bui_银杏叶冻干粉可行性报告

bui_银杏叶冻干粉可行性报告 本文由luzqchina贡献 银杏叶冻干粉可行性报告 项目提出的背景, 一, 项目提出的背景,投资的必要性及意义 山东仁和制药有限公司是于 2001 年 5 月在成功收购原郯城华银制 药厂的基础上组建而成的综合性制药企业.前身为山东郯城华银制药厂, 始建于 1995 年,生产的剂型为中成药片剂和中药提取物.2002 年 4 月又 成功收购了破产企业烟台康泰制药有限公司,增加了 15 个化学药品的片 剂. .目前公司已形成了包括中药,西药,抗生素,中药提取物,保健食 品口服液,生化药,食品七大系列共计 40 多个品种的综合性制药企业, 同时正在研发的 18 个新药和保健食品正在国家局的审批中.年实现工业 总产值 10500 万元,销售收入 8500 多万元,利税 1600 多万元. 山东仁和制药有限公司位于中国银杏之乡——山东省郯城县境内,西 邻 205 国道和京沪高速, 交通便利. 郯城银杏资源占整个中国银杏资源的 三分之一以上,公司具有巨大的资源优势. 公司注册资本 3832.44 万元, 总资产 8000 多万元. 公司全厂职工 322 人.其中在职职工 273 人,从事生产人员 208 人,管理技术人员 92 人. 技术人员占职工总数的 32%,其中高级职称 6 人,中级职称 26 人,初级 职称 44 人. 为适应企业发展需要, 2003 年 1 月开始投资 3000 多万元, 对公司进 行了全面的 GMP 改造,包括新建了 1600 平米的包括片剂, 胶囊剂, 颗粒剂 的新建固体制剂车间,严格按照 GMP 要求对办公区,综合仓库,质检楼, 前处理车间及提取车间精干包的改造, 中药材库, 净药材库, 空调主控室, 配电室组成,锅炉及厂区地面进行了硬化等改造工作.形成年产片剂 20 亿片,胶囊剂 1 亿粒,颗粒剂 1000 万袋,中药提取物 100 吨,中药饮片 500 吨的生产能力.同时严格按保健食品 GMP 和药品 GMP 正在改建的能生 产 10ml 口服液 3600 万支和 100ml 口服液 300 万瓶的口服液生产车间正在 建设.目前,本公司形成了能够生产包括中药,西药,抗生素,保健食品 口服液,食品,中药提取物等的综合性制药企业.公司占地面积 50980m2, 其中预留面积为 8020m2 ,绿化面积为 9670m2,约占总面积 31.2%,建筑 面积为 24000m2.其中质量保证部为 510m2,生产车间总计 6200m2,仓库面 积为 2000m2. 2001 至 2003 年连续被评为临沂市医药系统先进单位,2004 年 5 月一次性通过了国家局的 GMP 认证,2004 年年底被认定为高新技术企业, 2005 年被评为临沂市农业重点龙头企业. 公司坚持以市场为中心, 以新产品研发为突破口, 坚持四个创新和科 学发展观, 积极创建先进的企业文化, 打造优秀的公司品牌和良好的企业 形象, 为建成现代化的企业管理并力争在 5 年内把公司建成鲁南地区 产值,利税,效益,知名度高第二位的大型企业集团制药企业.把公司建 成一个集 "产,学,研,销"于一体的"科,工,贸"联合体,形成年产 值 10 亿元,利税过亿元的规模,使之成为全市医药行业的第二大知名品 牌. 1 银杏叶功效成分简述 银杏叶具有丰富的活性成分和巨大的药用功效: 概括的说:银杏树是目前发现的当今世界上最奇特,对人类贡献最大的植物,特 别是银杏叶具有五大成分五大功效,银杏叶将是世界上最有发展前景的中药材,能够 五大成分五大功效 五大成分五大功效 治疗世界上很多的疑难杂症: (1).黄酮苷类:对心脑血管疾病,高血脂,高血压,清除氧自由基 具有显著的 黄酮苷类 疗效,是目前世界上治疗该类疾病最显著的药物. (2).银杏内酯 A,B,C,M 类:是血小板活化因子(PAF)拮抗剂,是银杏叶中 最重要的活性成分,是治疗神经系统疾病的特效药物. (3).白果内酯类:白果内酯有很强的生物活性,为神经精神病药物,对因年老 白果内酯类 的呆傻症有奇异的疗效,它能抗神经末梢的衰老,被誉为真正抗衰老化学物质. (4).银杏酚酸类:可促进胃液和胆汗的分泌;具有抗细菌和消炎的作用;制成 银杏酚酸类 无残留农药;含有抗真菌物质,能够真正刺激神经中枢系统的作用. (5).聚异戊烯醇类:促进造血功能,改善肝脏机能,对再生障碍性贫血(白血 聚异戊烯醇类 病) ,对各种肝病,糖尿病具有最显著的疗效,是治疗这类疾病最具有开发前景的药 物. 银杏叶主要成分研究情况: 1.1 银杏叶主要成分研究情况: 自 20 世纪 60 年代开始,许多国家采用现代分离技术对银杏叶的化学成分进行研 究,经药理实验和临床验证,发现银杏叶的多方面生物活性与其所含特定化学成分有 关.德国 Willamar Schwabe 首次注册了银杏叶的一种简单提取物,并于 1972 年申请 了专利(W Schwabe DE 176708 和 DE 2117429) ,定名为 EGb761,将其用于治疗心脑 血管疾病和神经系统疾病,具有显著疗效,且无毒副作用;银杏内酯类化合物 (ginkgolides)具有显著疗效,且无毒副作用;银杏内酯类化合物具有增强血小板 活化因子(PAF) 拮抗的作用.将银杏制剂列为治疗药物的国家有德国,法国和中 国,其他国家均只将其用为保健食品或非处方用药.美国开发出的银杏保健食品已经 获得 FDA 的批准,使人们对银杏叶的保健药用价值更加重视,对银杏叶化学成分研究 也越来越深入.最近不断从银杏叶中发现一些新的生物活性成分.迄今为止,从银杏 叶 中 已 经 发 现 了 100 多 种 化 学 成 分 . 这 些 化 学 成 分 主 要 有 黄 酮 苷 类 (flavonoidglycosides) ,萜内酯类(terpenoids),聚异戊烯醇类(polyprenols), 6-羟基犬尿喹啉酸(6-hydroxykynurenic acid,6HKA),有机酸,银杏酚酸类(phenolic acids)及烷基酚,烷基酚酸(又称银杏酸,ginkgolicacids) ,4ˊ-甲氧基吡哆醇(4 ˊ-O-methypyridoxine)等. ※黄酮类 化合物: 黄酮类化合物: (1)组成及结构 银杏叶中黄酮类化合物(flavonoids)可分为黄酮,又黄酮和儿茶素等三类化合 物,共有 36 种,主要以苷的形式存在,是银杏叶的主要药理成分之一,含量较高, 在银杏叶中含量变化较大.据作者对贵州等地 330 份样品及银杏叶生产发育期间黄酮 苷含量的检测分析表明:不同地区,各单株之间变化幅度在 0.2%,2.74%;叶中黄酮 苷含量>0.8%者占测定数的 48.0%;不同生育期间叶中黄酮苷含量相差 2 倍左右,4 月份含量最高,4,6 月份呈下降趋势,6 至 10 月含量变化不明显. (2)银杏黄酮: 银杏黄酮的苷元有 7 种,即槲皮素(quercetin) ,山奈素(kaempferol) ,异鼠李 素 (isorhamnetin) 杨梅素 , (myricetin) 芹菜素 , (apigenin) 木犀草素 , (luteolin) , 三粒小麦黄酮(tricetin)等,前三种是其主要成分.银杏叶及其提取物(GBE)的 质量控制中主要检测这三种黄酮苷元的含量. 银杏黄酮又称单黄酮,银杏叶中 3 种主要单黄酮类的结构 银杏黄酮中,槲皮素类的化合物有 9 个,其糖基主要是葡萄糖和鼠李糖基,有些 糖基上还连接有肉桂酰基.山奈素比槲皮素在 3ˊ位少一个酚羟基,极性较小,银杏 叶中山奈素类化合物有 8 个.异鼠李素是槲皮素的 3ˊ上羟基被甲基化的衍生物,银 杏叶中异鼠李素化合物有 4 个. (3)双黄酮:银杏叶中的双黄酮是由两分子黄酮母核通过 C—C 键聚合而成的一类化 合物,一共有 6 种,即银杏素(ginkgetin) ,异银杏素(isogenkgetin) ,穗花杉双 黄 酮 ( amentoflavone ) 金 钱 松 双 黄 酮 ( sciadoputydin ) 去 甲 银 杏 双 黄 酮 , , (bilobetin) ,5ˊ-甲氧基去甲银杏双黄酮(5ˊ-methoxybilo-betin)等. (4)儿茶素类:儿茶素类化合物具有治疗肝中毒的作用和抗肿瘤活性.