14 分枝杆菌属

null第14章 分枝杆菌属 (Mycobacterium)第14章 分枝杆菌属 (Mycobacterium)陈 俊 温州医学院微免教研室分枝杆菌属特点分枝杆菌属特点形态：细长略弯曲的杆菌，有分枝生长的趋势 细胞壁含有大量脂类 染色：不易着色，加温或延长染色时间后着色，不易脱色，能抵抗盐酸酒精的脱色，又称抗酸杆菌（acid-fast bacilli) 引起疾病都呈慢性，并伴肉芽肿 种类：结核分枝杆菌 麻风分枝杆菌 非结核分枝杆菌第一节 结核分枝杆菌 M. tuberculosis第一节 结核分枝杆菌 M. tuberculosis 俗称结核杆菌（tubercle bacillus） 引起结核病，肺结核常见 结核病是危害人类健康的慢性传染病 null结核病是一种古老的疾病。从新石器时代人类的遗骨和古代木乃伊的骨关节的病理组织中，已发现人类在史前时代已患过结核病。 中国医史中，结核病最早记载于《内经》并形容为“虚痨”之症。古代文献有提及肺痨为痨虫于肺所致，但未能确定致病的成因。 null19世纪，结核病在欧洲和北美大肆流行，散布到社会的各个阶层，生活困顿的人群成了结核病的温床。而且是当时造成死亡的主要原因，被人们称为“巨大的白色瘟疫”。 许多当年杰出的人物罹患结核病：雪莱、肖邦、席勒、勃朗宁、梭罗、勃朗特姐妹等。结核病的流行甚至影响了诗人和艺术家的思想。 null德国科学家Robert Koch在1882年发现了一种特殊的微生物——结核杆菌，结核病的致病细菌。他还证明了这种微生物是可以在培养基里培养出来的。这一发现使得结核的实验研究成为现实。结核杆菌的发现结核杆菌的发现德国的细菌家罗伯特.科赫(Robert Koch)1882年发现世界上第一次发现了炭疽杆菌； 世界上第一次分离出伤寒杆菌； 世界上第一次发明了蒸汽杀菌法； 世界上第一次分离出结核病细菌； 世界上第一次发现了霍乱弧菌；世界结核病防治现状世界结核病防治现状自发现MTB以来，全球约有两亿人死于TB，且疫情发展日趋严重。 WHO已将TB作为重点控制的传染病之一，并于1995年起将每年的3月24日定为“世界防治结核病日”，以提醒公众加深对TB的认识。null据WHO预计，目前全球约20亿人已感染了TB。 全球现有TB病人2000万。 TB的死亡将达历史最高水平，全球每天有8000人死于TB，每年约300万人死于TB。特别是在发展中国家，TB的形势尤其严峻，全球98％的TB死亡和95％的新发TB都是在发展中国家。nullnullnull我国属于全球22个TB高负担国家之一，TB的患病人数在世界各国中居于第2位。我国TB的流行具有“五多一高”的特点： TB感染人数多。 现患肺TB病人多。 TB死亡人数多。 耐药TB人多。 农村TB人多。 传染性肺TB患者疫情居高不下。结核分枝杆菌结核分枝杆菌　　　　　　　　　 本菌可侵犯全身各组织器官，肺部感染最多见 结核的发病率和死亡率曾一度得到控制 艾滋病的流行及结核分枝杆菌耐药菌株等原因，结核病卷土重来 我国现在每年死于结核病的人约25万，仍是各类传染病之首一、生物学性状一、生物学性状1、形态染色 形态：细长略弯曲的杆菌 分枝状排列 无芽孢、鞭毛 可出现L型变异----抗酸阴性而G+颗粒 染色：胞壁含大量脂类（干重60%） 抗酸染色，染成红色，背景蓝色null acid-fast stain of mycobacteria结核杆菌结核杆菌 电镜图2、培养特性2、培养特性专性需氧 培养: 营养要求高，罗氏培养基 （馋） 