【doc】 血府逐瘀软胶囊药效学试验研究

【doc】 血府逐瘀软胶囊药效学试验研究 血府逐瘀软胶囊药效学试验研究 中药药理与临床2005;21(4)7 (AM.()nthecontrary,SiwuI,ShudibaishaoandShudi(四物I,熟地白芍和 熟地)decoctiongroupscanobviouslystimulatedtheN,A andAAofthe(M(P<0.05).Conclusion:ThepromotingbloodflowprescriptionsandherbssuchasTaohongsiwuI,?,Siwu?, Faorenhonghua,Taoren,Danggui,ChuanxiongandChishaodecoctiongroupshavepotentactivitytoinhibittheCAMangiogenisis,where— astheinvigoratingbloodprescriptionsandherbssuchasSiwuI,ShudibaishaoandShudidecoctiongroupsCanobviouslystimulatetheCAM angiogenisis. KeywordsTaohongsiwuDecoction(桃红四物 汤);angiogenisis;separatedprescriptionschickchorioallantoicmembrane 血府逐瘀软胶囊药效学试验研究 李显华,向绍杰,杜佳林,张宏,贾冬 (辽宁省中医研究院,沈阳110034) 摘要目的:比较新剂型血府逐瘀软胶囊与原剂型胶囊剂的主要药效 学作用.方法:观察对急性血瘀模型大鼠血液流变性 的影响;对大鼠实验性血栓形成的影响;对小鼠出凝血时间的影响;对 小鼠耳廓微循环的影响;对小鼠扭体反应的影响和对热板法 引起小鼠疼痛的影响.结果:血府逐瘀软胶囊能明显降低.肾上腺素加冰水刺激所致的急性血瘀模型大鼠全血粘度,红细胞电泳时 间,卡松粘度,红细胞聚集指数,能减轻实验性大鼠血栓湿重,加快小鼠耳廓毛细血管血流速度,延长小鼠出血与凝血时间,减少醋 酸引起的小鼠扭体反应次数,提高热板引起小鼠疼痛的痛阈值.结论:血府逐瘀软胶囊具有改善血液流变学,改善微循环,抑制血 栓形成,抗凝血及镇痛作用. 关键词血府逐瘀软胶囊;血液流变学;抗血栓;出凝血;微循环;镇痛 血府逐瘀软胶囊是采用现代科技提取方法将血府逐瘀胶 囊剂型改造,精制/JUT而成的纯中药制剂,具有活血化瘀,行气 止痛的功能,用于治疗瘀血内阻,头痛或胸痛等病症.本文对 此制剂进行r与功能主治有关的主要药效学试验研究. l试验材料 1.1试验药物血府逐瘀软胶囊.由沈阳成大医药科技开发 有限公司提供,批号:20010701.血府逐瘀胶囊,吉林省通化华 辰制药厂生产,批号:000601.受试药物均用蒸馏水配成所需浓 度的混悬液备用. 1.2动物Wistar大向鼠,昆明种小白鼠,一级,由中国医科大 学实验动物中心提供,合格证号:辽实条合字1号与辽实质合字 008号. 1.3试剂盐酸肾上腺素注射液,上海禾丰制药有限公司,批 号:000305;戊巴比妥钠,sERVA进口分装,上海行知化工厂. 1.4仪器全自动血流变快测仪FA_qdO-3010,重庆大学维多 生物研究所制造;WXS-3微循环血流速度测定仪,WX一 753B型微循环显微镜,徐州医用光学仪器厂制造;GJ.8402型热 板测痛仪,宁海白石电子医药仪器厂制造. 2方法与结果 2.1血府逐瘀软胶囊对急性血瘀模型大鼠血液流变性的影响 取体重180-220g雄性大鼠60只,禁食不禁水16小时,按体 重随机分6组,灌胃给药或等容积蒸馏水,每天1次,连续7天, 第8天,除空白对照组外,其余各组大鼠皮下注射盐酸肾上腺素 (Adr)两次(1O~g/lm1)0.08ml/100g,间隔4小时,在两次注射 Adr之间将大鼠浸入冰水内5分钟,造成急性血瘀模型.