银杏叶中的 儿茶素类化合物有 6 种,即儿茶素(catechin) ,表儿茶素 (epicatechin) ,没食子 酸儿茶素(gallocat-echin) ,表没食子儿茶素(epigallocatechin) ,4,8〃-儿茶 素没食子儿茶素(4,8〃-catechingallocatechin)和 4,8〃-没食子儿茶素没食子 儿茶素(4,8〃-gallocatechingallocatechin) . (5) 银杏黄酮类化合物的理化性质 黄酮类为酚性成分, 属多环多元酚类, 由于含有苯并γ-吡酮而形成β-烯醇酮 (β -enolone)结构,这种烯醇酮结构所表现的特性是黄酮分子中的酚羟基的弱酸性与铁 盐的显色反应;还能与铝形成配合物,使光吸收长移,显较深的颜色,可用于鉴定黄 酮类化合物(即铝盐比色法) ;同时酚羟基具有还原性,表现在提取加工过程中的氧 化变色,在撮份离时可加入还原剂进行保护. 银杏黄酮类化合物的苷元多为结晶体,苷多为无定性粉末.黄酮苷类由于在结构 中引入糖基,故均有旋光性,且多为左旋.银杏黄酮,黄酮醇及其苷类子含有 7,4 ˊ-位助色团,颜色为深黄色;在紫外光下产生荧光,可用于银杏黄 酮类化合物的定 性检验. 银杏黄酮类化合物的苷元一般难溶于或不溶于水,可溶于甲醇,乙醇,丙酮,醋 酸乙酯,氯仿,乙醚等有机溶剂及稀碱溶液中.银杏黄酮苷与糖结合成苷后,水溶性 相应增大,一般可溶于热水,甲醇,乙醇,丙酮,醋酸乙酯中,难溶于乙醚,石油醚, 苯,氯仿等有机溶剂.银杏黄酮类化合物因分子中具有酚羟基而显弱酸性,可溶于碱 性水溶液,吡啶,甲酰胺及二甲基甲酰胺等. 银杏萜内酯: ※ 银杏萜内酯: (1)组成和结构 银杏内酯化合物属于萜类化合物,又称为银杏萜内酯,由倍半萜内酯和二萜内酯 组成,是银杏叶中一类重要的活性成分. 白果内酯 (bilobalide) 属倍半萜内酯, R.T.Major 于 1967 年和 K.Weinges1969 是 年分离得到的,是目前从银杏叶中发现的唯一的一个倍半萜内酯化合物.银杏内酯 A (GA) ,银杏内酯 B(GB) ,银杏内酯 C(GC) ,银杏内酯 M(GM) ,银杏内酯 J(GJ) (ginkgolideA,ginkgolideB,ginkgolideC,ginkgolideM,ginkgolideJ)为二萜 内酯化合物,于 1932 年由 S.Furukawa 首次从银杏叶中分离出来,1967 年才由 K.Nakanish,M.Maruyama 和 K.Okabe 等人进一步分离和确定其化学结构. 白果内酯类分子骨架由 15 个碳原子组成,具有互相稠合在一起的 4 个五元环, 其中有 1 个五元碳环,3 个五元内酯碳环,五元环上连有 1 个天然产物中罕见的叔丁 基.白果内酯有很强的生物活性,为神经精神病药物,对因年老的呆傻症有奇异的疗 效,它能抗神经末梢的衰老,被誉为真正抗衰老化学物质.而银杏内酯类化合物的分 子骨架由 20 个碳原子组成, 具有 6 个五元环, 其中有 2 个五元碳环, 个五元内酯环, 3 1 个四氢呋喃环,2 个五元碳环以螺环的形式连接在一起,其余的环以稠合的方式连 接,形成一个刚性笼状的特殊立体化学结构.银杏内酯分子中均具有天然产物中罕见 的叔丁基.银杏内酯 A,银杏内酯 B,银杏内酯 C,银杏内酯 M,银杏内酯 J 结构差别 在于含有羟基数目和羟基连接的位置不同.银杏内酯均为强血小板活化因子拮抗剂, 是银杏叶中特殊生理活性的关键成分.国内外对这类成分做了大量化学,药理和临床 研究.作者 1989 年以来对贵州等地及不同生育期生长的银杏叶进行了分析测定,在 327 多份样品检测结果中发现银杏叶中萜内酯含量差异很大,变幅为 0.04%,1.17%. 0.3%以上者占样本数的 35.2%;萜内酯组分中银杏内酯(GA+GB+GC)含量大于白果内 酯(BB)含量.不同生育期间叶中萜内酯含量相差 5,10 倍,秋季(9,10 月)含量 最高. (2)银杏内酯类化合物的理化性质 银杏内酯类化合物为白色结晶,味苦,熔点为 300?左右.其中银杏内酯 M 加热 至 280?分解,无明显熔点.因分子中含有羟基和多个含氧酯基,比一般的倍半萜和 二萜类化合物的极性大,易溶于乙醇,丙酮, 丁酮,乙酸乙酯,二甲基亚砜等有机溶 剂中. 银杏内酯类化合物对浓酸和强氧化剂很稳定,用浓硝酸溶解银杏内酯类化合物后 蒸发至干,其内酯仍不破坏.银杏内酯类化合物分子中含有多个内酯结构.与碱作用 生成盐,可溶于水.将生成的盐用酸酸化,则生成原来的内酯而不溶于水,却溶解于 有机溶剂,这一特性可用于银杏内酯的提取分离.银杏内酯类化合物分子中有 C1,C2, C3,C7,C8,C10,和 C14 等 7 个手性碳原子,这些手性碳原子的构型决定了银杏内酯类 化合物的刚性笼状构型及其特殊的生物活性. ※聚异戊烯醇: 聚异戊烯醇属于多烯醇类(或多萜醇类) ,是银杏叶中存在的一种类酯化合物. 由一系列异戊烯基单元首尾相连构成的长链化合物,有顺式和反式两种.1982 年日本 田中康之等从银杏叶中分离出聚异戊烯醇类化合物, 其分子中异戊烯基单元数为 14, 22.王成章(1992)等证明我国银杏叶也含有桦木聚异戊烯醇型聚异戊烯醇,其分子 中异戊烯基单元数为 15,21.这类化合物广泛存在于哺乳动物的肝脏,胰脏和肾脏等 器官中,对维持肝功能,促进造血功能能起到重要作用,是一类值得引起重视的,具 有广阔开发前景的生物活性成分. 近年来对银杏叶中聚异戊烯醇类化合物进行了系统分离,纯化及组分鉴定,采用 石油醚浸提,硅胶柱吸附,以石油醚-氯仿乙酸乙酯梯度洗脱,获得聚异戊烯醇产物 纯度为 79.0%,得率为 0.4%,0.49%.聚异戊烯醇类化合物的异戊烯基结构单元数为 15,22.研究结果表明,银杏叶中聚异戊烯醇类化合物含量随产地和树龄不同相差甚 大,其中以贵州省正安县银杏基地树叶(2,5 年生)中含量最高(12.1mg/g) ,是贵 州省务川县老树叶(15 年以上)的 8 倍左右. ※有机酸类 银杏叶中含有脂肪酸,羟基酸,莽草酸,氨基酸及 6-羟基犬尿喹啉酸(6-HKA) 等.6-HKA 是广谱中枢神经氨基酸拮抗剂,它作用于 N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA) ,能 降低脑缺氧,是银杏叶提取物中一种重要的生物活性成分,近年来已引起了国内外学 者的重视,其全面的药理作用有待进一步研究.氨基酸也是银杏叶中重要的有机酸. 对银杏叶中氨基酸测试结果表明:银杏叶中氨基酸含量极其丰富,总氨基酸量为 10.7%,15.4%(干基计) ,均含有 9 种必需氨基酸,氨基酸组成合理,必须氨基酸含 量占总氨基酸的比值达 39.1%,41.5%,必需氨基酸占非必需氨基酸比值为 66.5%, 70.9%. 酚酸, ※ 酚酸,烷基酚及烷基酚酸类 银杏叶中酚酸类(phenolic acids)据波兰 Maria Ellnain-Woj-taszek(1997) 报道主要有 7 种, 即原儿茶酸 (protocatechuicacid) p-羟基苯酸 , (p-hydroxybenzoic acid) 香草酸 , (vanillicacid) 咖啡酸 , (caffeic acid) p- 香豆酸 , (p-coumaric acid) , 队员魏酸(ferulic acid) ,绿原酸(chlorogenic acid) . 近年 来,酚酸及其酯的生 物活性引起了广泛的关注.其中阿魏酸,香豆酸,咖啡酸及绿原酸可促进胃液和胆汗 的分泌.香豆酸,香草酸和咖啡酸有抗细菌和消炎的作用,原儿茶酸是一种抗真菌物 质,绿原酸还有刺激神经中枢系统的作用.