胶体金免疫层析法在早孕检测中的应用

胶体金免疫层析法在早孕检测中的应用 陈 　丽 448000 　荆门职业技术学院 　湖北省 　荆门市 　　摘 　要 　目的 :免疫层析法是将特异的抗体先固定于硝酸纤维素膜的某一区带 ,当该干燥的硝酸纤维素膜一 端浸入样品 (尿液或血清)后 ,由于毛细管作用 ,样品沿该膜向前移动 ,当移动至固定有抗体的区域时 ,样品中相应 的抗原与该抗体发生特异性结合 ,若用免疫胶体金染色可使该区域显色。胶体金标记稳定、易贮存 ,常用于定性或 半定量的快速免疫检测方法中. 在免疫层析快速诊断技术中常用于β- HCG的特异性免疫诊断早孕检测等 ,具有 快速、准确和无污染等优点。 关键词 :胶体金 　免疫层析法 　双抗体夹心 　早孕检测 中图分类号 :R446. 61 　　　文献标识码 :B 　　　文章编号 :1003 - 6245 (2006) 12 - 0928 - 02 　　人类绒毛膜促性腺激素 ( HCG) ,是合体滋养细 胞分泌的一种糖蛋白激素 ,由与 FSH、L H 具有同源 性的α亚基和特异性β亚基组成 ,约在受精后第 6 天开始分泌 ,停经 60 - 70 天时达高峰。通过检测尿 液或血清中的特异性β- HCG可以协助诊断早孕 , 也可辅助诊断妊娠相关疾病如异位妊娠、滋养细胞 疾病等。 胶体金免疫层析法常用于早孕的快速诊断 :妊 娠“指示剂”HCG 抗原通过免疫层析与相应抗α - HCG抗体及胶体金标记的抗β- HCG抗体桥连形 成双抗体夹心复合物 ,复合物达到一定的量可以显 色。人们据此制成了早孕诊断试纸. 这种方法检测 速度快 ,3 - 5 分钟出结果 ;灵敏度高 ,可达 25U/ L ; 好的试纸条准确度达 95 %以上。本文以常见的早 孕试纸为例简单介绍有关知识。 1 　试纸构成 1 . 1 　材料 :粘性材料、硝酸纤维素膜 (NC 膜) 、玻璃 纤维 ( P H8 - 10) 、鼠源性抗α - HCG 抗体 (简称鼠 多抗) 、干的胶体金标记鼠源性抗β- HCG 聚酯膜 (简称金标) 、硬质吸水滤纸、1. 2. 装配方法 :在粘性 材料上粘上 NC 膜 ,将鼠多抗固定于 NC 膜上。NC 膜上方粘吸水滤纸 (滤纸与膜重叠) , NC 膜下方依 次粘上金标、玻璃纤维 (三者逐层重叠) 。按需要切 成不同宽度。一般试剂条宽 4 - 5mm。 2 　基本原理 双抗体夹心 :阳性样品通过层析作用与红色或 紫色 (视标记浓度而定) 金标发生免疫反应 ,在层析 作用下向上泳动 ,把金标通过 HCG桥连到 T 线上 , 形成“胶体金标记的抗β- HCG抗体 - HCG - 抗α - HCG”双抗体夹心复合物 ,由于该复合物直径大 于 NC 膜的孔径而在 T 线位置沉积 ,达到一定量金 标显色有肉眼可见水平。多余的金标继续泳动到 C 线位置 ,由于多抗鼠与鼠源性单抗反应桥连金标显 色。阴性样品因无 HCG 不能桥连金标与 T 线 ,只 有 C 线显色. 3 　结果判读 β - HCG 的特异性、标记浓度、温度、P H、NC 膜的孔径大小等都直接影响试纸特异性以及灵敏 度 ,判断结果时需结合临床。 无 C 线 产品无效或使用不当。 无 T 线 提示未怀孕 ,因 HCG试纸常存在高浓 度钩状效应 ,在浓度超过一定值时 T 线变弱甚至表 现为阴性 ,需排除漏诊。 C 线、T 线 早孕 ,颜色深浅与 HCG 浓度有关 ; HCG - α亚基特异性差 ,阳性时应该排除 FSH、 TSH、L H 的干扰 ;还需结合临床排除妊娠相关疾 病。 4 　注意事项 使用时应注意下列问题 : 4 . 1 　温度 :试纸条应该放在 4 ℃保存 ,以免抗体失 效 ,从冰箱刚取出的试纸条应待其恢复至室温后才 打开密封 ,可避免反应线模糊不清。 4 . 2 　正确操作 :试纸插人样品中深度不可超过标志 线 ,浸人时间不可过长 ,取出试纸条后应平放 ,以避 ·829· 医学动物防制 2006 年 12 月第 22 卷第 12 期 免过量的尿液造成 HCG 抗原过剩 ,引起假阴性 ,3 - 5 分钟观察结果 ,15 分钟后结果无效。 4 . 3 　取样 :宜取新鲜晨尿以免激素降解。饮水可能 稀释标本 ,取样前 1 小时不宜大量饮水。 