金葵胃药胃粘膜保护作用的研究

金葵胃药胃粘膜保护作用的研究 金葵胃药胃粘膜保护作用的研究 1 111刘玮 潮欣宜胡焕明 陈化洋 尹娜 (淮北职业技术学院药理学教研室 淮北 235000) 摘要 目的 探讨金葵胃药(JK)对大鼠胃粘膜损伤的保护作用。方法 采用阿司匹林灌胃致大鼠粘膜损伤模型，观察各实验组胃粘膜损伤指数。检测血清中肿瘤坏死因子(TNF-α)、内皮素(ET)和白细胞介素-1β(IL-1β)的含量变化。结果 JK用药组的胃粘膜损伤指数较模型对照组显著降低;血清中TNF-α含量下降，而IL-1β含量明显上升;ET有下降趋势，但无显著性差异。结论 JK对大鼠胃粘膜损伤具有保护作用，其机制可能与提高血清中IL-1β含量和降低TNF-α水平有关。 关键词 金葵胃药;胃粘膜;TNF-α;IL-1β;ET;大鼠 胃粘膜损伤性疾病如胃炎、胃溃疡是种常见病、多发病，严重影响人们生活质量和身体健康。金葵胃药是根据中医药理论和多年临床经验总结而成的纯中药制剂，具有益气健脾、清热解毒、消食化滞等功能，临床用于胃炎、胃溃疡的治疗，取得良好的疗效。为探讨其作用，我们 [1]在前期抗胃粘膜损伤保护作用工作基础之上，对该药做进一步研究，现报道如下。 1 材料与方法 1.1 动物 SD大鼠，??兼用，体重(220?20g)，由徐州医学院实验动物中心提供[SCXK(苏)2004-0003]。 1.2 药物与试剂 金葵胃药(JK)，淮北矿业集团海孜煤矿医院消化专科室提供(由本科药化室按拟定的质量制备);西咪替丁(Cim)，山东方明药业股份有限公司生产，批号:040203;阿司匹林，山东新华制药股份有限公司生产，批号:0404551;甲醛，宿州化学试剂厂生产，批号:20050309;TNF-α试剂盒，北京北方生物技术研究所生产，批号:051111;IL-1β试剂盒，北京北方生物技术研究所生产，批号:051111;ET试剂盒，北京北方生物技术研究所生产，批号:051111。 安徽省教育厅课题 NO:2005KJ 394 ZC 1 1、淮北职业技术学院药理学教‎‎研室，淮北 235000 作者简介:刘 玮，女，43岁，硕士，副教授。 1.3 仪器与设备 JA3003N电子天平，上海精密科学仪器有限公司生产;HH-42快速恒温数显水浴箱，江苏天由有限公司生产; 80-2型低速离心机，常州国华电器有限公司生产;γ-911自动放射免疫计数器，中国科技大学创新公司中佳分公司生产。 1.4 方法 [2]1.4.1 阿司匹林诱发大鼠粘膜损伤模型制备和血清样本制备 SD大鼠60只，随机等分为6组，每组10只:空白对照组，模型对照组，JK小、 -1中、大剂量(90，180，360mg?kg)组，西咪替丁(Cim)阳性对照组 -1(140mg?kg)。每日ig一次，连续7天。第6天ig后开始禁食24h， -1不禁水。第7天末次给药后，大鼠ig阿司匹林(100mg?)。kg5h后用 -110%水合氯醛(0.3g?kg)ip麻醉大鼠，接着沿腹正中线剪开，分别结扎幽门、贲门，取出胃，并向胃内注入10%甲醛8ml，置于同浓度甲醛中 -1固定，30,后测定胃粘膜损伤指数;然后分离腹主动脉，取血，2000r?min离心10min，取上清液进行TNF-α、IL-1β与ET检测。 1.4.2 大鼠胃粘膜损伤指数测定 取上述固定在甲醛中的大鼠胃，沿胃大弯将胃剪开，用水洗去胃内残渣展开，可见局限于胃粘膜的点状或线 [3]状出血糜烂性病灶，记录病灶长度并打分。参照Guth标准:正常为0分，病灶长度?1mm为1分，1mm,病灶长度?2mm为2分，2mm,病灶长度?3mm为3分，3mm,病灶长度?4mm为4分，,4mm为5分，损伤宽度,2mm，分数乘以2，各分值相加为该动物的损伤指数总分。 1.4.3 大鼠血清TNF-α、IL-1β和ET测定 取以上实验制备的大鼠血清样本，分别按照试剂盒说明测定TNF-α、IL-1β和ET含量。 1.5 数据处理 实验数据用X?S示，用t检验比较组间数据差异的显著性。 2 结果 2.1 JK对大鼠胃粘膜损伤的影响 实验结果显示，JK大、中、小剂量组可显著降低阿司匹林所致的胃粘膜损伤指数(P,0.05或P,0.01)，各剂量组抑制率分别是21.07%、43.22%、55.55%，说明JK对大鼠胃粘膜 2 损伤具有明显的保护作用。 Tab1 Effect of JK on the gastric mucosal lesion in rats induced by aspirin (x?s, n=10) -1Group Dose(mg?kg) Index of lesion Inhibitory rate of lesion(%) Blank — 0.0?0.0 — ##Model — 50.51?4.10 0 JK 90 39.87?3.42* 21.07 180 28.68?3.26** 43.22 360 22.45?4.23** 55.55 Cim 140 18.36?2.18** 63.65 ##*P<0.05,**P<0.01 vs Model group; P<0.01 vs Blank group 2.2 JK对大鼠血清TNF-α和IL-1β的影响 如表2所示，模型组大鼠血 -1清TNF-α明显升高，IL-1β显著下降，JK(90，180，360 mg?kg)可降低血清TNF-α含量，升高IL-1β水平(P,0.05或P,0.01)，其中JK -1(180mg?kg)剂量组就较显著。JK尚能降低ET含量，但经统计学分析，无显著性差异。 