经 HPLC 法分析了银杏叶,根和种皮中的 7 种游离酚酸,其含量分别为 19.9μg/g 鲜叶;345μg/g 根和 2.71μg/g 种皮中.经水 解后,原儿茶酸是主要组分,含量最高达 272μg/g(鲜) ,主要存在于叶和根中. 烷基酚及烷基酚酸属于长链苯酚类化合物,目前所说的银杏酸主要指这类化合 物,其中有白果酸(ginkgolic acid) ,氢化白果酸(hydroginkgolic acid) ,银杏 酚(bilobol) ,白果酚(ginkgol) ,这些成分可能与致过敏,致突变有关,是银杏叶 提取物中毒副作用成分,银杏叶提取物(GBE)中要控制其含量在 5μg/g 以下.据作 者研究,我国银杏叶银杏酸含量为 500,2000μg/g,并采用现代分离手段,控制 GBE 产品银杏酸含量在 2,3μg/g. 另外,4ˊ-甲氧基吡哆醇(4ˊ-O-methmylpyridoxine,MPN)是白果的主要毒性 成分(毒害神经) ,也存在于银杏叶中,据德国波恩大学 Ansgar Arenz 等(1996)报 道,在银杏叶中 4ˊ-甲氧基吡哆醇含量 2,4mg/kg.这种毒素不仅为维生素 B6 的拮抗 剂,并能在大脑中抑制谷氨酸转化为 4-氨基丁酸(GABA) ,其毒性反应主要引起阵发 性痉挛,神经麻痹等. ※ 一般营养成分 银杏叶中含有多种营养成分,据作者对贵州不同地区银杏叶测定结果表明:其蛋 白质,糖,维生素 C,胡萝卜素,维生素 E 及矿质元素钙,磷,铁,氟,铜,锰,锌, 铬,钴,硼,硒等含量极丰富,是食品资源的重要原料. 1.2.国外对银杏叶开发研究情况 1.2.国外对银杏叶开发研 究情况 在距今 1.7 亿年前的中生代,银杏类植物遍布全世界,成为地球上分布最广泛地 植物群落.直到目前,除了南极洲和赤道两侧外,在地球上中生代沉积的岩石中,均 已发现了叶形和脉序与现代银杏非常相似的银杏类植物叶化石.大约到了距今一百万 年前的第三纪末和第四纪初,整个地球气候变冷,北半球发生了强大的冰川运动,随 之植物群落也发生了根本性的变化.银杏类植物抗不住这一严寒的侵袭,大部分地区 的银杏类植物全部灭绝,在亚洲大陆也频于绝种.只在东亚——中国,朝鲜,韩国和 日本的局部地区被保留下来,成为当今具有重大科学价值的"活化石" .随着人类社 会的不断向前发展,这一孑遗植物又在世界各地繁衍起来. 银杏在日本分布于北到本州青森县,南达九州鹿儿岛的广大地区.在日本:研制 出了十余种银杏系列化妆品投放国内外市场,开辟了银杏加工利用增值的新途径.银 杏列为中药,最早见于十四世纪吴瑞的《日用本草》 ,李时珍的《本草纲目》 .日本学 者山下太藏,左藤文比生(1930)和 中尺浩(1941)分析出银杏叶片中含有黄酮.70 年代初,我国北京制药厂及日本药物学家分别用银杏叶提取物——黄酮甙类,制造出 用于治疗心血管和脑血管疾病的片剂,针剂.法国学者从银杏叶片中分离出银杏精 B, 它可抑制血小板活化因子的活性,同时还可防止过敏反应.银杏外种皮的腐蚀作用, 多年来已引起银杏产区人们的关注.叶秀莲等(1987)从银杏外种皮中提取出银杏酸 和银杏酚,成为治疗小儿脑膜炎药物的主要原料.尽管如此,银杏种仁中却含有有毒 物质,食用过量会引起中毒. 本世纪 40 年代,在波兰的拉卡夫,专门建立了银杏种植园.另外,在法国巴黎, 保加利亚,匈牙利,前苏联的克里米亚半岛南岸及高加索一带也栽植着银杏,并能安 全越冬.在意大利帕杜阿植物园,也栽植着自中国引种的银杏. 随着药物科学研究事业的向前发展和银杏广泛引种于世界各地,近三百年来,国 外植物学家逐渐开始对银杏作深入细致地植物学研究,其中凯普费(kaempfer)是欧 洲第一个研究银杏的植物学家.1690 年他观察了栽植在日本的银杏,随后对银杏作了 植物学描述和记载,但他比我国有关银杏的记载却晚了 430 多年.凯普费率先提出 "Ginkgo"这个名字.1771 年林奈(Linnaeus)采纳了这个名称,并根据许多标本上 叶片具有深裂的特征,用"biloba"作为种名.1896 年,在植物科学史上,记载着一 项轰动世界的重要发现,日本东京帝国大学小石川植物园的助教平濑作五郎发现了具 有运动机能的银杏精子,并绘制出了银杏精子外形图.他的发现得到了当地从事植物 形态解剖学研究的井健次郎博士,德国植物形态学家哥贝尔和英国植物化石学家斯科 物等人的承认.平濑作五郎成为世界上最早发现银杏具有精子的科学家.他在植物科 学史上的伟大贡献,将会永远载入史册.Arnott 详细研究了 1000 多枚银杏叶片后, 第一次揭示出银杏叶片大约有 10%具有叶脉联合的现象.Favre—Duchartre(1956)在 法国巴黎地区,对银杏生殖周期作了详细观察和研究,获得了银杏达到种子成熟大约 需要 14 个月的结论.Tuleck 等(1960)报道了起源于班叶银杏愈伤组织的一个精氨 酸型突变细胞系,对此引起了许多植物学家的关注.在银杏雌雄性的鉴别上,在原来 形态鉴别的基础上,岩崎文雄(1980)首先提出了同功酶鉴别法,随后他又提出化学 鉴别法.这两种方法在生产实践上都可推广应用,70 年代日本从我国进口大量银杏树 叶,从中提炼出治疗心血管疾病和脑血管疾病的黄酮甙药物,首次用于临床,疗效很 好,这在当时轰动了整个医药界.直到 1989 年秋季新加坡广播电视台还继续播送这 一消息.日本对白果多次作了食品成分分析,提出了各组成的含量.日本是非常讲究 食品结构的 国家,日本人民每餐必吃 5,6 个白果.目前白果已成为日本人民必不可 少的食品.白果在职贮藏期间易发生硬化和变质,是果品贮藏亟待解决的问.岩崎 满里子(1984)作了这方面的试验研究,他设计了五种试验贮藏条件,结果表明,以 低温低湿密闭贮藏和低温密闭贮藏为最好.斋藤明(1979)首先进行了从花粉发生愈 伤组织,再从愈伤组织诱导器官分化的尝试,获得了完整的银杏单倍植株,成为银杏 科研的世界创举. 美国的伊利诺斯州是美国著名的"银杏 之乡" ,1978 年 6 月该州的银杏爱好者们 组建了一个"金色化石树"协会,以促进该州 102 个县银杏的研究和发展.该协会成 员虽然喜欢银杏,但不喜欢中国古代起的"鸭掌"这个不雅致的名字,也不喜欢园艺 家起的恰如其分的名字"白果树" .因此,该协会发起人 Ronsiss 建议改为"金色化 石树" ,一是因为银杏是"活化石" ;二是因为秋季飘扬着金色的树叶,二者连在一起 组成"金色化石树" .1984 年,该协会又改组成"国际金色化石树协会" ,除南非以外, 会员分布于世界各地,1984 年有会员 800 多名,到 1992 年已发展至 1000 多名,这个 组织的建立不仅促进了美国银杏事业的发展,也促进了世界银杏事业的发展. 目前世界各国都在积极引种和栽植银杏,有的作为科研试材,有的作为用材和采 收白果.在植物学研究迅速发展的情况下,银杏的科学稠密将逐渐被揭开. 银杏的食用,药用和保健价值,在国外已受到重视,并积极进行开发利用.国际 市场上银杏非常走俏,供货不足,特别是日本,香港,德国对我国要求供货最为迫切, 积极与我国洽淡扩大银杏进口业务.国外以日本,韩国和德国对银杏综合开发利用最 有成效,主要用于食品,医药,保健品和化妆品.据最近几年的统计,年销售额达 40 亿美元,每公斤银杏黄酮甙国际市场的销售价为 400 美元. 日本的果农,加工厂家和商业企业,对银杏形成了产,供,销一条的服务体系. 目前东京白果市场的销售量日益增长,价格一直呈上涨趋势.目前,日本市场上银杏 的零售价每公斤为 1500,2500 日元.名古屋市还建立了白果专营市场.日本市场上 销售的白果都是小包装,每包 200 克,300 克,400 克,500 克.白果已成为日本国民 每餐必备的佳膳.他们除把银杏做成鸡蛋糕,于酷等外,还加工成罐头,冷冻食品等 在市场上进行常年供应.优良品种金兵卫 7 月中旬即可上市,为应市场急需,可卖出 高价钱. 常温下白果保鲜期仅为 2,3 个月,为提高商品价格,延长供货时间,日本采取 了低温(2?) ,高湿(相对湿度:85,90%)的保鲜措施,贮藏期可达 6 个月. 