温度：37℃，pH：6.5～6.8 生长：慢，繁殖一代需12～24h， 3～4周，可见粟米大菌落 （懒） 菌落：乳白色或黄色，干而粗糙，不透明， 呈菜花状 （怪） 液体培养基：表面生长（粗糙菌膜）null3、抵抗力3、抵抗力抵抗 抗干燥(尘埃8-10d、干燥痰6-8月） 抗酸碱（酸碱处理标本） 抗碱性染料（培养基加入抑制杂菌） 青霉素等抗生素 敏感： 湿热（煮沸） 紫外线 75％酒精（细胞壁中含有脂质） 抗痨药物4、变异性4、变异性可发生形态、菌落、毒力、免疫原性和耐药性的变异 如：毒力变异—BCG L型变异----形态变异，致病 耐药性变异（异烟肼）----染色体突变 目前多重耐药（MDR）流行——全球问题 卡介苗： 1908年，Calmette and Guerin 将牛型 结核杆菌在罗氏培养基中经13年传230代， 使其毒力变异获得的减毒株，二、致病性二、致病性1.致病物质: TB不产生任何内、外毒素以及侵袭酶,无菌毛； 致病性与菌体的胞壁成分、细菌增殖引起炎症反应、免疫病理损伤（IV）有关null致 病 物 质脂质脂肪酸（索状因子）：破坏线粒体，引起肉芽肿磷脂：形成结核结节及干酪样坏死 硫酸脑苷脂：抑制吞噬体与溶酶体结合 蜡质D：引起迟发性过敏反应蛋白质结核菌素，引起迟发性过敏反应多糖趋化中性粒细胞，引起局部细胞浸润荚膜黏附、抗吞噬传染源：开放性肺结核病人痰 入侵途径：呼吸道、消化道、损伤的皮肤黏膜传染源：开放性肺结核病人痰 入侵途径：呼吸道、消化道、损伤的皮肤黏膜2、所致疾病2、所致疾病引起多种脏器组织的结核病，肺结核为最多见 肺部感染 原发感染：外源性感染 儿童多见，无免疫力，炎症反应较轻，易扩散 原发后感染：外/内源性感染 成人多见，有免疫力，局部反应剧烈，易局限 肺外感染： 随血液、淋巴液播散， ----结核性脑膜炎、肾结核、肠结核、骨/关节结核原发感染原发感染 结核杆菌 ↓吸入 肺泡, 巨噬细胞吞噬 ↓脂质抗吞噬 繁殖后破坏巨噬细胞 ↓释放 炎症原发灶 经淋巴管扩散 ↓肺门淋巴结肿大 原发综合征 ↓ 纤维化 、钙化 但：病灶内仍有细菌潜伏 1.内源性感染的来源 2.维持机体免疫力 极少部分-----全身粟粒性结核或结脑null原发后感染 ：多见于成人 内源性—— 原发病灶内 外源性—— 重新感染 病灶多局限，形成结核结节、纤维化或干酪样坏死及空洞 干酪样坏死灶 纤维化、钙化 液化－－形成空洞 痊愈 －－开放性结核（传染性强）nullElongated epithelioid cells, which are transformed from macrophages, as well as a Langhans giant cell are shown here.null原发综合征null肺外感染： 1. 脑、肾、骨、关节、生殖器官等结核; 2. 肠结核、结核性腹膜炎等; 3. 皮肤结核。nullChest X-ray of severe pulmonary tuberculosis patient 三、免疫性和超敏反应三、免疫性和超敏反应1、免疫性： 抗结核免疫：细胞免疫为主，包括致敏T细胞和Mφ 有菌免疫或传染性免疫 产生免疫同时也产生迟发型超敏反应。 null2、超敏反应 细胞免疫与DTH共存：TB的蛋白质与蜡质D共同刺 激T淋巴细胞，形成DTH -----郭霍(koch)现象： 注射结核杆菌于豚鼠皮下 初次注射： 局部反应小，全身扩散，无免疫无DTH 再次注射： 局部反应大，不扩散，有免疫有DTHnull曾感染已痊愈豚鼠正常豚鼠24-48h10-14天局部红肿、浅溃疡局部红肿、深溃疡 不扩散， 脱落后自行愈合 （原发后感染） 经久不愈、 淋巴结肿大TB菌全身扩散 （原发感染）皮下koch现象3、结核菌素试验3、结核菌素试验定义：应用结核菌素进行皮试，以检测受试者对结核杆菌是否具有迟发型超敏反应和细胞免疫功能。 