参 　考 　文 　献 1 　周友泉 ,《免胶体金的制备及其在医学检验中的应用》, http :/ / www. labcn. com/ technology/ tech_jt . ht m 2 　王利君 ,何思春 ,王修石《胶体金试纸检测尿 HCG的钩状效应及 对策》Labeled Immunoassays 乙 Clin Med , Mar. 2006 , Vol . 13 , No . 1 产后出血的预防和护理 陈淑霞 222100 　江苏省连云港市赣榆县疾病控制中心 　江苏省 　连云港市 　　摘 　要 　目的 : 产后大出血是指胎儿娩出 24 小时内 ,阴道流血量达到或超过 500 毫升。多发生于产后 2 小 时内 ,是产科常见而又严重的并发症 ,也是造成产妇四大死亡原因的最常见原因。而产后出血的最主要原因是宫 缩乏力 ,其次是胎盘潴留、软产道损伤、凝血功能障碍等。预防和护理产后出血是产科医护工作者重要的任务之 一。在这里总结了我们对产后出血的预防、监测、抢救、护理的对策、做法和体会。 中图分类号 :R714. 46 + 1 　　　文献标识码 :A 　　　文章编号 :1003 - 6245 (2006) 12 - 0929 - 02 1 　临床资料 　　2002 年 1 月～2005 年 12 月年在我科住院的产 后出血患者 356 例 ,其中初产妇 172 例 ,经产妇 184 例 ;未做产前检查的 10 例 ;院外以产后出血转入我 科的 136 例 ;年龄最小 19 岁 ,最大 44 岁 ,平均 29. 8 岁。分娩方式 :剖宫产 76 例 ,顺产 180 例。子宫切 除 8 例。出血量 1000～2000ml 者 224 例 ; 2000～ 3000ml 者 124 例 , 3000～4000ml 者 6 例 , 4000ml 以上者 2 例。出血原因 :子宫收缩乏力 267 例 (75. 0 %) ,胎盘因素 45 例 (12. 5 %) ,软产道损伤 34 例 (9. 6 %) ,凝血功能障碍例 6 (1. 7 %) ,子宫破裂 4 例 (1. 1 %) 。有产后出血高危因素 261 例 (73. 3 %) 。 治愈 351 例 (98. 6 %) ,转上级医院 4 例。 2 　产后出血的预防 产后大出血多因宫缩乏力、胎盘滞留、产妇软产 道损伤或凝血功能障碍等原因引起 ,为防止产后出 血的发生 ,要做到 : 2 . 1 　产前定期检查 ,加强健康教育 妊娠期要进行 定期产前检查 ,及早发现妊娠并发症及其他异常 ,对 有可能发生产后出血的孕妇 ,如多胎 ,多产、羊水过 多 ,妊高征等 ,尤应引起重视。对孕妇进行有关高危 妊娠因素及产前保健的宣教工作 ,提高孕妇的孕期 保健意识 ,了解孕期相关知识 ,教会孕妇自我监测技 能 (自测胎动、识别胎动异常、掌握产检时间、预产期 等) 。尽可能提高孕妇自身保健素质和技能 ,医务工 作者要特别注意识别高危因素 ,对高危孕妇加强管 理 ,定期随访并记录。 2 . 2 　产时监护 在产妇临产入院后给以凝血四项、肝功能等实 验室检查 ,以了解产妇凝血功能。分娩期加强分娩 监护及护理 ,严密观察和正确处理三个产程 ,防止滞 产及急产等发生。在胎肩娩出后 ,即予以肌注或静 脉注射宫缩素 ;在胎盘娩出后 ,仔细检查胎膜是否完 整 ,有无残留 ;仔细检查软产道有无裂伤 ,如有裂伤 及早缝合。 2 . 2 . 1 　第一产程要密切注意观察产程、胎心、宫缩 变化 ,及时肛查 ,了解宫口扩张和胎先露下降的位 置 ,用产程图描述监测产程进展情况 ,及时发现和处 理产程延缓和停滞 ,如需手术助产或剖宫产时做好 一切术前准备和预防产后出血的准备 ,使用催产素 静滴引产要有专业经验的护士专人守护 ,认真仔细 观察滴速和胎心、宫缩情况。并且注意和孕妇交流 沟通 ,消除其紧张的心理情绪 ,让产妇做到更好的配 合 ,有利于产程的进展。 2 . 2 . 2 　第二产程要注意胎心变化及科学接生 ,特别 注意保护会阴 ,防止软产道损伤 ,在胎头娩出后 ,让 产妇哈气 ,旋转胎肩缓慢娩出 ,对巨大儿不可强力拉 出胎肩。胎儿娩出后 ,随即用弯盘接收阴道出血 ,采 用容积法计算出血量 ,方法简单而准确。注意不要 ·929·医学动物防制 2006 年 12 月第 22 卷第 12 期