方法.对钩虫,蛔虫, 鞭虫卵的检出效果进行比较 作者单位浙江省宁波市卫生腑疫站(宁浊 31501O) 2结果 2.1土糖性线虫卵检出率对296份 粪便,用改良加藤氏厚涂片法与加藤氏 厚涂片法同时进行土源性线虫卵检查. 结果见表】. 表I两种粪检方法检出土源性线 虫卵的结果比较(人数) 从表i所见,改良加藤氏厚涂片法 和加藤氏厚涂片法检查土源性虫卵检出 率分别为14一lg和l4.86,E,两者无差 别(x'=O04,P>005). 22土源性线虫卵构成比结果见 表2. 表2两种粪检法检查土源性线 虫卵虫种分粪(人次数) 从表2可知,两种粪检方法检查土 源性线虫卵总榆出数是相等的,但改良 加藤氏厚涂片法的蛔虫卵检出数比加藤 氏厚涂片法检出数要高. 3讨论 改良加藤氏厚涂片法因在待检粪便 样本上放置一块尼龙绢,通过尼龙绢刮 取粪便使被榆粪样内减少食物粗渣,可 提高视野清晰度.此法适作各种土源性 线虫卵(蛲虫除外)的定量虫卵计数方 法但该法操作程序较加藤氏厚涂片法 繁琐. 加藤氏厚涂片法操作简便,费用省, 对土源性虫卵的控出率与改良加藤氏厚 馀片法比较差别无显着性,因此,在土源 性线虫病防治试点中应作为首选方法. 但值得注意的是谊法由于粪量较改良加 藤氏厚涂片法多,所以在按压粪便时一 定要将其均匀铺开.切勿太厚,否则视野 清晰度受到影响,虫卵就难辨认. 】9?8.',07收稿1999一?一25修同 (蝙辑:杨晓希)