原理：迟发型超敏反应和细胞免疫同时存在 结核菌素：旧结核菌素(OT)、纯蛋白衍生物(PPD) 方法： 前臂皮内注射OT或PPD，48-72h观察。注意局部有无红肿、硬结，不能单独以红晕为标准。nullA TB skin test is typically performed on the forearm. After sterilizing the skin, a measured amount of PPD is injected intracutaneously.结核菌素试验结果结核菌素试验结果阳性：硬结红肿直径5～15mm之间,表明机体曾感染 过结核，或接种BCG成功，有特异性免疫力 强阳性：≧15mm，表明可能有活动性结核，应进一 步检查 阴性：<5mm,说明无结核杆菌感染、未接种过BCG。 但应排除下述情况： 原发感染的早期，尚未产生超敏反应； 正患严重结核病、其他传染病，机体丧失反应能力； 艾滋病等免疫功能低下者 使用免疫抑制剂； 老年人nullTuberculin test with positive reaction Within 48 to 72 hours, a positive TB skin test is marked by an area of reddish induration greater than 10 mm. It is the induration (firm bump) that is gently palpated that determines the size, not the area of redness. This reaction is slightly larger than the average positive test 17 mm in size. n null应用： ①诊断婴幼儿的结核病； ②测定接种卡介苗后免疫效果； ③在未接种卡介苗的人群作结核分枝杆菌 感染的流行病学调查； ④用于测定肿瘤患者的细胞免疫功能。3.结核菌素试验四、微生物学检查四、微生物学检查 1、标本取材：根据感染部位 ---痰、粪便、脑脊液、中段尿 2、标本处理：浓缩集菌处理（酸或碱） 3、直接涂片检查：抗酸染色 4、分离培养：培养基，培养3～4周 5、动物试验：豚鼠 6、快速诊断：PCR 7、药敏试验五、防治原则五、防治原则1、一般性预防：卫生宣传，提高免疫力 2、特异性预防: 接种卡介苗 接种对象： 新生儿及结核菌素试验阴性儿童 接种后可以维持约5年 2、治疗： 抗痨药物：链霉素、利福平、异烟肼 原则：早期、联用、适量、规律、全程 （联合用药，减少耐药菌株） 麻风分枝杆菌 (Mycobacterium.leprae) 麻风分枝杆菌 (Mycobacterium.leprae) 俗称麻风杆菌，引起麻风，是一种慢性传染病 流行广泛，主要分布在亚、非、拉丁美洲 形态与结核相似 接触传播（黏膜、飞沫） 瘤型和结核型生物学性状生物学性状形态、染色与结核分枝杆菌相似（成束、成团） 麻风分枝杆菌是一种典型胞内菌 麻风细胞(胞质泡沫状) 体外人工培养至今仍未成功 动物模型：犰狳 致病性与免疫性致病性与免疫性传播方式 呼吸道 接触 破损皮肤黏膜 发病慢, 病程长 麻风的免疫主要是靠细胞免疫 细菌主要侵犯外周神经、皮肤null病变：肉芽肿，麻风结节 临床表现：“狮面容”，病情严重，逐渐恶化。