比目鱼肌mito tracker染色比目鱼肌mito tracker染色
试剂:
PBS(PH:7.4),2L
Mito tracker 染料:35-37ml(避光操作) 4%甲醛固定液100ml(4?预冷)
试验方法:
1. 取材
取比目鱼肌(双侧)于肌腱处剪下,pbs中保存。 用振动切片机将比目鱼肌纵切成小块
2. 染色
将切成小块的肌肉置于装有mito tracker 染液的烧杯中,锡纸包裹烧杯,充氧吹打30min
PBS洗5次,每次15min
注:从染色开始(包括染色过程),全程避光。
3. 固定
将组织块置于甲醛固定液中,摇床6...
比目鱼肌mito tracker染色
试剂:
PBS(PH:7.4),2L
Mito tracker 染料:35-37ml(避光操作) 4%甲醛固定液100ml(4?预冷)
试验方法:
1. 取材
取比目鱼肌(双侧)于肌腱处剪下,pbs中保存。 用振动切片机将比目鱼肌纵切成小块
2. 染色
将切成小块的肌肉置于装有mito tracker 染液的烧杯中,锡纸包裹烧杯,充氧吹打30min
PBS洗5次,每次15min
注:从染色开始(包括染色过程),全程避光。
3. 固定
将组织块置于甲醛固定液中,摇床60转,30min PBS洗3次,每次15min
4. 切片
将组织块包埋在冰冻切片机座上,横切组织,厚度5mm,
5. HE染色
将载玻片浸入苏木精染液10分钟
将切片移入分化液中10s
将切片移入反蓝液中10s
蒸馏水洗3次,每次20min
分别入70%和90%酒精脱水10min 如酒精伊红染液3min
酒精脱水5min
二甲苯透明三次,每次5min
6. 封片
中性树胶封片
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