高级计算器方差分析的计算程序
3 莉 毕 永 杨
()陕西省子长县疾病预防控制中心 子长 717300
doi :10 . 3969/ j. issn. 100424337 . 2011 . 02 . 006
方差分析是重要的统计推断
之一 ,计算 F 值的过程 操作 : 显示 : 说明 : 繁琐复杂 。笔者利用 SD 机能输入程序变量 ,编制了方差分析 MOD E 3 SD 状态 的 计 算 程 序 , 通 俗 易 懂 、键 面 简 洁 、运 算 方 便 。现 以 操 作 IN V KA C IN V Min K、M 寄存器清零 χ CA SIOf- 180 P 计算器为例 ,介绍方法如下 : 279 DA TA 输入变量
334 DA TA 1 写入程序 303 DA TA
338 DA TA 11 1 准备
)( MOD E 3 SD 状态 198 DA TA
( )IN V KA C K 寄存器清零 ? P”1 1 提示
1 已运算 MOD E )(令 :2 DA TA Kin 6 IN V Min 输入数值 MOD E 3 SD 状态
5 DA TA 229 DA TA 输入变量
274 DA TA 8 DA TA
( )MOD E O L RN 状态 310 DA TA
() IN V PCL 程序存储器清零 MOD E ? P 2 提示样本 2 已运算 1 ()P进入程序 P1 区1 MOD E 3 SD 状态 11 2 程序 210 DA TA 输入变量2 χKo ut 2 Kin - 2 Kin + 5 IN V? Ko ut 3 Kin 285 DA TA
- 3 Kin 117 DA TA
2 χ? P1 3 提示样本 3 已运算 MOD E + 6 = Kin + 4 1 M + M R IN V HL T Ko ut 5 IN V? Ko ut
MOD E 7 2 设定小数 6 = Kin - 1 Kin - 4 1 IN V M - Kin - 6 Ko ut 4 Kin - 1
RU N 1 . 89 F 值? M R Kin - 6 ? Kin 5 Ko ut 1 Kin 2 × Ko ut 6 Kin ?2 =
()Kin 3 38 步 显示 1 . 66 ??? M R 2 . 00 n′组间
11 3 退出与运算 Ko ut 4 14365 . 53 SS组间
Ko ut 5 7182 . 76 M . S组间 MOD E 3
Ko ut 6 8 . 00 n′SS组内
2 运算实例 30453 . 20 Ko ut 1 组内
3806 . 65 Ko ut 2 M . S组内 21 1 单因素方差分析的计算 Ko ut 3 1 . 89 F 值
[ 1 ]表 1 两种制剂治疗钩虫感染效果资料 )( = 4 . 46 本例 F 值 = 1 . 89 , 查表 F 2 , 8 0. 05
? 1 . 89 < 4 . 46 ? P > 0 . 05 编 号 对照组 甲组制剂 乙组制剂
结论 :3 组均数间差别无显著意义 。 1 279 229 210 21 2 双因素方差分析的计算 2 334 274 285 仿 2 . 1 操作 ,按 RU N 键后在 M 寄存器 、K寄存器 、K寄 4 5 3 303 310 117 存器分别读取处理组或单位组的 n′、SS 、M . S ,列入分析用表 。 4 338 () 求出单位组 或处理组各值后 ,由 K寄存器数据减去处理组1 5 198
收稿日期 :2010209205
3 陕西省子长县妇幼保健所
?138 ?