Tab2 Effect of JK on the content TNF-αand IL-1β of blood serum in rats by aspirin (x?s,n=10) The contents of blood serum -1Dose(mg?kg) Group -1-1-1TNF-α(fmol?ml) IL-1β(ng?ml) ET(pg?ml) Blank — 5.34?1.31 0.23?0.03 40.54?10.59 ## ###Model — 7.97?1.74 0.19?0.23 45.84?8.75 JK 90 6.59?0.63 0.22?0.04 44.48?4.81 180 4.94?0.93** 0.24?0.03** 43.04?4.59 360 5.17?1.23* 0.23?0.04* 42.39?5.01 Cim 140 5.02?1.69* 0.22?0.02 42.10?6.61 ###*P<0.05, **P<0.01 vs Model group; P<0.01 , P<0.01 vs Blank group 3 讨论 众所周知，胃粘膜损伤是由于胃粘膜损伤机制增强，防御机制减弱‎‎所致，阿司匹林所致胃粘膜损伤主要是直接刺激胃粘膜，减少体内保护‎‎因子产生，引起胃壁组织破坏、炎症反应和血液供应障碍，造成溃疡糜 3 烂等胃粘膜损伤‎‎。细胞因子TNF-α有较强的促进细胞凋亡的作用，改变 胃肠上皮细胞间的紧密连接，增加粘膜的通‎‎透性，加重局部组织缺血、 [4]缺氧;还是一个重要的致炎因子，引起中性粒细胞活化，产生炎症。IL-1‎‎ [5]β是很强的胃酸抑制剂和抗溃疡因子，还能增加前列‎‎腺素产生，因此IL-1β在胃粘膜保护中起重要‎‎作用。ET是一缩血管活性因子，通过其强烈 的收缩血管作用‎‎导致胃粘膜循环障碍，胃粘膜血流量显著下降，进而介 [6]导胃粘膜损伤。 金葵胃药是由制黄连、郁金炭、地枯罗汁、紫河车、制鸡内金、绞股金、龙葵等组成的纯中药制剂。本实验结果表明，金葵胃药能降低胃粘膜损伤指数，有明显对抗阿司匹林所致的胃粘膜损伤，且能降低血清TNF-α、ET含量和升高IL-1β水平。说明降低血清中TNF-α、ET和升高IL-1β是金葵胃药对胃粘膜损伤保护作用的机制之一。 参考文献 [1] 刘玮,胡焕明,潮欣宜等.金葵胃药对实验性胃粘膜损伤的保护作用,中药药理与临 床,2005;21(5):51-52 [2] 徐叔云,卞如濂,陈修等.药理实验方法学,第三版,北京:人民卫生出版社,2003;1331 [3] Guth PH, Aures D, Paulsen G.. Topical aspirin plus HCL gastric lesions in the rat . Gastroenterology,1979;76(1):89-93 [4] 余秋,候晓华.细胞因子在幽门螺杆菌致病过程中的作用.国外医学.消化系疾病分 册,1999;19(2):77-80 [5] Beales IL, Canlam J. Inhibition of carbachol stimulated acid secretion by interl eukin 1beta in rabbit parietal cells reguires protein kinase C. Gut, 2001;48:782-788 [6] Said SA,ET Monafy AM.Role of endogenous endothelin-1 in stress induced gastril mucosal damage and acid screetion in rats. Regul Pept,1998;73(1):43-50 4 Studies on the effect of Jin Kui gastric drug in protecting gastric mucosal Liu Wei ,Chao Xinyi, Hu Huanming, Chen Huayang, Yin Na (Dept of Pharmacology ,Huaibei Professional and Technical College, Huaibei 235000) Abstract Objective To investigate the protective effects of Jin Kui gastric drug on gastric mucosal lesion in rats. Methods Used the model of gastric mucosal lesion in rats induced by aspirin ,observed and determined the indexes of gastric mucosal lesion in experimental groups respectively, measured the contents of tumour necrosis factor-α(TNF-α),endoth elin(ET)and interleukin-1β(IL-1β)in blood serum. Results The indexes of gastric mucosal lesion after administration of JK does group was obviously reduced compared with model group. The coutents of TNF-αwas markedly decreased and the levels of IL-1βwas significantly increased. The contents of ET was also reduced, but it showed no difference in JK does group and the ‎‎‎ control Conclusion JK can protect gastric mucosal lesion in rats and its mechanism maybe related to decreased the contents of TNF-α,ET and increa sed the levels of IL-1β. Key Words Jin Kui gastric drug;gastric mucosal lesion;TNF-α;IL-1β; ET ; rat 5