处置 后全部大鼠停食,次日各组大鼠均腹腔注射戊巴比妥钠45mg/ ,麻醉,剖腹,腹主动脉抽血4ml,放人预先用肝素处理的试 管,用全自动血流变快测仪测血液流变学各项指标,结果见表 1. 表l血府逐瘀软胶囊对急性血瘀模型大鼠血液流变学的影响(j?s) 与模型对照组相比*P<0O5.**P<0.0l 由表1可见,对于肾t-腺素加冰水刺激造成的大鼠急性血性差异.血浆粘度也有明显的改善作用趋势. 瘀模型,血府逐瘀软胶囊中,高剂量组全血粘度,红细胞电泳时2.2血府逐瘀软胶囊对大鼠实验性血栓形成的影响体重 间,卡松牯度均明显改善,高剂量组红细胞聚集指数也有显着 220--280g大鼠50只,雌雄各半,禁食不禁水16小时,按体重 8中药药理与临床2005;21(4) 随机分5组,灌胃给药或等容积蒸馏水,每天1次,连续7天,末 次药后30分钟腹腔注射戊巴比妥钠30mg/kg麻醉,分离右颈 总动脉和左颈外静脉,用50~/ml肝素生理盐水充满三段连接 的聚乙烯管,管中段放入一长5cm的4号手术丝线,管两端先 后插入左颈外静脉和右颈总动脉,立即开放动脉夹,使血流流 通10分钟后中断血流,取出丝线称重,结果见表2. 表2血府逐瘀软胶囊对大鼠实验性血栓形成的影响(?s) 与空白对照组相比*P<0.05,**P<O.O1(下同) 由表2可见,血府逐瘀软胶囊各剂量组对大鼠实验性血栓 形成均有明显的抑制作用. 2.3血府逐瘀软胶囊对小鼠出血时间的影响取18,22g雌 雄各半小鼠50只,禁食不禁水16小时,按体重随机分5组,灌 胃给药,每天1次,连续5天,末次药后30分钟,以锋利剪刀在 小鼠尾尖约5mm处剪断,自血液溢出开始记时,每隔30秒用滤 纸吸去一滴血,直至滤纸无血吸出(自然止血)为止的时间,为 出血时间,结果见表3. 表3血府逐瘀软胶囊对小鼠出血时间的影响(j?) 由表3可见,血府逐瘀软胶囊各剂量组均能明显延长小鼠 出血时间. 2.4血府逐瘀软胶囊对小鼠凝血时间的影响取体重18, 22g小鼠50只,雌雄各半,禁食不禁水16小时,按体重随机分5 组,灌胃给药,每天1次,连续5天,末次给药后30分钟,小鼠眼 底静脉丛取血,弃去第一滴血后,于清洁载玻片两端各滴一滴 血,血滴大小尽量一致(直径约5nma左右),开始记时,每隔30 秒用清洁6号针头自血滴边缘向里轻轻挑动血液一次,从采血 开始至挑起血丝为止的时间,即凝血时间,结果见表4. 由表4可见,血府逐瘀软胶囊各剂量组均能明显延长小鼠 凝血时间. 2.5血府逐瘀软胶囊对小鼠耳廓微循环的影响取雌雄各半 体重18,22gd~鼠50只,禁食不禁水l6小时,按体重随机分5 表4血府逐瘀软胶囊对小鼠凝血时间的影响(j=?s) 组,灌胃给药,药后30分钟腹腔注射戊巴比妥钠50m麻 醉,将小鼠左耳廓内侧固定在载物台上,调整wXS3微循环血 流速度测定仪,选择光电数8,先调速度粗钮,对照镜下血流速 度,再调整速度细钮,使显示窗的光点速度与显微镜下的血流 速度一致,然后读取流速值,结果见表5. 表5血府逐瘀软胶囊对小鼠耳廓微循环的影响(?s) 由表5可见,血府逐瘀软胶囊各剂量组对小鼠耳廓微循环 血流速度均能明显加快. 2.6血府逐瘀软胶囊对醋酸引起小鼠扭体反应的影响取雌 雄各半体重18--22g小鼠50只,禁食不禁水16小时,按体重随 机分5组,灌胃给药,每天1次,连续3天,末次给药后30分钟 腹腔注射0.7%的冰醋酸0.1ml/lOg,观察给予冰醋酸后10分 钟内小鼠扭体反应发生的次数,结果见表6. 表6血府逐瘀软胶囊对醋酸引起小鼠扭体反应的影响(?s) 由表6可见,血府逐瘀软胶囊具有一定的抑制冰醋酸引起 小鼠扭体反应的作用. 