CD25mAb及联合供体脾细胞诱导心脏移植免疫低反应性

CD25mAb及联合供体脾细胞诱导心脏移植免疫低反应性 CD25mAb及联合供体脾细胞诱导心脏移植 免疫低反应性 J缶床论着 CD25mAb及联合供体脾细胞诱导心脏移植免 疫低反应性 李敬来萧明第z 1.北京大学深圳医院心血管外科,广东深圳518036;2.上海交通大学医学院附属上海市第一人民 医院心血管外科 【摘要】目的观察静脉应用CD25mAb及联合应用供体脾细胞对移植心脏生存时间的影响.方法建立大 鼠异位心脏移植模型,术中应用CD25mAb及联合应用供体脾细胞.术后通过腹壁触诊判断移植心脏存活情 况.结果CD25mAb组移植心脏生存时间为12.10?4.04天,与未用药组(8.5土2.42天)相比差异有显 着性意义(P<0.05).CD25mAb+供体脾细胞组移植心脏生存时间为12.80?3.61天,与单独应用CD25mAb 组相比没有明显差异(P>0.05),但比单独用脾细胞组(8,40?3.50天,P<0.05)和未用药组有明显延长 (P<0.05o结论静脉应用CD25mAb及联合应用9t44-脾细胞均可以延长移植心脏生存时间. 【关键词】CD25单克隆抗体;脾细胞;心脏移植 【中图分类号】R654.2 【文献码】A 【文章编号】1009—3257(2008)03-0003-03 TheInductionofHyporesponsetoHeartAIIograftsbyVeinInjectingofCD25mAbor AssociatedwithDonorSplenocytes LIling—lai,XIAOMtng— eliDepartmentofCardiovascularSuNe~,pekingUniversityShenzhenHospital,Shenzhen518036,CiRna 【Abstract】 Ob]ectiveToobservetheheartallograflssurvivattimeafteradministrationofimmunosuppressive agentsCD25mAborassociatedwithdonorsplenocytesinasingledoseonthetimeofoperation.Methods AsimplifiedheterotopicrathearttransplantationmodelwasestablishedandtheCD25mAb(1mg/kg)Were injectedthroughveinorassociatedwithdonorsplenocytes(1x10cells/1OOg).Thegraftssurvivalwas observedbypalpatingovertheabdominalwallpostoperation.ResultsInusingCD25mAbgroup,the averageofthesurvivalofheartallograftwas12.1O? 4.04days.whichhadasignificantdifference comparedwiththoseofthenotherapygroup(8.5? 2.42days,P<O.05).InusingCD25mAb+donor splenocytesgroup,theaveragesurvivalofheartallograftsis12.8O? 3.61days.whichhadnosignificant differencewiththoseofusingCD25mAbalone(P>O.05),andmuchlongerthanthoseofusingdonor splenocytesgroup(8.40? 3.50days,P<O.05)andnotherapygroup(P<O.05).ConcluMonThefindings demonstratethatasingleinjectionofCD25mAborassociatedwithdonorsplenocytescaninducestablelor一 termacceptanceofheartallografts. 【Keywords】CD25mAb;splenocytes;hearttransplantation 少.21)1ISIIf1JJ第1醛3ll_lJ3 心脏移植术后,如果在不用任何免疫抑制剂 情况下移植心脏能够被受体特异性长期接受,是 同种异体器官移植的理想目标.2003年3月,2008 年2月间,我们采用多种干预措施,通过术后对 移植心脏生存时间的观察,对心脏移植免疫低反 应性的诱导进行了系列研究.本试验通过术中应 用抗CD25单克隆抗体(CD25mAb)以及联合应 用供体抗原脾细胞,以期诱导出受体对移植心脏 的特异性长期接受. 1与方法 健康雄性Wistar及SD大鼠,近交系,体重 250,300g,供体为SD大鼠,受体为Wi~ar大鼠. 建立心脏异位移植模型….切取供体脾脏制备脾 细胞悬液,计算成活细胞百分率,活性在95%以 上者可用.调整细胞悬液浓度为l×lO个/ml. CD25nlAb(Serotec,CloneNo.NDS61)腹壁 静脉注射.共分4组: ?空白对照组(Notherapy):不用任何治疗 措施. ?CD25mAb治疗组:术中腹壁静脉注射 CD25mAb(1mg/kg). ?脾细胞输注组:术中静脉注射供体脾细胞 (1×lO个/l00g). ?CD25mAb+脾细胞治疗组:术中静脉注射 CD25mAb(]mg/Kg)和供体脾细胞(1×10个/ 100g). 每组10例进行移植心脏自然生存时间观察. 术后观察主要采用腹壁外触诊法,触及移植心脏 搏动为移植心脏存活的. 2结果 移植成功率及移植心脏存活情况:正式实验 47例,移植成功40例,成功率为85.11%(40/ 4JoURNALoFRAREANDUNCoMMoNDISEASES ,b1.15No.32008 1各例移植心脏的生存天数 注:术后移植心脏生存5天一例,余同. 47).将移植成功的40例随机分为4组,对每组 各lO例进行移植心脏生存时间的观察,结果见 表l. 用SPSSl5.O统计学软件对上表进行统计学 ,采用单因素方差分析模型.结果显示,在 不用任何干预措施情况下移植心脏平均生存时间 为8.5?2.42天,CD25mAb组为12.1O?4.04 天,脾细胞组为8.40?3.50天,CD25mAb+脾 细胞组为l2.8O?3.6l天.