日本对银杏种核也划分了分级.日本国内的银杏年产量不能保证市场的常年 供应,因此仅福冈一县每年还需从中国和韩 国进口约 100 吨银杏.银杏在日本被广泛 用于保健食品和医药,这对日本发展银杏生产,起到了积极地促进作用. 自 70 年代以来,银杏叶的开发利用在国外已引起人们的极大兴趣,国外对银杏 叶的开发利用已十分重视.1966 年,德国医药科学有首先发现了银杏叶中含有通血脉 和降低胆固醇的药用成分,随后科学家们先后在银杏叶中发现了几百种药用成分.从 此,银杏叶的综合开发利用便开始了.德国 Schwabe 制药业公司出口的银杏叶制剂专 用名称为 Tcbonjn,有针剂,液剂,静脉注射用针剂,糖衣片及长效缓稀片等五种制 剂. 从银杏叶中提炼出来的黄酮甙, 具有改善脑血管循环及控制周围血管失调的作用, 是治疗高血压,脑动脉硬化,糖尿病和心血管疾病的良药,且长期使用无毒副作用. 西欧市场上有大量的银杏叶制剂出售,颇受用户欢迎.从 70 年代中期起,德国每年 从韩国进口达 1000 万美元的银杏叶片提取物(银杏叶每吨价格为 2500 美元) ,用于 生产降低胆固醇药物.前述五种制剂,在德国年销售额达 600 万美元. 法国天然及合成制药业公司出口的银杏叶制剂专用名称为 Tanakan, 是一种液剂. 法国天然及合成制药业公司自 1975 年开发此产品以来,仅此一种制剂,年销售金额 高达 6000 万美元.银杏叶制剂,近几年在德国和法国被作为降血压的特效药. 自 1968 年韩国成立银杏研究院以来,即对银杏叶的药用成分进行了深入的研究, 特别是近几年,韩国注意对银杏叶的综合加工利用和研究.韩国企业界把银杏叶作为 除高丽参以外的又一大保健品资源, 银杏研究院和制药, 食品, 化妆品企业的研究所, 都在积极研究将银杏叶药用成分用于药品,食品,化妆品的途径,在此方面也取得了 不少成果.韩国制药业公司已从银杏叶中提炼出解毒剂,抗真菌剂,抗生素癌剂丰治 疗哮喘,心血管系统,神经系统疾病的药物以及食品,化妆品添加剂.从银杏叶中提 炼的食品和化妆品添加剂已进入商品化阶段.韩国各制药业企业每年在国内收购银杏 树叶 3000,4000 吨用于制造药品.据韩国有关企业调 查,与银杏叶有关的产品在韩 国和国际上拥有广阔的市场. 在韩国境内, 这些产品的高层规模每年为 1000 亿元 (约 740 韩国元合 1 美元) .在美国,这些产品的年销售额可达 20 亿美元.韩国各企业在 扩大银杏叶综合加工设施的同时,还派遣人员到海外进行市场调查,以便使有产在产 品占领国际市场.目前韩国制药业厂家要求完全禁止出口银杏树叶,而要用它制成药 剂以后再出口,德国和法国的制药业厂家每年从韩国进口 1200 吨银杏树叶,价值约 350 万美元.韩国东方制药业公司认为,如果不出口银杏树叶而用它制成成药再出口, 每年可以获得 1 亿美元的 利润.该公司用银杏树叶作原料成功的生产出"静克敏" , 可预防和医治高血压,糖尿病和心脏病,还可兼作解毒剂. 在美国银杏叶机构化采收后,通过气干处理,使含水量达到 12%,把干燥后的银 杏叶打成 180 公斤一捆,然后再运到欧洲的加工厂去加工. 每 100 公斤银杏叶可制得 1 公斤提取物(黄酮类,萜类,苦内酯等 8 种化合物) . 每公斤提取物售价为 3 万美元.这些提取物除医药应用外,还可做成保健食品,保健 饮料,巧克力糖,口香糖和其他食品. 近几年,日本儿玉株式会社每年向西欧市场出口银杏树叶达数百吨. 瑞典每年从中国进口大量用于治疗心绞痛,心肌梗塞,动脉硬化和脑血管痉挛等疾病 的银杏叶干浸膏药.80 年代以来,世界上许多国家对银杏叶药物药理化学成分及临床 效果进行了广泛地研究. 银杏叶提取物在亚洲和欧洲国家中年销售额在 5 亿美元以上. 二,项目市场前景分析: 银杏为目前世界上较为成熟的植物提取物,以银杏提取物为原料制成的各种制 剂,科学家的应用于药物,保健食品,功能性饮料等产品.银杏制剂是近年畅销的中 成药品种,在心脑血管用药中处于比较重要的地位.在全球的天然药物中,银杏制剂 是用量最大的品种之一.中国的银杏制剂市场在 1997—2000 年曾经快速增长,各地 大量种植银杏树,开辟种植园.2000—2002 年,银杏制剂药物的各种剂型均受市场欢 迎,片剂,注射剂成为制剂市场的主导剂型.胶囊,滴剂也展示了良好的发展潜力. 在中国生产销售银杏制剂的企业 30 余家,有银杏制剂的原研企业——德国威玛舒培 博士大药厂(金纳多) ,法国博福——益普生国际制药公司(达纳康) ,北京双鹤制区 股份有限公司(舒血宁注射液) ,浙江康恩贝制药股份有限公司(天保宁) ,三九制药 股份有限公司(999 银杏叶片) ,山西傅山制药股份有限公司(络欣通)等.但具备国 药准字的产品占少数.从银杏叶制剂医院市场集中度看,德国威玛舒培大药厂,浙江 康恩贝制药公司,上海中药制药一厂,广东深圳海王药业有限公司等 5 家企业的市场 占有率达到 81.6%.其中德国威玛舒培大药厂金纳多占有最大用药份额为 26.9%. 法国博福——益普生制药集团 2002 年全球销售收入 7.04 亿欧元.从黏土中提取 有效成份而制成的治疗儿童腹泻药思密达和从银杏叶中提取有效成分而制成的药物 达纳康,在去年其全部产品销售额中占据着 34.8%的份额.韩国第三大跨国公司 SK 研发的治疗高血压的银杏叶提取药物,2002 年销售额达到 1300 万美元,超过中国同 类最好企业.贵州益佰制药的"银杏达莫"注射液在处方药市场的进攻咄咄逼人,营 销手段丰富多彩,10 万大奖满天飞,临床推广手册,单面更是精心策划,益佰制药作 为民营 制药的生力军,勇猛有余,如能实施良好的客户关系策略,将成为中国制药领 土完整域的一匹黑马. 中国的银杏制剂市场目前 仍然处于婴儿时期,未来的空间巨大.国产品种和进 口品种可以说仍然处于同一起跑线上,各自具备成为领跑者的机会. 银杏叶制剂产品已被世界所公认.目前主要的市场情况如下: 目前的我国市场现状仅处在一个刚认识,刚开发的阶段,银杏叶的综合开发刚刚 开始,中国的市场空间是巨大的,是不可限量的.目前,银杏叶制剂产品已达 120 亿 元,并每年 80%的速率递增,这是其他任何中药材所没有的.国内开发的产品以片剂 为主,包括胶囊,口服液,茶类等,国人对银杏叶制剂产品的认识处在一个刚刚萌芽 的阶段. 如冻干粉针等至今是一片空白,还没有国家新药,处在研究阶段,主要靠进口. 国内的 银杏叶粗提物 80%以上出口到国外. 国外市场: 国外市场: 从 70 年代中期起,德国每年从韩国进口达 1000 万美元的银杏叶片提取物(银杏 叶每吨价格为 2500 美元) ,用于生产降低胆固醇药物.80 年代从中国进口银杏叶.据 80 年代初统计,世界年销售额达 40 亿美元. 90 年代初,韩国各制药业企业每年在国内收购银杏树叶 3000,4000 吨用于制造 药品.据韩国有关企业调查,与银杏叶有关的产品在韩国和国际上拥有广阔的市场. 在韩国境内,这些产品的销售额每年为 1000 亿韩元.在美国,这些产品的年销售额 可达 20 亿美元.韩国各企业在扩大银杏叶综合加工设施的同时,还派遣人员到海外 进行市场调查,以便使有产在产品占领国际市场.目前韩国制药业厂家要求完全禁止 出口银杏树叶,而要用它制成药剂以后再出口,德国和法国的制药业厂家每年从韩国 进口 1200 吨银杏树叶,价值约 350 万美元.韩国东方制药业公司认为,如果不出口 银杏树叶而用它制成成药再出口,每年可以获得 1 亿美元的利润. 国外市场如欧美市场,日韩市场已经是越来越成熟,消费群体对银杏叶制剂及银 杏的认识越来越深刻,越来越庞大.外国从 80 年代中期对中国的银杏叶进行掠夺式 的抢购.银杏叶原料和提取物市场稳步上升. 银杏叶制剂市场一直是新药开发的热门,由于产品的前景好,市场广阔,利润空 间大.但真正开发转化为大生产而投放于市场的产品仅仅是银杏叶片,胶囊等低附加 值产品,真正的高附加值产品至今是空白,随着心脑血管疾病的患病率正在逐年不断 的增大,因此,银杏叶制剂产品的市场前景是不容置疑的. 