分光光度法同时测定维生素C和维生素E

分光光度法同时测定维生素C和维生素E 分光光度法同时测定维生素C和维生素 E 一、 实验目的 学习在紫外光谱区同时测定双组分体系——维生素C和维生素E。 二,实验原理 维生素C和维生素E在食品中能起抗氧化作用，即他们在一定时间内能防止油脂变性。维生素C是水溶性的，维生素E是脂溶性的，但是他们都溶于无水乙醇，因此能在同一溶液中，用与可见分光光度法测定双组分相同的原理，在紫外区测定它们。 二、 仪器与试剂 (1) 仪器 紫外可见分光光度计(T6)、石英吸收 池一对、50ml容量瓶9只、5ml，10ml吸量管 各两只。 (2) 试剂 维生素C、维生素E、无水乙醇 三、 实验内容与操作步骤 (1) 准备工作 ?(清洗容量瓶、吸量管等玻璃仪器备用。 ?(检查仪器，开机预热20min，并调试至工作状态。 (2) 配置系列标准溶液 ?(配制维生素C系列标准溶液:分别吸取浓度为 7.50*10^-5mol/L维生素C母液4.00ml、6.00ml、 8.00ml、10.00ml于4只干结的50ml容量瓶中， 用无水乙醇稀释至刻度，摇匀。 ?(配制维生素E系列标准溶液:分别吸取浓度为 1.13*10^-4mol/L维生素E母液4.00ml、6.00ml、 8.00ml、10.00ml于4只干结的50ml容量瓶中， 用无水乙醇稀释至刻度，摇匀。 ?(试样的制备:取未知试样5.00ml于一干结的50ml 容量瓶中，用无水乙醇稀释至刻度。 四、 实验记录及数据处理 (1)、绘制吸收光谱曲线 ?Vc吸收光谱曲线 λ 220 230 240 250 260 270 280 290 300 310 320 A 0.577 0.737 1.020 1.054 1.004 0.870 0.780 0.696 0.524 0.359 0.185 Vc吸收光谱曲线 1.2 1 0.8 A0.6A 0.4 0.2 0 320340 λ ?Ve光谱吸收曲线 λ 220 230 240 250 260 270 280 290 300 310 320 A 0.578 0.737 1.011 1.035 0.991 0.841 0.745 0.655 0.487 0.328 0.166 Ve光谱吸收曲线 1.2 1 0.8 A0.6A 0.4 0.2 0 320340 λ (2)、绘制工作曲线 ?Vc工作曲线 A 0.983 1.034 1.065 1.105 C(mol/L) 0.000006 0.000009 0.000012 0.000015 y = 13233x + 0.9078图表标题2R = 0.9909 1.12 1.1 1.08 1.06A1.04线性 (A)1.02 1 0.98 0.96 00.0000050.000010.0000150.00002 ?Ve工作曲线 C 0.00000904 0.00001356 0.00001808 0.0000226 A 0.978 1.022 1.036 1.051 图表标题A = 5154.9c + 0.94022R = 0.91311.08 1.06 1.04AA1.02线性 (A)1 0.98 0.96 00.0000050.000010.0000150.000020.000025 c (3)、试样的测定 λ240 250 ()nm A 0.999 1.030 (4)、数据处理 由光谱吸收曲线得, Vc、Ve的最大吸收波长均为250nm, 在λ=240nm时, A1.020ε,,,1.13*10^5L/(mol*cm)Vcbc1*9*10^,6 A1.011ε,,,7.46*10^4L/(mol*cm)Vebc1*1.356*10^,5 在λ=250nm时, A1.054ε,,,1.17*10^5L/(mol*cm)Vcbc1*9*10^,6 A1.035ε,,,7.63*10^4L/(mol*cm)Vebc1*1.356*10^,5 则, A,bc，bc,,xxyy 0.999,1.13*10^5*c，7.46*10^4*c VcVe1.030,1.17*10^5*c，7.63*10^4*cVcVe解得, ,6c,5.78*10mol/LVc ,6c,4.64*10mol/LVe 五、 结论 -6经测定，样品中维生素C浓度为5.78*10mol/L、维 -6生素E浓度为4.64*10mol/L。