经显着性分析可知, CD25mAb组与单独应用脾细胞组,未治疗组相 比,移植心脏的生存时间明显延长(P=0.022< O.05,P=0.025<0.05).CD25mAb+脾细胞组 与单独应用脾细胞组,未治疗组相比,移植心脏 的生存时间也明显延长(P=0.007<0.05,P=0. 0O8<O.O5).单独用供体脾细胞组移植心脏生 存时间与未治疗组相比,差异没有显着性意义 (P=0.949>O.05).CD25mAb组与CD25mAb+脾 细胞组相比,移植心脏生存时间也没有明显差异 (P=0.652>0.05). 3讨论 在本试验中,我们在术中一次性单独应用脾 细胞,通过观察移植心脏的生存时间,探讨能否 诱导出免疫低反应性.结果发现,单纯应用脾细 胞组移植心脏生存时间为8.40?3.50天,而在 不用任何干预措施的情况下,移植心脏生存时间 为8.5?2.42天,二者并无显着性意义(P=0.949> 0.05).也就是说一次性单独应用供体脾细胞并没 有使移植心脏生存时间延长,原因可能是大量的 供体脾细胞输注后,作为供体抗原可以使受体淋 巴细胞致敏[2]或者产生抗宿主反应(graf—versus— hostreactions)[31,进而使移植心脏失活. IL-2/IL-2R对T细胞反应的调节被认为是排 斥反应产生的关键环节[.因此,选择IL一2R做 为免疫抗的靶分子,以阻断IL一2/IL一2R信号 传导通路从而达到抑制排斥反应的目的,是预防 和治疗排斥反应的一个新途径[5].本试验中,在 静脉一次性应用CD25mAb后,移植心脏的生存 时间(12.10?4.04天)与不用药组相比有明显 的延长(P=0.025<0.05).说明CD25mAb具有明 显的抗排斥反应作用.CD25mAb联合应用供体 脾细胞后,移植心脏的生存时间(12.80?3.61 天)与单独应用脾细胞组相比有明显延长 (r=0.007<0.05),但与单独应用CD25mAb相 比并没有明显的差异(r=0.652>0.05).说明一 次性联合应用供体脾细胞并不能增强CD25mAb 的免疫抑制效果.已有研究表明,CD25mAb可 以减少大鼠肝移植的急性排斥反应发生率[61.在 人们对IL-2R分子的基因结构以及IL-2R与受体 细胞因子网络的复杂作用有了更深刻的认识之 后,以IL一2R为靶分子的抗排斥反应治疗机理才 明朗起来.IL一2R包括,p,v三条链, CD25mAb即是针对(CD25)链的抗体,现已 证实它确实有延长移植器官生存时间的作用.然 而,在CD4阳性的T细胞上只有30%表达 (CD25)链,而在CD8阳性的T细胞上表达更少, 只有5%.记忆细胞是CD4阳性T细胞,而效应 T细胞是CD8阳性的.换句话说,(CD25)链 在细胞增殖活化之前表达,而在活化后则表达较 少[7].因此,CD25mAb可能对预防排斥反应作用 较强,而对已经发生的排斥反应作用则较弱,或 者说逆转排斥反应的作用较差.但有些研究结果 却不太支持这种观点[,认为静止的T细胞链 的表达较少,而当T细胞活化后IL一2R表达迅 速增加,而且可以从细胞表面脱落并可以在血浆 中被检测到,甚至血浆中的IL一2R浓度可以作 为检测T细胞活化以及IL一2R表达的重要指标. 总之,术中一次性小剂量静脉应用 CD25mAb,可以使移植心脏生存时间延长. CD25mAb联合应用供体脾细胞后,移植心脏生 存时间比单独应用脾细胞组,未治疗组明显延长 (P=0.007<0.05,P=O.008<0.05),但与单独用 CD25mAb组相比移植心脏的生存时间并无明显 差异(P=0.652>0.05). 【参考文献】 1.李敬来,夏家红,黄毅,等.简化的大鼠心脏异位移植术.心 肺血管病杂志1999;18(4):278—280. 2.AkstLM.Dan0.StromeM.Theeffectofdonor—specific transfusionuponre{ectioninaratmode1of1aryngea1 transplantation.AnlJ0tolaryngo1.2006Jan-Feb;27(1):13— 7. 3.KobayashiE.KamadaN.EnosawaS,eta1.Comparisonof potentia1itytoinducegraft—versus—hostreactionwith sma11bowe1,pancreas|sp1eenand1ivertransplantation intherat.C1inExpImmuno1.1993:92(3):527—531. 4.VladG,ttoEK,vasilescuEIt.eta1.Anti-CD25treatmentand FOXP3一positiveregulatoryrcel1sinhearttransplantation. TransplImmuno1.2007Ju1:18(1):13-21. 5.ChosaE,HaraM,WatanabeA,eta1.Sp1eenplaysan importantro1einmaintainingto1eranceafterremova1of thevascularizedheartgraft.Transplantation.2007May 15:83(9):1226-33. 6.6asselHJ,0ttOC.GasselAM.eta1.Toleranceofratliver allograftsinducedbyshort—termselectivein~nunosuppression combiningmonoc1ona1antibodiesdirectedagainstCD25and CD54withsubtherapeuticcyclosporine.rransplantation 2000;69(6):1058—1067. 7.Nashan.Theinterleukin一2inhibitorSandtheirro1ein low-toxicityregimens.TransplantationProceedings1999; 31(Suppl8A):23S一26S. 8.LairD,DegauqueN,MiqueuP,eta1.Functiona1 compartmenta1izationfollowinginductionof1ong—termgraft surviva1withpregraftdonor—specifictransfusion.AnlJ Transplant.2007Mar;7(3):538—49. 【收稿日期I2008—05—25 罕少疾病杂志2008年06月第15卷第3期5