从 03 年开始进行应来了银杏叶开发的第二个高峰期,有专家预测说银杏叶产品 的开发的将持续走热,将推动中国人对银杏系列产品的高度消费观念的进一步提高, 带动中国银杏产业的更大发展. 本产品银杏叶 冻干粉产品将填补世界空白,正常投产后将实现年销售收入 10 亿 元,利税 3.5 亿元. 三,项目研究工作概况 (一)功能主治及命名依据 本品具活血化瘀通经活络之功效,用于缺血性脑中风.中医辩证属中经络气虚血 瘀证,症见半身不遂,口知歪斜,言语汇謇涩或不语,感觉减或消失,面色恍白,气 短乏力,口流涎,自汗出,心悸便溏,手足肿胀,舌质暗淡,舌苔薄白或白腻,脉沉 细,细缓或细弦者.本品由银杏叶一味药制成,剂型为冻干粉剂.根据新药审批办法 《有关中药新药部分的修订和补充规定命名原则》中主要药物加剂型的方法,命名 为注射用银杏叶冻干粉. (二)处方来源,选题目的,选题依据 注射用银杏叶冻干粉的处方为科研方.银杏在我国有漫长的药用,食用史,素有 活化石之称.据《食疗本草》记载,其可用于心悸怔中,肺虚咳喘等症.特别是近十 年来,国内外对银杏叶提取物(GEB)进行了较深入的研究.鉴于西药在治疗中风病 时尚不能避免严惩的副作用,故我公司科研人员把传统医学理论与现代药理研究成果 相结合,运用现代制药工艺技术研制而成具有临床疗效确切,使用安全,起效迅速的 中药二类新药——注射用银杏叶冻干粉. 中风又名卒中.本病起病急骤,证见多端,变化迅速,与风性善行数变的特征相 似,故以中风名之.是以卒然昏仆,不省人事,伴口眼歪斜,半身不遂,语言不利, 或不经错仆而仅以 僻不遂为主的一种疾病.中医学认为:其发生的主要因素在于患 者平素气血亏虚,与心,肝,肾三脏阴阳失调,加之忧思恼怒,或饮酒饱食,或外邪 侵袭等诱因,以致气血运行受阻,肌肤筋脉失于濡养:或阴亏于下,肝阳暴张,阳化 风动,血随气逆,挟痰挟火,横窜经隧,蒙蔽清窍,而形成上实下虚,阴阳互不维系 的危急证候. 西医学认为脑卒中是指"发展迅速,具有血管源性脑功能局灶性障碍,并且持续 时间超过 24 小时或引起死亡的临床症候群" .因为它泛指所有脑血管病的突然发作, 故又称: "脑血管意外" .将脑血管病分为蛛网膜下腔出血,脑出血,脑梗塞,脑血管 痉挛等.引起脑座中的危险因素主要有高血压,心脏病,糖尿病,高脂血症,血液高 粘滞综合症 等疾病.因此中风病是中老年人最常见的疾病之一,具有发病率高,致死 率高,致残率高的特点.我国近年统计表明脑卒中发病率为 120,180/10 万人,患病 人数约 500,600 万人.每年死于脑卒中者约 100 万人,幸存者约 3/4 不同程度丧失 劳动能力,重度致残者占 40%以上,每年新发病约 130,150 万人,其中 60 万以上的 病例为脑梗塞患者.因此,如何提高脑血管病在恢复期的治愈率,改善患者的生存质 量,已成为国内外医学研究的重要课题. 西医学治疗缺血性脑卒中的方法主要有以下:增加脑 血流量,包括颅内外动脉旁 路搭桥术,能使座中的死亡率和再发率减少 20%;由于缺血性脑卒中 80%以上是由血 栓或栓塞造成的,因此,链激酶和尿激酶等溶栓剂常作为脑栓塞的常规治疗,能改善 病人的神经系统症状促进神经功能扩张半球周围的正常血管床,但往往不能增加缺血 区血的流量;抗血小板和抗凝治疗经证明是有临床疗效的方法,抗血小板药物临床主 要有 ASP,潘生丁,噻氯吡啶等,此类药物可显著降低脑卒中的复发率.甘露醇,速 尿,肾上腺糖皮质激素是脑卒中胖子水疗法的主要措施之一,迅速使用脱水剂能减轻 症状或拯救生命.钙离子拮抗剂,阿片受体拮抗剂,血小板激活因子拮抗剂对缺血性 脑伤有保护治疗作用. 上述治疗对于急性期挽救病人的生命起到了积极的作用.但西医往往重治疗,轻 康复,忽略了病人恢复期功能的治疗,且从西医角度来看,目前对恢复期尚无积极有 效的治疗方法,中医治疗本病强调标本兼治,结合中医的针炙,推拿,药浴等方法, 对于降低脑卒中后的致死率,致残率,复发率起到了显著作用. 中医学认为中风恢复期的基础为本虚标实,本虚主要为气虚,阴虚,兼夹标实主 要为血瘀.本虚者,因年老体虚,肾精亏虚,而"肝肾同源" ,故肾精亏虚可致肝血 不足,肝肾阴虚,阴虚无以制阳,则风阳亢张,上扰清窃,或操持过度,形神失养, 致阴血暗耗,虚阳化风,扰动为患;或房室不节,纵欲伤精,致水亏于下,火旺于上, 发为本病.瘀血者多因正气虚衰,气虚运血无力,血脑瘀滞;或暴怒伤肝,肝阳暴亢, 血随气逆,上壅清窃,瘀结于脑脉;或肝气郁结,气滞血瘀,发为本病,因此治疗上 强调标本兼治,祛邪与扶正并举.再结合中医的针灸,推拿,药浴等方法,更与西医 相配合,从整体上调调机体的失衡状态,可改善大脑局部的神经及血管功能,对于降 低脑卒中后的致死率,致残率,复发率起到了显著的作用. 目前,用于治疗脑卒中恢复期的中草药近百种,现代药学研究和临床研究均证实 对该病有确切的疗效,且新药不断出现,但是随着我国人口老龄化问题的日趋严重, 脑中风病人急剧上升,治疗脑中风恢复期的药物远远不能满足病人的需求. 现代医学研究证明银杏叶中含有黄酮类化合物,萜类化合物等生物活性成份,这 些成份具有相当强烈的抗氧化作用,能清除生物体内过剩的自由基,阻止体内脂质过 氧化,提高机体的免疫力等.其黄酮类成份,能扩冠;改善心,脑血液循环,降低血 清胆固醇,还有高层这敏,抗休克,抗器官移植排斥反应等作用,是首选的治疗心脑 血管疾病的天然药物. 因此, 开发和利用银杏叶治疗心, 脑血管疾病有着广阔的前景. (三)制备工艺及其研究资料 制备工艺 工艺研究 用正交试验法确定最佳 提取工艺. (四)与质量有前的理化性质研究资料及文献资料 银杏叶为现行版药典收载药材,有据可查. (五)临床试验用药品的原料(药材)和成品的质量标准草案及臣草说明 我们对该药组方拟定了质量标准草案及起草说明. 1,鉴别 对本品银杏叶采用薄层色谱法鉴别,斑点清晰,故列入标准中. 本品每瓶含总黄酮醇苷不得少五 25.0mg,每瓶含银杏总内酯不得 2,含量测定 少于 12.0mg. 并经中试,连续生产三批产品质量基本稳定,初步制定了临床试验用药品的原料 (药材)和成品质量标准草案及起草说明. (六)临床试验用药品的初步稳定性试验资料及文献资料 经过 三个月的正常室温下放置考核,本品在临床研究用药品包装,在常温下质量 是稳定的,直接与药物接触的包装材料对药品的质量稳定性无影响. (七)临床试验用样品及其质量检验和卫生标准检验报告书(样品数量至少应为 全检需要量的 3 倍) 产品质量与卫生学指标符合标准. (八)与功能主治有关的主要药效学试验资料及文献资料 银杏叶冻干粉 iv 7.416,2.472,0.824g 生药/kg 能显著降低局灶性脑缺血再灌 注后大鼠脑组织的梗塞范围和含水量,改善其神经行为.脑组织匀浆生化指标检测发 现该药能显著降低脑组织中 MDA 含量,升高 SOD 含量.脑组织病理切片显示该药对神 经细胞保护作用明显.表明该药对大鼠实验性局灶性脑缺血有显著的保护作用.银杏 叶冻干粉 iv 能明显缩短实验性弥散性全脑缺血大鼠的翻正反射恢复时间,还能显著 降低脑缺血再灌注后脑组织中伊文思蓝的含量.即降低脑血管通透性,表明该药对大 鼠实验性弥散性全脑缺血有保护作用. 银杏叶冻干粉 iv 能明显增加小鼠急性不完全性脑缺血后 2h 内的存活数,表明该 药对小鼠急性不完全性脑缺血有保护作用,iv 的 ED50 为 3.25g/kg(95%可信限为 2.68 —51.7g/kg) .Iv 后 10min 即开始起效,达峰时间 20min 左右,持续时间可达 120min 以上.同一剂量组 iv 的效应强于 ig.还能明显延长小鼠在缺氧状态下的存活时间, 表明该能提高小鼠耐缺氧的能力.银杏圳冻干粉 iv 给药对麻醉犬的脑血浪量,脑血 管阻力,血压,心率和心电均无明显影响.银杏叶冻干粉对 PAF 诱导家兔体外血小板 聚集有明显抑制作用.对 ADP 诱导家兔体外血小板聚集抑制作用较弱.