2.7血府逐瘀软胶囊对热板法引起小鼠疼痛的影响取体重 18--22g雌性小鼠,热板测定仪测定痛周值,挑选痛周值在5, 30秒之间小鼠50只,禁食不禁水16小时,按体重随机分5组. 灌胃给药,每天1次,连续3天,末次给药后将小鼠放人热板测 定仪中测定给药后30,60,90,120分钟小鼠的痛阔值,结果见表 7 表7血府逐瘀软胶囊对热板法引起小鼠疼痛的影响(?s) 中药药理与临床2005;21(4)9 由表7可见,血府逐瘀软胶囊高剂量在60分钟,90分钟时 段能使小鼠痛阈值升高. 3讨论 本文结果表明,血府逐瘀软胶囊能明显降低肾匕腺素加冷 刺激所致的急性血瘀模型大鼠全血粘度,红细胞电泳时间,卡 松粘度及红细胞聚集,具有改善血液流变学的作用;能减轻血 栓性湿重,具有抑制血栓形成的作用;加快小鼠耳廓毛细血管 血流速度,延长小鼠出血与凝血时间,具有改善微循环,抗凝血 作用;该剂还能抑制冰醋酸引起的小鼠扭体反应和提高热板法 小鼠疼痛的痛阈值而具有镇痛作用.其作用均优于原剂型血 府逐瘀胶囊. 六神丸含药血清制备方法的优选研究 庞纪平,张向宇,郭义,戴锡孟 (天津医药集团中药现代化工作部,天津300204;天津中医学院,天津300193) 提要目的:以给药剂量和采血时间为切入点,探讨中药复方血清药理学的实验操作规范.方法:用MTT法测定不同给药 剂量和不同采血时间制备的六神丸含药大鼠血清对HL-60细胞的生长抑制.结果:中剂量1小时的含药血清对HL-60细胞的生长 抑制最明显.结论:中药复方血清药理学研究要注意给药剂量及取血时间的优选. 关键词中药血清药理学;六神丸;Hb60细胞. 目前,关于中药血清药理学探讨的热点集中在给药剂量和 采血时间两方面.本文结合临床实际,以给药剂量和取血时间 为切人点,以六神丸含药血清对急性早幼粒白血病HL-60细胞 的生长抑制为指标,探讨制备含药血清的方法,以期为血清药 理学的规范化提供新的思路. 1材料 1.h恒温培养箱(TC2323型,美国SHELOLON公 司),酶标仪(sPE(ARIII,奥地利TECAN公司). 1.5方法 1.5.1含六神丸大鼠血清的制备大鼠按体重随机分为高剂 量(G,326.7mg/kg),中剂量(Z,32.67rag/kg),低剂量(D,10. 89mg/kg)3组,每组12只.灌胃给药,上下午各一次,间隔12 小时,连续3天.第四天午灌胃后,分别于0.5h,lh,2h,3h 每组3只大鼠股动脉无菌采血,静置2h,3000rpm离心20min40液将对数生长期的HL-60细 胞轻柔吹打成单细胞悬液,调细胞密度为1×10/ml,接种于96 孔培养板(台盼蓝染色,细胞活力>95%).静置24h后.实验组 每孔加含药血清20l,对照组加入空白血清20,空白组加入 20,11640液.每孔体积共200.每组作8个复孔.将培养板 移入cx32孵箱中,孵20h.每孔加入5mg/mlMTT溶液20m继 续孵育4h,终止培养,1000~m离心5rain,弃去孔内培养液.每 孔加入150NI)MSO,振荡10rain,使结晶物充分溶解.选择 570nm波长,在酶标仪上测定各孔吸光值,记录结果.计算药物 对细胞生长抑制率. 生长抑制率=(A对照组一A实验组)/(A对照组一A空白 组)N100% 2结果 2.1各组吸光度和对HL-60细胞的生长抑制率(%)各组吸 光度和抑制率如表1所示,中剂量0.5,3h取血及小剂量0.5h 取血,含药血清对60细胞的生长抑制率与大剂量0.5h取 血相比较有显着性差异. 22不同给药剂量的含药血清对一60细胞的生长抑制率 (%)不同给药剂量的含药血清对HL-60细胞的生长抑制率 如表2所示,中剂量与高剂量比较,差异有显着性. 2.3不同采血时间的含药血清对t-IL-60细胞的生长抑制率 (%)不同采血时问的含药血清对一60细胞的生长抑制率 如表3所示,各采血时间相比,差异无显着性.