降钙素基因相关肽对缺血—再灌注心肌细胞电生理的影响

降钙素基因相关肽对缺血—再灌注心肌细胞电生理的影响 降钙素基因相关肽对缺血—再灌注心肌细 胞电生理的影响 Vol_?49? ? 论着摘要? 降钙素基因相关肽对缺血一再灌注心肌细胞电生理的影响 陈前崔长琼杨琳杜克莘曹世平傅文 降钙素基因相关赋(ca[0_toningenere[~tedpept[de, CGRP)近来发现它能明显延埕或者拮抗缺血一再灌注性心律 失常的发生.因而倍受关注.本实验采用驻璃微电极技 术,观察CGRP对缺血一再灌注过程中心室肌细胞电生理特 性的直接作用,为其能防治缺血性和再灌注性心律失常提供 理论依据 赍料和方法健康家兔21只,麻醉后迅速开胸取出心 脏,制各左心室肌标本(10mm,15minx3mm×3ram),采 用标准玻璃微电极技术(电极阻抗10MQ~20MQ)记录正 常状态动作电位(~ctionpotent~[,AP)作为对照,开始实验. 由不同缺血条件分为四组:(1)缺血未用药组:用摸拟缺血台 式液配方(raM):NaCI144.0,KCI8.O,NaH2PO'0.33,Mg- c17?6H2O1.05,cl21.8,HEPEs5.O,乳酸钠20,NaOH 调节pH为6.80士0.05,并在其使用前和灌流中持续充以 100N2,使动脉氧分压保持在40mmHg(1mmHg一 0.133kPa)左右灌流左心室肌20rain后,立即换成100 0的改良台式液再灌注30rain;C2)预处理组:用含lOM CGRP的改良台式液灌流10rain后,方法同?组进行缺血一 再灌注过程;(3)缺血同时用药组:用含l0MCGRP的摸 拟缺血台式液灌流20rain后,再同?组进行再灌注;(4)缺 血后用药组:用模拟缺血台式渡灌流10rain后,给予内宙 l0MCGRP的缺血液继续灌流10rain后,再同?组进行 再灌注.整十缺血一再灌注过程中的AP经微电极放大嚣 (MEz一8201,NihoaKobde~)输入vc一10双线记忆示帔器, 同时用磁带记录仪记录实验的全过程,实验结束后再经多导 生理记录仪ACQ4600软件和计算机DASA软件采集参数, 再由Gould6120绘图仪绘出测量心肌细胞AP的各项参数 包括:?细胞静息膜电位(RMP);?动作电位振幅(APA); @零相最大除极速率(Vsmx)}?动作电位时限(APD)本实 验取动作电位复极至50%(APD)和95%(APD)的时限f @APDsc-~(=APDgs—APD反映动作电位后期时限);? APDso/APD.s(反映动作电位复极前期占整个复极过程的比 例)并观察缺血一再灌注过程中异常电话动的发生情况. 结果(1)缺血一再灌注过程中家兔左心室肌AP变化: 与正常AP比较,缺血和再灌注早期AP各参数逐渐下降, 怍者单位:710061西安交通大学第一医院心内科(陈前,崔长 琮,杨琳,傅文);西安大学医学院机能中C,-(杜克莘);解放军第一军 医大学南方医院心内科(曹世平) 伴有AP复极前期明显缩短,复极后期相对延长.再灌注早 期(5min内)AP异常加剧,随后逐渐恢复,再灌注30min时 AP接近正常}(2)10MCGRP对缺血一再灌注过程中左心 室肌AP变化的影响:预处理组和缺血同时用药组均明显减 慢缺血和再灌注早期AP的异常变化,明显加快再灌注时 AP的恢复.缺血后用药组能明显相对延长APD5.,缩短 APDm增大APD/APD*,明显改善AP的异常复极过程} 但对RMP,APA和再灌注时AP恢复时间无影响;(3)10 McGRP对缺血一再灌注过程中异常电活动的影响:正常状 态下,左心室肌电生理特性稳定,未出现异常电活动.缺血一 再灌注过程中,缺血未用药组有2例在缺血12rnin和l5 rain时出现早期后除极(EAD),有4例在再灌注2,5min 内出现后除极活动,包括EAD和延迟后除极(DAD).持续3 ,5mln自动消失;其它3组均有1倒在再灌注早期出现短 暂后除极活动用CGRP干预缺血的3组后除极活动出 现率明显低于缺血未用药组(1/6vs6/6,P<0.05). 结论心肌缺血时,由于代谢障碍和离子分布异常,必 然导致心肌细胞电生理特性改变,包括静息电位,除极化. APA和Vmax下降,AP时限逐渐缩短,尤以AP复极前期 塘短明显,AP不应期的相应改变.而且缺血心肌再灌注会 加重心肌损伤,缺血时AP参数异常变化加剧,甚至促发再 灌注性心律失常本实验中缺血未用药组在缺血一再灌注过 程中现出AP的异常变化.然而用lOMCGRP干璜的3 组能明显改善AP的异常复极过程,甚至延缓AP的异常变 化的进程,加快再灌注时AP的恢复.CGRP的稳定缺血一再 灌注心肌电生理的作用与它对膜离子流的不同作用有关.正 常状态下,CGRP既能促进ca抖内流,又能促进K外流缺 血状态下,CGRP可能对lh^rP有激活作用,因而AP复极后 期明显加速,改善缺血时异常复极过程此外,研究表明 CGRP可能参与缺血预适应过程,增强心肌抗缺血能力.而 且还能促进氧自由基的清除,稳定缺血心肌细胞膜.正是由 于CGRP对膜离子流的影响和心肌保护作用,所以CGRP 能在缺血前,缺血同时,缺血后稳定缺血心肌细胞电生理状 态,使缺血一再灌注过程中用药干预组后赊极活动明显少于 未用药组,从而能够减少缺血一再灌注过程中心律失常的发 生.' (收稿ff期:2000-03-10) (本文编辑:镣世杰)