该药 iv 和 PAF 诱导兔体内血小板聚集也有明显抑制作用;该药对血小板无明显影响.Iv 时可降低兔 红细胞压积和全血粘度,尤其是对高切变速率的全血粘度改善作用更明显,高剂量组 对低,高切变速率时全血粘度均可有改善作用.Iv 可明显抑制大鼠和家兔动——静脉 旁路血栓形成.Iv 可明显延长小鼠凝血时间. (九)一般药理研究的试验资料及文献资料 家犬麻醉(戊巴 比妥钢 i.v30mg/kg)状态下,静脉滴注银杏叶冻干粉大,中,小 三个剂量(2.7,0.9,0.3g/kg 生药三剂量) ,总体积 10ml/kg,对给药 5,10,15, 30,60,90,120 分钟测定的血压(SBP,DBP,BP) ,呼吸频率,振幅,体温,心率, 心电图(P,QRS,ST,T 波间期,振幅)参数,均无明显变化. 银杏叶冻干粉大, 小三个剂量组 中, (9.0, 4.5, 1.5g/kg 生药三剂量)按 0.1ml/10g , 体重小鼠腹腔注射,药后 30 分钟,对小鼠腹腔注射 45mg/kg 戊巴比妥钠,动物的睡 眠时间与生理盐水对照组比较均无统计学差异(p>0.05) ;对小鼠腹腔注射 25mg/kg 戊巴比妥纳动物入睡个数大剂量组与对照组比较有统计学差异(p<0.05) ;对小鼠 10 分钟内自发活动次数,大,中剂量组与对照组比较 p<0.05. 综上所述:银杏叶冻干粉上述剂量对犬血压,呼吸,体温,心电图无影响;高剂 量与戊巴比妥钠有协同作用, 能增加小鼠入睡个数; 对小鼠自主活动有一定抑制作用. (十)动物急性毒性试验资料及文献资料 银杏叶冻干粉小鼠静脉注射的,最大给药量小鼠死亡率为 30%,iv 急性毒性试验 无法测出 LD50, 小鼠 iv 最大耐受量为 21.3g 生药/kg, 相当于的临床用药的 128 倍 (临 床拟用量为 10g 生药/60kg/日,即 0.167g 生药/kg) .银杏叶冻干粉小鼠腹腔注射最 大给药量小鼠死亡率为 15%, 给药无法 LD50,经试验结果表明银杏叶冻干粉小鼠腹腔 ip 注射 LD50 大于 53.4g 生药/kg,相当于临床拟量的 320 倍. (十一)动物长期毒性试验资料及文献资料 1,大白鼠长期毒性实验 取 Sprague-Dawley 大鼠 80 只,试验分高(600mg 提取物/kg)\k (190mg 提取物 /kg),低(60mg 提取物/kg)剂量组及 5%葡萄糖注射液对照组,每组动物 20 只,雌 雄各半.腹腔注射,每天一次,每周给药 6 天,试验周期为 13 周.各试验组留 1/2 动物以观察 4 周恢复期变化. 结果表明, 大鼠的行为活动, 皮毛色泽及粪便均属正常. 摄食量未发现明显的与药物作用的有关的异常变化.高,中,低剂量组动物的体重增 长与对照组相比无显著差异. 主要的脏器生量及其九与对照组比较未见显著性差异.血液学和血液生化学实验表 明, 高,中,低剂量组大鼠血液所检测的各项指标与对照组比较未见明显由于药物所 所的异常变化. 病理切片结果显示, 个别主要脏器均有不同程度轻度改变, 通过 Ridit 分析,非药物本身所引起的病理改变,肺脏的改变可能系病毒或细菌感染所致,在临 床试验中应注意肝脏指标的变化.据此推测,高中低剂量边疆腹腔注射给予该药 13 周,大志未表现出明显的毒性反就.在本试验条件下,谝药 ip 给药 13 周,对大鼠的 无毒剂量为 600mg 提取物/kg. 若人以 60kg 计, 银杏注射液对大鼠的无毒剂量 (600mg 提取物/kg)约相当于人用剂量的 120 倍(人用剂量为 300mg 提取物/天/60kg 人) . 2,狗长期毒性实验 本 试验观察该药边疆静脉注射(iv)给药 13 周 Beagle 犬所发生的各种反应,以 评估该药的安全性.Beagle 犬 24 只,试验分药物高(300mg 提取物/kg) ,中(95mg 提取物/kg) ,低(30mg 提取物/kg)组及空白对照组(5%葡萄糖注射液) .每组动物 6 只,雌雄各半.静脉注射,每日一次,每周 6 次,试验周期为 13 周.各试验组准备 2 只动物观察 4 周恢复期变化.结果表明,静脉注射该药 13 周后对犬的血常规,血清 生化,尿常规和摄食量等均未发现明显的与药物作用有关的异常变化.动物的活动状 况在给药后一切正常.与对照组相比,各给药组的犬体重及体重增长正常且在同周内 无显著差异.犬心电图各项指标正常.组织切片检查表明,在所有受检脏器中均未见 明显的病理改变.犬心电图各项指标正常.组织切片检查表明,在所有受检脏器中均 未见明显的病理改变.在本试验条件下,银杏叶冻干粉 iv 给药 13 周对犬的无毒剂量 为 300mg 提取物/kg,约相当于人用剂量的 60 倍(人用剂量为 300mg 提取物/天/60kg 人) . (十二)处方组成及功能主治.用中医药理论阐述适应病症的病因,病机,治法 与方解略 (十三)临床试验的设计及供临床医师参阅的药理,毒理研究结论综述. 由我公司临床药理专家设计完成. (十四)补充资料——安全性试验 注射用银杏叶冻干粉对 Beagle 犬肢静脉血无溶血及红细胞凝集,对健康豚鼠和 Beagle 犬无过敏反应,对家兔肌肉注射未见注射部位肌肉组织有异常改变.对家兔耳 静脉滴注无明显血管刺激反应,对家兔无致热原反应.经以上试验,结果表明该制剂 是安全的. 四,药材指纹图谱 (一)银杏叶药材 HPLC 指导纹图谱检测标准 1,名称,汉语拼音 【名 称】银杏叶 【汉语拼音】Yinxingye 2,来源 【基 【产 源】本品为银杏科植物银杏 Ginkgo biloba L.的干燥叶. 地】江苏泰州. 【采 收 期】9-10 月. 【产地加工】秋季叶尚绿时采收,及时干燥. 3,供试品溶液的的制备(略) 4,对照品溶液的制备(略) 5,测定方法(略) 照高效液相色谱法( 《中国药典》 )2000 年版一部附录(? D)测定. 色谱条件和系统适用性试验(略) 测定法(略) 6,指纹图谱及技术参数 (1)指纹图谱(略) (2)共有指纹峰的标定: (略) (3)共有指纹峰面积的比值; (略) (4)非共有峰面积; (略) (2)银杏叶药材 HPLC 指纹图谱检测标准起草说明 1,名称,汉语拼音(略) 2,来源; (略) 3,供试品溶液的制备; (略) 4,对照品溶液的制备; (略) 5,测定方法; (略) 照高效液相色谱法( 《中国药典》 )2000 年版一部附录(? D)测定. 仪器和试剂 Waters 600E 泵;Waters 996PAD 检测器;Millennium32 工作站;717 自动进样器. 色谱条件: (略) 测定方法的选择; (略) 流动相的确定; (略) 检测波长的选择: (略) 稳定性试验 取批次为 3 的样品. 按供试品溶液制备方法制备供试品,分别在 0, 1,22,24,30 小时检测指纹图,结果见表 1,2.结果表明各色谱峰的相对保留时间 和峰面积的 比值基本没有明显的变化,符合指纹图的要求. 精密度试验 取批次为 3 的样品,按供试品溶液制备方法制备供试品,边疆进样 5 次,检测指纹图,结果见表 3,4.结果表明各共有峰的相对保留时间和单峰面积大 于或等于 10%总峰面积的色谱峰面积的比值基本一致,符合指纹图的要求. 重现性试验 取批次为 3 的样品 5 份,按供试品溶液制备方法制备供试品,检测 指纹图,结果见表 5,6.结果表明各共有峰的相对保留时间和单峰面积大于或等于 10%总峰面积的钯谱峰面积的比值基本一致,符合指纹图的要求. 五,临床方案 ——以血塞能注射液为对照药评价银杏叶冻干粉,治疗缺血性脑中风恢复期(瘀 血阻络型中风中经络)的有效性和安全性的分层随机,多中心临床研究. (一)试验背景资料 并根据《新药审批原则》《中药新药临床研究指导原则》和《药品临床试验管理 , 规范》及新药的功能主治和药效学,毒理学试验等资料制定临床方案. (二)试验目的 主要观察银杏叶冻干粉治疗缺血性脑中风恢复期患者的疗效及安全性和不良反 应. 病例入选者应符合动脉粥样硬化脑梗塞的诊断标准,符合瘀血阻络引起的中风中 经络的中医辨证标准.