醋酸烯诺孕酮稳定性试验的方法比较

·!"#· !"#$% &"%’(%)* "$$% +,- .%" /, .& 中国药房 "$$%年第 %"卷第 &期 !基金项目：“九五”国家科技攻关基金项目（’&0’$(0$!0$!） ·实验研究· 醋酸烯诺孕酮稳定性试验的方法比较! 陈钟华，王莉华（中国药科大学药学院，南京市 "%$$$’） 中图分类号：1’") 2%% 文献标识码：3 文章编号：%$$%0$($#（"$$%）$&0$!"#0$" 摘要：目的：用两种不同方式的稳定性试验，考察醋酸烯诺孕酮的稳定性。方法：高效液相色谱法（色谱柱：145,-64 !%#，*!( 78， ( 2&(( 9 "*$((；流动相：甲醇 : 水 ; ) : !；检测波长："(!$(；流速：%(- <( #$）和薄层色谱法。结果：两者均能获得一致结果。结 论：所用方法适用于稳定性试验。 关键词：稳定性试验；高效液相色谱法；薄层色谱法；醋酸烯诺孕酮 !"#$%&’(’") *+,-++) .-" /+,0"1( "2 3,%4’5’,6 .+(, 2"& 7"&8+(,&’+)")+ 9:+,%,+ !=>/ ?",$@"A%，BC/D E#"A% F!,--4@4 ,G &"%’(%)*，!"#$% &"%’(%)4AH #)%- I $#64’5#H*，/%$J#$@ "%$$$’ K 9*3.;9!.：L3M>!N 7+>：N , ),(O%’4 P4HQ 44$ HQ , R#GG4’4$H (,R45 ,G 5H%P#-#H* H45H G,’ $,’@45H’#4$,$4 %)4H%H4 2S >N=L8T： =&E! F145,-64 !%# ),-A($，*!( 78，( 2&(( 9 "*$(( %5 G#U4R O"%54，% (#U HA’4 ,G (4H"%$,- %$R OA’#G #4R Q %H4’ F) : ! K %5 (,P#-4 O"%54，R4H4)H #$@ Q %64-4$@H" "(!$(，G -,Q ’%H4 %(- <( #$ K %$R N E! 21>TI EN T：N Q , H45H5 ,PH%#$4R H"4 5%(4 ’45A-H 2!L/!EI T7V L/：N "4 (4H",R5 A54R %’4 G4%5#P-4 G,’ 5H%P#-#H* H45H 2 <=> ?@;A3：5H%P#-#H* H45H；=&E!；N E!；$,’@45H’#4$,$4 %)4H%H4 醋酸烯诺孕酮的化学名称是 %&亚甲基 0 %)"乙酰氧基 0 %’ 0 去甲基 0孕甾 0 ( 0烯 0 !，"$二 酮，国外曾称 TN 0 %(!*，现名 /4V 5H,’,$4 ，其化学结构式如右图。 早在 %’&(年，我国学者为了 研究甾体新口服避孕药，首先创 制了此化合物，其后国外也合成此物并发现它经非胃肠道给药 可有效避孕，其硅橡胶皮下埋植剂已被开发为能有效避孕 "年 的缓释避孕剂 W% X。研究工作曾发现它被口服后能在肝脏内迅速 代谢失活，其埋植剂还被推荐为哺乳期妇女的理想避孕药。为 了保证用药安全有效，必须观察药物的稳定性，笔者按新药报 批的要求完成了醋酸烯诺孕酮的稳定性试验，此外还用高效液 相色谱法和薄层色谱法比较了两种不同方式的考察试验，即样 品在规定的受试条件下：（%）定期取样后即检测各项指标的变 化；（"）定期取样后，将受试品于低温密封保存，俟全部样品在 受试条件下受试完毕后，集中检测各项指标的变化。试验结果 表明，两种方式可得出一致结论。 ! 仪器与试剂 E! 0 %$ CN 泵，T8 0 %$C 检出器，! 0 1&C 数据处理器 （岛津）；145,-64 !%# 色谱柱（*!( 78，( 2&$( 9 "*$$(）；醋酸 烯诺孕酮供试品（批号：’)$!$%，仙居制药有限公司）；醋酸烯诺 孕酮对照品（批号：’)$&$%，仙居制药有限公司）；甲醇为色谱 纯；苯、无水乙醇均为分析纯。 " 实验部分 "B! 试液配制 " 2% 2% 供 =&E! 用：流动相：甲醇 : 水（)$ : !$）。供试品溶 液：$ 2"(@ < (-流动相用于归一化法；$ 2$&(@ < (-流动相用于 外标法。 " 2% 2" 供 N E! 用：展开剂：苯 : 无水乙醇（’ : %）。供试品溶 液：%$(@ <(-无水乙醇。 "B" 试验内容 " 2" 2% 影响因素试验：用 %批原料药摊成"*(( 厚，选（%）光 照（! $$$EU），（"）高温 &$Y，（!）高湿 )*Z（1=）为代表，平行 两份。按 "$$$年 )月 %日前的药品审评要求，一份于第 %、!、*、 %$天取样后即检测各项指标的变化；另一份于第 %、!、*天取 样后，置低温密封保存，于第 %$天全部取样结束后，集中检测 各项指标的变化。 " 2" 2" 加速试验：取模拟“上市”药品包装条件下的醋酸烯诺 孕酮原料药平行两份。在温度（&$ [ "）Y，相对湿度（)* [ *）Z 的条件下，放置 !个月。在试验期间，第 %个月、"个月、!个月 末各取样 %次即检测各项指标；另一份在第 %个月、"个月末取 样后即密封于低温贮存，俟第 !个月末全部取样结束后，集中 检测各项指标的变化。 " 2" 2! 检测项目：外观、色泽、分（降）解物含量。 " 2" 2( 考察方法：高效液相色谱法；薄层色谱法。 "B# 实验结果 影响因素试验和加速试验结果见表 %、表 "。 表 ! 影响因素试验（CDE!归一化法） 受试条件 天 即日检测 集中检测 Z 总杂质（Z） 归一化法（Z）总杂质（Z） \ ] ^^ 2_ ‘ab \ . ‘‘ c ^^ . a d]_ \ . cb ‘ ^^ . a]‘ \ . cb ]\ ^^ . a \ac \ . c^ 光 ] ^^ . a c^^ \ . ca ^^ . a cdc \ . ce c ^^ . ad] \ . cb ^^ . a d^a \ . ce ‘ ^^ . a\^ \ . c^ ^^ . a da] \ . ce ]\ ^^ . a d]] \ . cb ^^ . a d]c \ . ce 高温（a\Y） ] ^^ . a _]c \ . ca ^^ . a _d_ \ . ca c ^^ . a ]_^ \ . c^ ^^ . a d]] \ . cb ‘ ^^ . a ]ea \ . cb ^^ . a ]^] \ . cb ]\ ^^ . a dcc \ . cb ^^ . a ]^] \ . cb 高湿（e‘Z1=） ] ^^ . a __a \ . ca ^^ . a ]bc \ . cb c ^^ . a ]‘] \ . cb ^^ . a ]e‘ \ . cb ‘ ^^ . a]‘ \ . cb ^^ . a ]ce \ . c^ ]\ ^^ . ad_ \ . cb ^^ . a]_ \ . c^ # 讨论 取样后，密封降低温度至 $Y以下保存，目的是使反应速 度的影响至忽略不计，因此集中样品检测各项指标的变化期望 和按期取样即检测各项指标的变化得出一致结果。实验表明， 两种方式的检测结果一致。 L ; !=" L!L!=! !=! ! ;L 万方数据 中国药房 !""#年第 #!卷第 $期 !"#$% &"%’(%)* !""# +,- .#! /, .$ ·%!&· 藁本的抗血栓形成、利胆和抗溃疡作用! 张明发 #，沈雅琴 #，朱自平 !，王红武 !（# 0 上海美优制药厂，上海市 !"#’!%；! 0 陕西省中医药研究院中药所药 理室，西安市 (#"""%） 中图分类号：1&%；&$) 文献标识码：2 文章编号：#""#3"’"*（!""#）"$3"%!&3"! 摘要：目的：研究藁本的抗血栓形成、利胆和抗溃疡作用。方法：采用常规的胆汁分泌和溃疡模型以及电刺激麻醉动物颈动脉的体内 血栓形成模型。结果：给大鼠 #4（十二指肠给药）或 #5（灌胃给药）藁本醇提物 %5 6 75 和 #"5 6 75，促进大鼠胆汁分泌，延长电刺激颈动 脉血栓形成时间，但不延长凝血酶原时间、凝血时间和白陶土部分凝血活酶时间；给小鼠 #5)5 6 75 和 #)5 6 75，抑制水浸应激性溃 疡、盐酸性溃疡和吲哚美辛3乙醇性溃疡形成。结论：藁本具有抗血栓形成、利胆和抗溃疡作用。 关键词：藁本；抗血栓形成药；利胆药；抗溃疡药 !"#$%#&’()*(#$+，,&(-.’.#$+ /"0 !"#$%1-+.’(12 !+#$("2 (3 4&$5()/ 6$712#$+$ 89:/; < #$5=%，>9?/ @%A#$ B>"%$5"%# < C#*,D &"%’(%)CDE #)%- !, 0F E4，>"%$5"%# !"