果蔬维生素C含量测定及其分析

果蔬维生素C含量测定及其 果蔬维生素C含量测定及其分析 摘要 本次实验我们测定了橘子中的维生素c含量，试验中，通过2,6-二氯酚靛酚对维生素C的滴定从而测定了橘子所含的维生素C含量，我们测得橘子的维C的含量是20.46mg/100g，相对较低。经查阅资料，讨论后发现维生素C在空气中易氧化，而且不同成熟程度、品种、新鲜程度、生长地、测定温度等客观因素也会对其有很大的影响。 一、前言 实验目的: 测定橘子中的维生素c含量，从而进行分析。 实验原理: 维生素C是人类营养中最重要的维生素之一，缺少它时会产生坏血病，因此又称为抗坏血酸(ascorbic acid)。它对物质代谢的调节具有重要的作用。近年来，发现它还有增强机体对肿瘤的抵抗力，并具有化学致癌物的阻断作用。 维生素C主要存在于新鲜水果及蔬菜中。水果中以猕猴桃含量最多，在柠檬、桔子和橙子中含量也非常丰富;蔬菜以辣椒中的含量最丰富，在番茄、甘蓝、萝卜、青菜中含量也十分丰富，野生植物以刺梨中的含量最丰富，每100克中含2800毫克，有“维生素C王”之称。维生素C为无色晶体，味酸，溶于水及乙醇，不耐热，在碱性溶液中极不稳定，日光照射后易被氧化破坏，有微量铜、铁等重金属离子存在时更易氧化分解，干燥条件下较为稳定。故维生素C制剂应放在干燥、低温和避光处保存;在烹调蔬菜时，不宜烧煮过度并应避免接触碱和铜器。O C CHOOCl CHOOHNO++CHH HOHClNClHOC 2OCH OH(红色)2，6,二氯酚靛酚O还原型抗坏血酸O (蓝色)CCl COClO CONOHO+ HC ClHCHO(无色)2HCH OH 还原型2，6,二氯酚靛酚 维生素C具有很强的还原性。它可分为还原性和脱氢型。还原型抗坏血酸能还原染料氧化型脱氢抗坏血酸 2,6-二氯酚靛酚(DCPIP)，本身则氧化为脱氢型。在酸性溶液中，2,6-二氯酚靛酚呈红色，还原后变为无色。因此，当用此染料滴定含有维生素C的酸性溶液时，维生素C尚未全部被氧化前，则滴下的染料立即被还原成无色。一旦溶液中的维生素C已全部被氧化时，则滴下的染料立即使溶液变成粉红色。所以，当溶液从无色变成微红色时即表示溶液中的维生素C刚刚全部被氧化，此时即为滴定终点。如无其它杂质干扰，样品提取液所还原的染料量与样品中所含还原型抗坏血酸量成正比。 试剂和器材 1试剂 ? 2%草酸溶液: 草酸2g溶于100mL蒸馏水中。 1%草酸溶液: 草酸1g溶于100mL蒸馏水中。 标准抗坏血酸溶液(1mg/mL): 准确称取100mg纯抗坏血酸(应为洁白色，如变为黄色则不能用)溶于1%草酸溶液中，并稀释至100mL，贮于棕色瓶中，冷藏。最好临用前配制。 0.1% 2,6-二氯酚靛酚溶液: 250mg 2,6-二氯酚靛酚溶于150mL含有52mg NaHCO的热水3中，冷却后加水稀释至250mL，贮于棕色瓶中冷藏(4?)约可保存一周。每次临用时，以标准抗坏血酸溶液标定。 2材料 ? 橘子1只 3器材 ? 锥形瓶100mL(，2);移液管10mL(，2);容量瓶100mL(，1);250mL(，1);50mL(，5);微量滴定管5mL(，1);研钵;漏斗;纱布。 操作方法 1提取 ? 水洗干净整株新鲜蔬菜或整个新鲜水果，用纱布或吸水纸吸干表面水分。然后称取20g，加入20mL 2%草酸，根据实验需要处理样品，然后用研钵研磨，四层纱布过滤，滤液备用。纱布可用少量2%草酸洗几次，合并滤液，滤液总体积定容至50mL。 2?标准液滴定 准确吸取标准抗坏血酸溶液1mL置100mL锥形瓶中，加9mL 1%草酸，用微量滴定管以0.1% 2,6-二氯酚靛酚溶液滴定至淡红色，并保持15s不褪色，即达终点。由所用染料的体积计算出1mL染料相当于多少毫克抗坏血酸(取10mL 1%草酸作空白对照，按以上方法滴定)。 3 样品滴定? 准确吸取滤液两份，每份10mL, 分别放入2个锥形瓶内，滴定方法同前。另取10mL 1%草酸作空白对照滴定。 