本次试验是采用随机,对照,单盲,多中心试验方法进行. (三)伦理要求 向受试者说明银杏叶冻干粉的临床用途,本次试验的目的,给药方法及疗程,需 要进行的实验室检查项目,可能出现的不良反应及由此采取的抢救治疗的措施等;实 验必须征得受试者的自愿同意,并由本人签署知情同意书方可实行. (四)病例入选 诊断标准 1,中医诊断标准(参照 1986 年中华全国中医学会内科学会修订的《中风病中医 诊断疗效评定标准》及在此基础上制定的新的中风中医诊断与疗效评定标准) . (1)主症:半身不遂,口舌歪斜,神志昏蒙,舌强言謇或不语,偏身麻木. (2)次症:头痛,眩晕,瞳神变化,饮水发呛,目偏不瞬,共济失调. (3)急性起病. (4)病发多有诱因,未发前常有先兆症状. (5)好发年龄多在 40 岁以上. 具有主症 2 个以上或一个主症两个次症,急性起病,结合舌象,脉象,诱因,先 兆,年龄等方面的特点即可确定诊断. 不具备上述条件,结合影像学检查结果亦可确诊. 2,中医辩证 中经络,瘀血阻络证.症见:半身不遂,口舌歪斜,言语不利,偏身麻木,口角 流涎,舌质暗或有瘀点瘀斑,舌苔薄白,脉沉涩. 3,西医诊断标准(参照 1989 年中华医学会第二次全国脑血管病学术会议第三次 修订的《各类脑血管疾病诊断要点》 ) 动脉粥样硬化性脑梗塞 ?常于安静状态下发病; ?大多数发病时 无明显头痛和呕吐; ?发病可较缓慢,多逐渐进展,或呈现阶段性进行,多与脑动脉粥样硬化有关, 也可见于动脉炎,血液病等; ?一般发病后 1-2 日内意识清楚或轻度障碍; ?有颈内动脉系统和/或椎一基底动脉系统症状和体征; ?腰穿脑脊液一般不应含血; ?CT 检查发现脑梗塞部位. 4,中风分期标准 (1)急性期:发病在 2 周以内. (2)恢复期:发病 2 周至半年. (3)后遗症期:发病半年以上. 六,临床实施方案 银杏叶冻干粉临床试验根据《新药审批原则》 ,采用随机,对照,单盲,多中心 试验方法进行. (一)试验方案设计 1,试验设计:本次试验是采用随机,对照,单盲,多中心的研究方法,病例分 组采用简单随机的方法.将符合上述诊断标准,纳入标准的合格受试者,采用随机方 法按 1:1:1 比例随机分入治疗 A 组,治疗 B 组与对照组.整个?期临床试验拟在五 家医院同时进行,治疗 A 组 120 例,治疗 B 组 120 例,对照组 120 例.每家医院试验 病例数 72 例,每组观察病例数不小于 20 例. 2,受试对象 符合试验病例标准的临床试验单位的住院和门诊病人.门诊病人应严格控制可变 因素,保证受试者单纯按试验方案用药. 1,试验分组与用药方法 本品治疗缺血性脑中风恢复期患者,故在受试准备期进行药物洗脱 1 周,以避免 其他药物治疗效应的影响. 治疗 A 组:银杏叶冻干粉,以 5%,10%葡萄糖注射液 100ml 稀释后静脉滴注,每 日一次. 对照组:血塞通注射液 5ml,以 5%,10%葡萄糖注射液 100ml 稀释后滴注,每日 一次. 疗程:每一疗程为两周. 3,合并用药:临床试验过程中,可配合西医的支持疗法及使用,自由剂清除剂, 脑代谢改善剂等疗法,但不得使用血小板激活因子拮抗剂类药物. (二)药品编盲 本试验为随机,单盲,平行对照的多中心临床试验,用于药品随机编盲的随机数 字表由统计学专业人员提供,利用 SHIFT+RAN#健计算器随机产生.按试验中心分层分 段进行随机.并由与本次试验无关人员完成药品编盲及应急信件的准备工作,其中药 品经随机编盲后的药品编号即为随机号.分药结束后,盲底将一式二份. 七,疗效性判定 (一)对治疗前后患者的神志,言语,肢体运动功能等主症进行综合评定 参照 1995 年中华医学会第四次全国脑血管病学术会议通过的疗效评定标准. 1,疾病疗效判定标准 2,临床疗效评定分级标准 3,中医证候改善程度的判定 注:计算公式(尼莫地平法)为[(治疗前积分—治疗后积分)/治疗前积分]× 100%. 八,项目进展 已获临床批件. 临床批件或新药证书转让 九,项目投资及建设情况 第二章 一,市场预测 1.国内市场: 1.国内市场: 国内市场 目前的我国市场现状仅处在一个刚认识,刚开发的阶段,银杏叶的综合开发刚 市场需求预测 刚开始, 中国的市场空间是巨大的,是不可限量的.目前,银杏叶制剂产品已达 120 亿元,并每年 80%的速率递增,这是其他任何中药材所没有的.国内开发的产品以片 剂为主,包括胶囊,口服液,茶类等,国人对银杏叶制剂产品的认识处在一个刚刚萌 芽的阶段.国内的消费意识还较低,技术水平还较落后,很多研究成果因缺少资金很 难转为生产力,如冻干粉针等至今是一片空白,还没有国家新药,主要靠进口,但价 格又很昂贵,大多数国内的消费群体还消费不起.中国的银杏叶制剂开发就处在这样 一个怪圈中. 国内市场一片空白, 银杏叶制剂的治疗效果以被世界所公认, 市场前景不可估计. 国际市场的银杏叶制剂产品如注射剂类产品几百多元一支,实际成本也(除去开发费 用)只有几元一支,属于高附加值产品.虽然银杏叶提取物市场经历了 1998 年进入 市场低谷至 2004 年整整 6 年的最低市场低谷,但没有影响到制剂产品的价格,并且 一直居高不下.从今年开始进行全力的反弹,迎来了银杏叶开发的第二个高峰期,有 专家预测说五年之内银杏叶开发的将持续走高,将推动中国人对银杏系列产品的高度 消费观念的进一步发展.这一定能带动银杏叶制剂产品的大量消费创造了条件. 2.国外市场 2.国外市场 从 70 年代中期起,德国每年从韩国进口达 1000 万美元的银杏叶提取物(银杏叶 每吨价格为 2500 美元) ,用于生产降低胆固醇药物.80 年代从中国进口银杏叶.据 80 年代初统计,世界年销售额达 40 亿美元. 90 年代初,韩国各制药业企业每年在国内收购银杏树叶 3000,4000 吨用于制造 药品.据韩国有关企业调查,与银杏叶有关的产品在韩国和国际上拥有广阔的市场. 在韩国境内,这些产品的销售额每年为 1000 亿韩元.在美国,这些产品的年销售额 可达 20 亿美元.韩国各企业在扩大银杏叶综合加工设施的同时,还派遣人员到海外 进行市场调查,以便使有产在产品占领国际市场.目前韩国制药业厂家要求完全禁止 出口银杏树叶,而要用它制成药剂以后再出口,德国和法国的制药业厂家每年从韩国 进口 1200 吨银杏树叶,价值约 350 万美元.韩国东方制药业公司认为,如果不出口 银杏树叶而用它制成成药再出口,每年可以获得 1 亿美元的利润. 国外市场如欧美市场,日韩市场已经是越来越成熟,消费群体对银杏叶制剂及银 杏的认识越来越深刻,越来越庞大.外国从 80 年代中期对中国的银杏叶进行掠夺式 的抢购. 每公斤提取物最高售价达到过 3 万美元.这些提取物除医药应用外,还可做成保 健食品,保健饮料,巧克力糖,口香糖和其他食品.1998 年达到了最低谷.2003 年 开始反弹,从 04 年开始进行全力的反弹,应来了银杏叶开发的第二个高峰期,有专 家预测说五年之内银杏叶开发的将持续走热,将推动中国人对银杏系列产品的高度消 费观念的进一步发展. 特别是从 2003 年全国各地反馈来的信息表明,已有供不应求的态势,国内银杏 叶提取物(GBE)由原来的每公斤 30 美元左右,已上升到 60 美元,国际市场更是供 不应求,法,德等国的高质量提取物已升至在每公斤 800 美元.在非洲市场,银杏叶 制剂产品倍受欢迎,被当作"神物"市场前景相当好. 银杏叶制剂年销售额达 260 亿美元,而且逐年增长. 二,销售预测 银杏叶中主要含有银杏总黄酮,银杏内酯,白果内酯,聚异戊烯醇等活性成分, 如黄酮类:对心脑血管疾病,高血脂,高血压,清除氧自由基具有显著的疗效,是目 前世界上治疗该类疾病最显著的药物.如银杏内酯 A,B,C,M 类:是血小板活化因 子(PAF)拮抗剂,是银杏叶中最重要的活性成分,是治疗神经系统疾病的特效药物. 如白果内酯类:白果内酯有很强的生物活性,为神经精神病药物,对因年老的呆傻症 有奇异的疗效,它能抗神经末梢的衰老,被誉为真正抗衰老化学物质.