#’!% G 89H 8#I#$5，J:/; 9,$5K D BLCIE ,= &"%’(%),-,5* 0>"%$M # :)%4C(* ,= N ’%4#E #,$%- !"#$COC < C4#)#$C，P# Q %$ (#"""% G !89:4!,:：R2S?!N T+?：N , OED4* E"C %$E #3E"’,(U,E #)，)",-C’CE #) %$4 %$E #3D-)C’,DO %)E #,$O ,= 1"#V,(% F #5DOE #)# 0< ?N9RW L>：?MIC’#(C$EO K C’C )%’’#C4 ,DE ,$ ),$XC$E #,$%- (,4C-O ,= )",-C’CO#O %$4 D-)C’%E #,$，%$4 ,$ % E"’,(U,E #) (,4C- ,= DO#$5 4#’C)E )D’’C$E ),$E #$D,DO-* E, OE #(D-%EC E"C D$#-%EC’%- )%’,E #4 %’EC’* ,= %$COE"CE #) ’%E 01?>H FN >：:-),",-#) CM E’%)E ,= 1"#V,(% F #5DOE #)# %5 "C’U 6 75 %$4 #"5 "C’U 6 75 #4 ,’ #5，#$)’C%OC4 )",-C’CO#O %$4 I’,-,$5C4 E"C E #(C =,’ %’EC’#%- E"’,(U,O#O #$4D)C4 U* C-C)E’#) OE #(D-%E #,$ #$ ’%EO，UDE 4#4 $,E I’,-,$5C4 ),%5D-%E #XC E #(C，&N %$4 Y&N N 0N "C CM E’%)E )5 "C’U 6 75 %$4 #)5 "C’U 6 75 #5， #$"#U#EC4 E"C =,’(%E #,$ ,= 5%OE’#) D-)C’O #$4D)C4 U* K %EC’ #((C’O#,$，OE’COO，9!- %$4 #$4,(CE"%)#$3%-),",- #$ (#)C 0!R/!FHW >TR/：1"#V,(% F #5DOE #)# "%O %$E #3E"’,(U,E #) )",-C’CE #) %$4 %$E #3D-)C’,DO %)E #,$O 0 ;<= >?4@9：1"#V,(% F #5DOE #)#；%$E #3E"’,(U,E #)O；)",-C’CE #)O；%$E #3D-)C’%E #XC %5C$EO !基金项目：国家自然科学基金资助项目（%&%("*%*） 表 ! 加速试验（AB6,归一化法、外标法） 检测方式 受试条件 月 归一化法（Z） 外标法（Z） 即日检测 [\] \ ^^ . _ \‘_ ^^ . a[ 19b_Z a ^^ . [ ^cd ^^ . da \ a\\ a\\ . d d a\\ a\\ . a \ ^^ . c e‘[ ^^ . c_ e ^^ . c_c ^^ . ‘d 集中检测 [\] \ ^^ . c _\e ^^ . ‘_ 19b_Z a ^^ . c _‘‘ ^^ . [[ d ^^ . c _bd ^^ . b‘ e ^^ . c _^‘ ^^ . ‘d 集中检测各项指标具有不受外界客观条件影响的优点（如 时间的间隔，气温的变化，试剂的不同批号及其配制等），容易 满足分析上平行原则的要求，并提高了分析效果和增加了分析 结果的可比性，适用于影响因素试验及加速试验。 对长期试验，笔者认为可以采用二者相结合的方式进行。 !"""年版《中国药典》附录中新增了药物稳定性考察的指 导原则 f! g，对 #"天影响因素试验（#）删去了第 #天、第 %天的 检测要求，只需检测第 )天、第 #"天的各项指标；（!）删去了空 气中 #"天的检测试验；（%）对高温试验删去了 *"]试验，先进 行 $"]试验，若 $"]无明显变化，不再进行 ’"]试验；（’）对高 湿试验在相对湿度（&" h )）Z条件下，若吸湿增重 )Z以下，且 其他考察项目符合要求则不再进行相对湿度 ()Z的试验。对 加速试验只要求相对湿度 ()Z，控制温度 ’"]放置 $个月，删 去了 $"]的试验。在笔者长期积累进行稳定性考察的实践中， 认为《中国药典》!"""