数理医药学杂志 2011 年第 24 卷第 2 期
+ () ? 基础医学研究 ? 文章编号 :100424337 20110220139203 文献标识码 : A 中图分类号 : Q8131 1 1
大鼠骨髓间充质干细胞体外培养以及成骨诱导
龚子龙 戴冀斌
()武汉大学基础医学院 武汉 430071
摘 要 : 目的 :分离培养大鼠骨髓间充质干细胞 ,研究其体外培养的生物特性 。方法 : 获取骨髓间充质干细胞进行培养 ,倒置相
β差显微镜观察细胞生长情况 ,绘制生长曲线 ,流式细胞仪鉴定细胞表面抗原 。在地塞米松 、2甘油磷酸钠 、抗坏血酸的作用下 ,进行成
骨诱导分化 。结果 : 原代和传代培养的体外培养细胞呈现梭形 、多角形外观 ,具有较强的生长增殖能力 ; 细胞 CD29 抗原呈阳性表达 ,
CD34 呈阴性表达 。分化细胞表现成骨细胞特性 ,茜素红染色有橘红色磷酸盐胞外基质沉积 。结论 :建立稳定可靠的分离培养大鼠骨
髓 B M2MSCs 方法 ,分离出的 BM2MSCs 具有干细胞的生物特性 ,可用于组织工程中的种子细胞 。
关键词 : 间充质干细胞 ; 骨髓 ; 成骨诱导 ; 细胞培养
doi :10 . 3969/ j . issn . 100424337 . 2011 . 02 . 007
( ,1000r/ min 离心 ,弃上清 ,用含 10 % FB S 的 DM EM/ F12 悬液 在大 鼠 骨 髓 基 质 系 统 存 在 的 骨 髓 间 充 质 干 细 胞 Bo ne ) mar ro w mesenchymal stem cell s ,BM2M SCs,是一种除造血干 培养夜悬浮细胞按 1 传 2 比例传代培养 。 细胞以外的 、具有多向分化潜能的干细胞 ,可以向骨 、软骨 、肌 11 3 骨髓 M sc s 传代培养的生长曲线测定 4 组织 、皮肤 、脂肪 、神经等多种组织分化 ,因此可以作为组织工 选取 l 、5 、10 传代细胞胰酶消化 ,以 3 ×10个/ 孔接种于 [ 1 ] 程中的种子细胞 。虽然容易分离得到 ,但骨髓中 BM2M SCs 24 孔板 ,每天取 3 孔消 化 计 数 , 连 续 7 天 。以 培 养 时 间 为 横 含量很少 ,难以满足组织工程和细胞治疗的需要 ,因此体外纯 轴 ,细胞数为纵轴 ,绘制生长曲线 ,进行分析比较 ,计算倍增时
间 。 化和扩增尤其重要 。
11 4 M SCs 的鉴定及成骨诱导
收集培养的第 3 代 M SCs , PB S 洗涤 3 次制 备成单细胞 5 悬液 ,每个样品约需 2 ×10个细胞 。将重悬后的 SD 大鼠骨 髓1 材料与方法
间质干 细 胞 悬 液 转 移 至 流 式 检 测 管 中 , 分 别 加 入 CD29 、 11 1 主要试剂及仪器 μCD34 及同型对照各 10l ; 避光室温孵育 30 分钟 ; PB S 冲洗 2 () SP F 级 SD 大鼠 雄性 ,体重 90,100g,由武汉大学实验 ( 遍后进行流式检测 ; 实验组加 DM EM/ F12 诱导液 完全培养 ( ) ( 动物中心提供 。DM EM/ F12 培养基 Gibco 、胎牛血清 杭州 - 5 基 + 10 mmol/ l 地塞米松 + 0 . 3 mmol/ l 维生素 C + 10 mmol/ ) ( ) ( ) 四季青、胰蛋白酶 Invit ro gen、倒置相差显微镜 Olymp us、 β) l 2磷酸甘油钠,对照组仅加入完全培养基 ,培养 3 周 , PB S 冲 ( ) 细胞培养箱 Fo r ma, CD29 、CD34 兔抗鼠单克 隆抗体均购自
洗后 4 %多聚甲醛固定细胞 ,进行茜素红染色 5 min , 显微镜下 DA KO 公司 。
11 2 M SCs 体外分离 、培养 观察细胞外基质的钙沉积 。
颈椎脱臼法处死大鼠 ,于骨髓中分离出细胞 , 置于 37 ?、
5 %CO饱和湿度的培养箱中培养 ,3,4 天首次换液 ,以后每2
3 天换液 1 次 。每天观察细胞生长情况 ,8,12 天细胞生长融
合达 80 %以上 , 用含有 0 . 01 % ED TA 的 0 . 25 %胰 蛋 白 酶 消 2 结果
化 ,用含 10 % FB S 的 DM EM/ F12 培养夜终止消化 ,收集细胞
21 1 倒置相差显微镜观察
细胞原代培养的最初培养物中悬浮血细胞成分居多 , 逐
3 冯志臣 ,张旭平 1 单因素多组资料方差分析简捷计算法探讨 1 卫 () 或单位组SS ,即为 SS,手工操作 ,计算出各 F 值 。 误差 ( ) 生研究 ,1995 ,24 6:383,3841
王继明 1 计算器在单因素方差分析中通用计算模式探讨 1 四川省 4 ( ) 卫生管理干部学院学报 ,1999 ,18 2:133,1341 参 考 文 献
王净净 1 两因素方差分析的计算器程序 1 湖南中医药学报 ,1999 , 5 ( ) 5 11:42,431 1 上海第一医学院卫生统计教研室 1 医学统计方法 1 第 1 版 ,上海 : 上海科学技术出版社 ,1979 ,37,711
( ) 2 胡国忠 1 方差分析的计算程序探讨 1 中国公共卫生 , 1989 , 5 8 :
221
收稿日期 :2010211225
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