聚异戊烯醇促 进造血功能,改善肝脏机能,对再生障碍性贫血(白血病) ,对各种肝病,糖尿病具 有最显著的疗效,是治疗这类疾病最具有开发前景的药物.产品功效奇特,市场前景 是相当广阔的. 预计建成投产后高质量银杏叶及银杏及内酯冻干粉针剂,白果内酯冻干粉针 剂,聚异戊烯醇冻干粉针剂市场价格 400 元/支,以产量 200 万支计算,销售收入 8 亿元.滴丸按市场价格 1.5 元计算,按 1 亿粒计算销售收入 1.5 亿元,软胶囊 1000 万粒按市场单价 5 元计算,销售收入 5000 万元,原料 2000 公斤,一半自用,一半用 于出口按市场价 6.2 万美元千克(折合人民币每千克 50 万元) ,销售收入 5 亿元.共 计年销售收入 15 亿元,年利润 5 亿元. 公司经过多年的发展,销售网络遍布国内外,销售渠道一方面除了面向进出口 公司面向国外市场外,另一方面与国内的很多银杏制剂生产厂家有着密切的业务联 系,同时企业内部制剂产品需求 一部分用于生产银杏叶口服液,银杏片国内销售及 出口非洲市场,因此销售工作是本项目中最容易的工作.同时狠抓销售队伍建设,面 向全国广招销售精英,着力打造一支精干的销售队伍.在全国各大,中城市分设 销售机构,以优良的售前,售后服务拓宽销售渠道,以优秀的广告策划树立公司良好 的企业形象,从而增加企业及产品知名度,产品市场前景将会更加广阔. 公司严格按按照最新技术工艺要求和 GMP 要求对生产进行全程监控.本项目设计 力求选用国内先进设备,自控水平较高,注重节能降耗,以达到提高产品质量,降低 产品成本从而降低售价,增强市场竞争力的目的.因此,本项目无论从 产品品种,产 品质量,产品价格等方面都有很强的市场竞争力,只要抓住这次市场机会,能够在最 短的时间内收回投入. 第十三章 一,投资估算 1,概述: 根据项目内容,本估算包括三个车间,化验室,动力站,污水处理站等工程项目 的工艺设备等估算投资额为 2 亿元,包括流资 6200 万元和新药开发资金 1800 万元. 2,采用定额,指标,费用,费率和设备价格 2.1 建筑工程:九六年版《山东省建筑工程综合预算定额》和《山东省临沂市 投资估算 工程建设材料预算价格》并参考类似工程预算指标估列. 2.2 2.3 2.4 2.5 安装工程: 《化工建设概算定额》 定型设备:各生产厂提供的定型设备现行出厂价格. 非标设备:采用机械工业部,化学工业部《非标设备计价办法汇编》 建筑工程的综合费率按临沂市有关规定. 二,资金来源 本项目总投资估算为 2 亿元,其中:固定资产投资为 1.2 亿元,流动资金 6200 万元,新药开发资金为 1800 万元.主要通过合作或融资的方式获得,少部分资金由 公司筹得. 第十四章 一,编制依据 该项目品种销售价格是根据国家对新药给予企业的定价权,参照国外,国内同类 产品的现行价格,确定了该项目品种的价格. 1,生产规模及产品产量 该项目产品正常年生产规模原料 200 吨,冻干粉针剂 600 万支. 2,项目计算期 该项目拟 3 年建成,第四年即可试产,生产负荷达到设计能力的 80%,第五年后 到 100%,满负荷生产,生产寿命期 18 年,计算期为 20 年. 3,项目投资估算 本项目总投资估算为 2 亿元,其中:固定资产投资为 12000 万元,流动资金估算 为 6200 万元. 二,产品成本估算 总成本费用估算正常年份为 2.19 亿元,成本费用估算说明如下: 1,原材料及公用系统价格 本项目产品所需的各种原材料,辅助材料及燃料动力价格均以现行市场价格为基 础.估计:黄酮甙按市场价 60 美元/公斤,包括其他辅料共计约 3900 万元 2,工资及福利估算: 该项目新增定员 118 人,工资及附加费按 8000 元/人,年提取福利基金比例按工 资总额的 20%,预计工资及福利费用 113.28 万元. 3,固定资产折旧和无形资产及递延资产摊销计算 在固定资产投资中,除土地费用进入固定资产原值外,其余费用均为无形及递延 资产. 固定资产原值为 1.35 亿元,按综合折旧率 5‰计算折旧,折旧年限为 12 年,年 折旧额为 807.42 万元. 经济效益分析 无形资产为 6000 万元,按 10 年摊销,年摊销费用为 600 万元. 递延资产为 800 万元,按 5 年摊销,年摊销费用为 160 万元. 4,修理费用计算 修理费按年提取,全年提取 300 万元 5,借款利息计算 流动资金如果按借款计算,利息计入财务费用,正常年应计利息为 500 万元. 6,其他费用计算 其他费用是在制造费用,销售费用,管理费用扣 除工资及福利费,折旧费,摊销 费,修理费后的费用,估算如下: 6.1 6.2 6.3 制造费用的其他费用按工资总额的 50%计提,约提取 70 万元 销售费用中的其他费用按销售收入的 10%计提,约提取 1.5 亿元 管理费用中的其他费用按车间成本的 9%计提,约提取 450 万元 上述三项费用之和为 1.552 亿元,计入其他费用. 三,财务评价依据 本项目评价采用投资利润率.即投资利润率,投资利税率及内部收益率为基准指 标,其数据依次为 212.8%,92.5%,67.0%,以上各项指标均为税后值. 四,销售收入 本项目产品正常年销售收入为 15 亿元,正常年销售利润总额为 2 亿元,所得税 按利润的 33%提取,全年提所得税 0.66 亿元. 五,盈利能力分析 所得税后财务净现 FNPV(I0=15%)1.34 亿元 所得税后财务内部收益率 FIRR 为 67.0% 所得税后投资回收期满 0.8 年 以上各数据说明,税后的 FIRR 为 67.0%大于零,静态投资回收期 0.8 年,无投资 风险,说明盈利能力满足产业要求,所以该项目在财务上是可考虑接受的. 根据损益表和固定资产投资估算表计算主要经济指标: 年净利润总额 1.34 投资利润率=———————————×100%=——————-×100%=67% 固定资产投资+流动资金 六,盈亏平衡分析 以生产能力利用率表示的盈亏平衡点 年固定成本 2.19 2 BEP=—————————————————×100%=————————×100%=17.02% 年销售收入-年可变成本-年销售税金附加 15-0.8-1.34 计算结果表明该项目只要达到设计能力的 17.02%时,收与支即可达到平衡,企业 就可以保本,因此该项目风险性较小. 从以上财务评估看,财务内部收益率高于行业基准收益率,投资回收期短,项目 有一定的抗风险能力,因此该项目从财务上讲是可行的. 第十五章 一,综合评价 1,产品方案和建设规模 银杏叶制剂产品质量超过国内同类产品,完全可达到出口产品要求.为满足市场 需求,提高产量和质量,改善生产环境,对现有的工艺设备进行技术改造,其产品 方 案是合理的. 建设规模考虑了市场容量和企业承受能力,项目所需物料供应有保障.企业有十 多年的银杏叶制剂研究和制药生产经验,技术优势较强.本项目拟定的产品规模是有 广阔的市场前景的.因此建设规模是合适的. 2,技术水平可靠性 项目产品是由山东仁和制药有限公司分别与上海复旦大学,贵州药物研究院,合 肥工业大学合作工艺的基础上经过多年实践经验的基础上改造而成的,产品生产工艺 评价结论 国内先进.所选设备自控水平高,能够保证产品质量.设计中注重节能降耗,加强劳 动安全卫生,消防,环境保护等治理措施,达到国家有关法规,规范及标准要求.因 此产品工艺路线是可行的,劳动安全卫生,消防和环保措施是有效 的. 3,建设的可行性 该项目是在临沂市郯城县原厂址扩建的,厂区自然条件,地理位置,交通运输, 当地施工协作条件等对项目建设都是有利的.所需原辅料,包装材料供应方便,公用 系统配套齐全,供应有保障,故项目的改造条件是好的. 4,经济效益 初步经济效益测算可见,税后投资回收期不到一年,经济效益是相当可观的. 二,结论 本项目产品方案合理,建设规模合适,工艺技术先进可靠,劳动安全和环保措施 有效,建设条件较好,税后内部收益率较好,企业经济效益和社会效益较好.综上所 述,本项目技术上是可行的,经济上是合理的.