年版附录中增订的稳定性试验指导原则 对某些内容的删增是符合实际情况且更为合理，能够反映出药 物的稳定性和对有效期作出确切的判断 f% g。 参考文献： f# g > .L=%V + i>)"#%II%)%OOC < i&%XCV iCE %- .!-#$#)%- E’#%- K #W E" $COE,’,$C ODU4C’(%- ),$E’%)CIE #XC -(I-%$EO fS g .!,$W E’%)CIE #,$ i#&&) i)#：%% 0 f!g 中华人民共和国药典委员会 0 中国药典（二部）f> g 0!""" 年版 0 北京：化学工业出版社，!"""：附录 #&( 0 f% g 杨仲元 0 药品的杂质和稳定性试验 f S g 0 广东药学，!"""， #"（增刊）：#* 0 （收稿日期：!"""3#"3"* 修回日期：!""#3"’3#$ """""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""" ） 藁本系发散风寒药，临床主要用于风寒头痛、偏头痛和风 寒湿痹。药理实验已经证明了这些中医功效 f# g。然而，《药性论》 还有藁本“通血”的记载，《本草汇言》也曰：“藁本，升阳而发散 风湿，上通巅顶，下达肠胃之药也⋯⋯兼治风客于胃，久利不 止。”表明藁本还有其他方面的功效。笔者曾过藁本有良好 的抗腹泻作用和胃肠运动抑制作用 f# g。本文进一步探讨其消化 系统药理和抗血栓形成作用。 " 材料 藁本购自陕西省药材公司南院门中药店，经陕西省中医药 研究院中药所生药研究室鉴定为伞形科植物藁本 F#5DOE #)D( O#$C$OC ,-#X 的干燥根茎及根。将其碾碎，用 ()Z乙醇每天热回 流提取 *"，共 %次。提取液减压回收乙醇，在水浴上浓缩成 #5 生药 6( -，供实验用。(CI#’#V,-C 由日本三菱化成株式会社医药 研究所惠赠。吲哚美辛系西安长城制药厂产品，华法令 万方数据 醋酸烯诺孕酮稳定性试验的方法比较 作者： 陈钟华， 王莉华， Chen Zhonghua， WANG Lihua 作者单位： 中国药科大学药学院, 刊名： 中国药房 英文刊名： CHINA PHARMACY 年，卷(期)： 2001,12(6) 被引用次数： 2次 参考文献(3条) 1.S Dfaz V Schiappacasse M Pavez Clinical trial with nestorone subdermal contraceptive lmplants[外文期刊] 1995 2.中华人民共和国药典委员会 中国药典(二部) 2000 3.杨仲元 药品的杂质和稳定性试验 2000(z1) 本文读者也读过(6条) 1. 郑大贵.叶红德.叶青.刘锋.吴涛.ZHENG Da-gui.YE Hong-de.YE Qing.LIU Feng.WU Tao 异VC癸酸酯的合成和溶解度试验 [期刊]-化学试剂2007,29(3) 2. 张蜀.邓红.白海芬.林华庆.Zhang Shu.Deng Hong.Bai Hai-fen.Lin Hua-qing 醋酸烯诺孕酮微球中二氯甲烷残留的限量 检查[期刊论文]-中国现代药物应用2009,3(15) 3. 白海芬.张蜀.邓红.林华庆.BAI Hai-fen.ZHANG Shu.DENG Hong.LIN Hua-qing 高效液相色谱法测定醋酸烯诺孕酮微球含 量[期刊论文]-药学进展2009,33(5) 4. 杨清华.潘华先.王传栋.郈秀菊 顶空气相色谱法测定醋酸烯诺孕酮埋植剂中环氧乙烷的残留量[期刊论文]-山东生物医学 工程2003,22(2) 5. 胡红焱.邹德勇.崔云龙 对氧磷酶(Paraoxonase)的测定方法与临床意义[期刊论文]-国外医学（临床生物化学与检验学分 册）2001,22(2) 6. 孟志敏 甲砜霉素可溶性粉的稳定性试验和对鸡大肠杆菌病治疗的研究[学位论文]2006 引证文献(2条) 1.申素琪.蔡瑞芬.贾悦.崔毓桂.马鼎志.童建孙.王兴海.廖清江 醋酸烯诺孕酮的大鼠抗早孕活性试验[期刊论文]-生殖医学 杂志 2005(2) 2.白海芬.张蜀.邓红.林华庆 高效液相色谱法测定醋酸烯诺孕酮微球含量[期刊论文]-药学进展 2009(5) 本文链接：http://d.g.wanfangdata.com.cn/Periodical_zgyf200106003.aspx