【doc】菠萝中维生素C的高效液相色谱分析
菠萝中维生素C的高效液相色谱分析
第5卷第1期
2003年1月
大连民族学院
JOURNALOFDALIANNATIONALITIESUNIVERSITY
Vo1.5No.1
Jan.2003
菠萝中维生素C的高效液相色谱分析
姜波,范圣第,刘长建,花艳红
(大连民族学院生物工程系,辽宁大连开发B-116600) 摘要:介绍丁采用高效液相色谱法,通过低浓度的草酸流动相,测定菠萝中维生素C
含量的方法.回收
率为99.4%,103.6%,相对标准偏差小于5%.
关键词:维生素C;菠萝;高效液相色谱
中图分类号:0629.4文献标识码:B文章编号:1009—315X(2003)O卜0052—02
维生素C是维持人体正常生理代谢的一种重
要化合物,若严重缺乏会引起坏血病.维生素C
还可参与体内氧化还原反应,具有解毒的作用.
30年代时,维生素C就被广泛用于增加机体对传
染病的抵抗力,近年的研究表明维生素C可预防
癌症,并对肝炎,肝硬变有疗效.但人体自身不
能合成维生素C,必须由食物中摄取.维生素C
广泛存在于新鲜水果,蔬菜中.维生素C测定的
方法一般有比色法,荧光法等,操作繁琐,近年
来发展用高效液相色谱法测定.本文利用高效液
相色谱法,通过采用低浓度的草酸流动相,分析
了菠萝中的维生素C含量,取得了理想的效果.
1实验部分
1.1仪器与试剂
(1)高效液相色谱仪:LC一10A:二极管阵 列检测器:SPD—M10A;自动进样器:SIL—l0A; 高压输液泵:LC—l0A,均为日本岛津公司.色谱 柱:HYPERS1L—Cl8(5m,250mm4.6mm),火 连依利特科学仪器有限公司.
(2)维生素C标准对照品:维生素C含量
: 99.7%,中国医药上海化学试剂公司产:草酸分析纯,沈阳医药有限公司;甲醇:HPLC级, 美国Tcdia公司,使用前经0.45~tm膜过滤;超纯 水:自制,使用前经0.451~m膜过滤.
1.2实验步骤及实验条件
样品的处理:取菠萝于组织匀浆机中匀浆, 然后用布氏漏斗过滤.称取5g菠萝滤液于25mL 容量瓶中,用0.1%草酸溶液定容.分析前需用 0.45lam滤膜过滤.
维生素C标准溶液的制备:准确称取维生素 C标准品50.2mg于小烧杯中,用0.1%草酸溶液 溶解,转移至50mL棕色容量瓶中,稀释至刻度, 得到维生素C含量为1000Ilg/ml的标准溶液. HPLC流动相的制备:准确称取1.005g纯度 为99.5%草酸于100ml小烧杯中,用超纯水溶解 转移至lO00ml容量瓶中,用超纯水稀释至刻度, 然后用0.451am滤膜过滤.
HPLC检测条件:流动相为0.1%草酸溶液, 流速为1.0ml/min;检测波长为254nm,进样量为
. 51aL,柱箱温度为3O?
2结果与讨论
2.1维生素c检测波长的选择
维生素C溶液在254nm有最大吸收,故本实 验以254nm作为检测波长.
2.2流动相的选择
因为液体维生素C具有较强的还原性,它易 受空气,热,光,金属离子等的影响,而它在酸 性溶液中却很稳定,即使加热也不被破坏.为保 证维生素C在测定过程中一直处于稳定状态,所
1%草酸 以流动相应选用酸性溶液,本实验选用0.溶液.
2.3样品溶剂的选择
收稿日期:2002.08.17. 作者简介:姜波(1960-),女,辽宁普兰店人,大连民族学院生物工程系高级工程师.
一
52一
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第1期姜波,范圣第,刘K建,等:渡萝中维生素C的高效液相色谱分析第5卷
为防J卜维生素C被氧化分解,样品0.1% 草酸溶液溶解.不加草酸而直接用超纯水处理样 品,所得的峰面积为110667,样品草酸处理后, 所得的峰面积为974143,由此可见,维生素C住 纯水中分解得很明显.
2.4标准工作曲线
维生素c标准溶液浓度及测定的结果见表1. 标准J作曲线见图1,
表l标准溶液浓度及峰面积
维生素C标准溶液浓度测得的峰面积 (I.tg/mL)
20
40
60
80
l00
l9l962
3806l7
58372l
793926
967203
l500000
l000000
每.
誉500000
O
5Ol00150
Vc浓度(mg/i)
图l标准工作线曲
由图l可见,标准工作曲线的为0.9995, 说明标准曲线的相关性良好.
2.5回收率实验
在5个维生素C含量均为120p.g菠萝样品的 10mL容量瓶中,分别加入不同量的维生素标准 样品,测定其回收率,结果见表2.回收率在 99.4%,103.6%之间,说明本方法可靠 表2回收率实验结果
2.6精密度实验
用同一菠萝样品在同一条件下进行8次测定, 结果见表3.测定结果的相对标准偏差小于5%. 菠萝的色谱见图2.
表3精密度实验结果
8
J1
,一,一,——
妒,一
图2菠萝样品的色谱图
方法具有所用试剂少,操作简单等特点.
采用的弱酸性流动相避免了维生素C的分解.
参考文献:
[1lR.Macrae着,曹志军译现代实用高效液相色谱分析法【MJ北京:天则出版社,1992.
【2J宋欢高效液相色谱法测定浓缩沙棘汁中的维生素c【c】.第十三次全国色谱学术报告会文集:444-445
DeterminationofVitamincinPineapplebyHighPerformanceLiquidChromatography
JIANGBo,FANSheng—di,LIUChangJian,HUAYahHong (BiologyEngineeringDepartmentDalianNationalitiesUniversity,DalianDevelopmentZo
ne116600,China)
Abstract:DeterminationofvitaminCinpineapplebyHPLCwithlowconcentrationofoxalic
acidasflowphaseispresentedTherecoveryrateis99.4,
103.6%,andtherelativestandarddeviationisbelow5% Keywords:vitaminCpineapple;HPLC
一
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