null第17章 其他细菌第17章 其他细菌第一节 棒状杆菌属第一节 棒状杆菌属G＋菌，菌体一端或两端彭大呈棒状而得名 菌体染色不均匀，出现节段浓染或异染颗粒 排列不规则，呈栅栏状，L/V形 无荚膜、无鞭毛、不产生芽胞 多为条件致病菌，只有白喉棒状杆菌是致病菌 白喉棒状杆菌白喉棒状杆菌人类白喉的病原体 白喉是一种急性传染病，其特征是咽喉形 成灰白色假膜假 膜一、生物学性状一、生物学性状1、形态染色 形态： 细长微弯，末端膨大呈棒状 排列不规则，呈V/L 染色 革兰染色阳性 Albert或Neisser染色：异染颗粒为蓝绿色－有鉴别意义革兰染色null白喉杆菌（X 1000)null1. 白喉棒状杆菌的形态学特征 异染颗粒 成分： 核糖核酸 + 多磷酸盐 作用： 储存养料、鉴定价值 2、培养特性2、培养特性需氧或兼性厌氧，营养要求较高 培养基：亚碲酸钾培养基 血平板/吕氏血清 黑色菌落 白色光滑突起菌落３、变异３、变异白喉棒状杆菌形态、菌落、毒力均可发生变异 无毒株 溶原性细菌（产生外毒素） 噬菌体4、抵抗力4、抵抗力抵抗力不强 湿热、消毒剂敏感 抗干燥和寒冷 药物 青霉素、红霉素敏感 二、致病性二、致病性1、致病物质--白喉毒素（最主要）: 只有携带β棒状杆菌噬菌体的溶原性白喉杆菌才能产生外毒素 成份：一种毒性强、具有高度抗原性的蛋白质 组成：由A、B两个亚单位组成。 A链－－毒性功能区，抑制易感细胞蛋白质的合成，细胞功能受损 B链－－无毒性，其功能是吸附于细胞膜上，以协助A链进入易感细胞内。 作用靶：心肌和神经细胞null２、索状因子　　细菌表面的一种毒性糖脂，破 坏哺乳动物细胞中的线粒体 ３、Ｋ抗原　　细胞壁外面的一种不耐热糖蛋 白，利于细菌的定植 所致疾病 白喉--急性呼吸道传染病所致疾病 白喉--急性呼吸道传染病传染源：患者及带菌者 传播途径：飞沫或污染物品，儿童最易感 临床表现 细菌-----上呼吸道粘膜，生长繁殖，产生毒素 细菌与毒素共同作用引起局部症状： 炎症，坏死，纤维蛋白渗出 假膜——窒息 毒素入血引起全身中毒症状 外周N---N炎： 膈肌麻痹--呼吸困难 声带麻痹--声音嘶哑 软颌麻痹--吞咽困难 心肌---心肌炎null咽部白喉咽部白色伪膜三、免疫性三、免疫性感染后机体可获得牢固的免疫力 体液免疫：白喉抗毒素阻止B亚单位与易感细胞结合 机体还可通过其它方式获得免疫力： 六月以下婴儿------母亲 成人--------------隐性感染、疫苗四、微生物学检查四、微生物学检查 标本：棉签采取假膜边缘分泌物 直接涂片: 菌体颜色、菌体排列、异染颗粒 结合临床症状可做初步诊断 分离培养: 亚碲酸钾培养基-------白喉杆菌为黑色菌落。 毒力鉴定:（鉴别产毒棒状杆菌和其他棒状杆菌的重要方法） 体内法 体外法五、防治原则五、防治原则1、预防： 人工自动免疫 类毒素（白百破三联疫苗） 人工被动免疫 对易感儿童注射抗毒素紧急预防，同时用类毒素延长免疫力 2、治疗 抗毒素：要早期、足量注射白喉抗毒素。 抗生素： 青霉素或红霉素，预防继发感染贝林发现白喉抗毒素贝林发现白喉抗毒素1901年首届诺贝尔生理学和医学奖授予了德国细菌学家Emil.von.Behring，表彰他在发现白喉抗毒素方面，为人类医学事业作出的杰出贡献 以毒攻毒 豚鼠身上注射白喉杆菌 挽救儿童 白喉抗毒素大量提纯，成为救世良方