数据记录与处理 1、标准滴定结果 用0.1%的2,6-二氯酚靛酚溶液滴定抗坏血酸溶液，得到以下数据(表一): 表一 0.1%2,6-二氯酚靛酚的标准滴定 1ml标准抗坏血酸溶液+9ml1%草酸 10ml1%草酸 0.1%2,6-二氯酚靛酚溶液(ml) 5.30 5.45 0.10 表二 多种蔬果的维生素C含量测定 蔬果名蔬果质0.1%2,6-二氯酚靛酚溶液用量(ml) 维生素C含量称 量W(g) (mg/100g样品) 组别1 组别2 平均值 10ml0.1%草酸 橘子 20.012 4.34 4.48 4.41 0.10 20.46 数据处理:由结果得 1ml抗坏血酸需要的染料(0.1%的2,6-二氯酚靛酚溶液)的体积为 V*=(5.30+5.45)/2-0.10=5.275ml 1ml染料能氧化抗坏血酸质量为T=1*1/5.275=0.19mg 2、多种水果蔬菜的维生素C含量测定结果 本组试验我们选取了橘子作为材料，并对其进行了维生素C含量测定。同标准滴定操作相似，用0.1%的2,6-二氯酚靛酚溶液对样品进行滴定，得到以下数据(表二，图一)，并由公式得样品中维生素C的含量(100mg/100g样品): (-)100VVCT，，，AB附公式, 维生素含量(样品),Cmg/100gDW， 式中:V为滴定样品所耗用的染料的平均毫升数;(V=4.41mL) AA V为滴定空白对照所耗用的染料的平均毫升数;(V=0.10mL) BB C为样品提取液的总毫升数;(C=50mL) D为滴定时所取的样品提取液毫升数;(D=10mL) T为1mL染料能氧化抗坏血酸毫克数(由操作二计算出);(T=0.19mg) W为待测样品的重量。(W=20.012g) 注意事项 (1) 某些水果、蔬菜(如橘子、西红柿等)浆状物泡沫太多，可加数滴丁醇或辛醇。 (2) 整个操作过程要迅速，防止还原型抗坏血酸被氧化。滴定过程一般不超过2min。滴定所用的染料不应小于1mL或多于4mL，如果样品含维生素C太高或太低时，可酌情增减样液用量或改变提取液稀释度。 (3)提取的浆状物如不易过滤，亦可离心，留取上清液进行滴定。 五、讨论与误差分析 通过查阅资料，我们了解到，我组测得的桔肉维生素C含量为20.46mg/100g，相对偏低，分析其原因为: 1、研磨时，研磨的不完全，过滤使得纱布上有残余; 2、滴定时,滴定管有微小漏液，导致结果数据有误差; 3、可能受到橘子成熟程度、品种、新鲜程度、生长地、测定温度等客观因素; 4、由于操作不熟练，整个操作不够迅速，滴定过程超过了2min，导致还原型抗坏血酸被氧化，从而测定的结果偏小。 六、思考题 1(为了测得准确的维生素C含量，实验过程中都应注意哪些操作步骤,为什么, (1)过滤后纱布尽量用少量2,草酸多洗几次以保证维生素c基本析出;若泡沫太多，可加数滴丁醇或辛醇。 (2)为了防止还原型抗坏血酸被氧化，滴定过程一般不超过2min。 (3)滴定所用的染料不应小于1mL或多于4mL，如果样品含维生素C太高或太低时，可酌情增减样液用量或改变提取液稀释度。 2,试简述维生素C的生理意义。 维生素C参与体内的众多氧化还原反应。可促进细胞间质的完整，保持细胞间质的完整，增加毛细血管壁致密度，降低其通透性及脆性;具有抗炎抗过敏作用;具有还原性，有保护酶系的巯基以避免被毒物破坏的作用，可用于铅、汞、砷、苯等的慢性中毒和放射线病;大量维生素C有中和细菌内毒素，促进抗体合成，增强白细胞吞噬功能;促进铁在肠内吸收，对血红蛋白的合成和红细胞的成熟有影响;维生素C对增强鱼的抗病力有重要作用。本品蛋白结合率低。少量贮藏于血浆和细胞，以腺体组织内的浓度为最高。肝内代谢。极少数以原形物或代谢物经肾排泄，可经血液透析清除。维生素C主要用于由维生素C缺乏引起的全身淤点，齿龈、肌肉、关节囊及浆膜腔等出血症状的坏血病。同时可增强机体对传染病的抵抗力，用于结核病、急性或慢性传染病、感染性休克的辅助治疗;缓解应激、解暑热;改善种公畜精液质量;防治代谢性酸中毒、高血钾症的治疗以及氨基甙类对第8对脑神经的损害。此外还可用于各种贫血、肝胆疾病的辅助治疗;促进创伤愈合;缓解砷、汞、铅、苯等慢性中毒。