“红脸颊”草莓组培快繁技术研究

“红脸颊”草莓组培快繁技术研究 “红脸颊”草莓组培快繁技术研究 科农2林!天I地 "红脸颊"草莓组培快繁技术研究 李彩华刘玲艳 (黑龙江省香坊实验农场组培中心,黑龙江哈尔滨150038) 摘要:以"红脸颊"草莓为试材,对草莓匍匐茎茎尖生长点进行组织培养,筛选出适合 "红脸颊"草莓诱导分化培养基为MS+BA1?0mg/L+NAA O.O5lT,继代增殖培养基为MS+BA1.0mg/L+IBA0.1m~CL,生根培养基为1/2MS+NAA0.5mg,L+白砂糖15g/L. ;红脸颊;茎尖生长点;组培快繁 关键词:草莓 草莓(FragariaananassaDuchesen)是蔷薇 科,草莓属多年生的浆果植物,其果实鲜美,营 养丰富.目前,草莓种苗的繁殖方法主要有葡萄 茎繁殖和分株繁殖I】1,草莓葡萄茎繁殖系数较低 且多带病毒苗,导致草莓品种退化,产量,质量 下降.利用草莓微茎尖(O.2—0.5mm)脱毒结合组 织培养快繁技术培育出的草莓组培苗,可部分 或全部脱除病毒,使品种的优良性状得以保持, 产量提高121. "红脸颊"是日本静冈县农业试验场以章 姬和幸香杂交获得的草莓品种,1999年命名,之 后引人我国.该品种具有生长势强,果大,果面 及果肉鲜红色,甜酸适口,品质优,产量高,耐贮 运,中等抗病性等特点,深受广大栽培者的喜 爱.为使"红脸颊"草莓得到进一步的推广应用, 我们对这一品种进行了组培研究,为逐步建立 稳定的高频再生系统,实现脱毒草莓工厂化育 苗,规模化生产提供技术支持. l材料和方法 1.1材料 材料于2006年选自黑龙江省香坊实验农 场草莓繁育基地,为7,8月份的匍匐茎茎尖. 1.2方法 取11.5cm长的匍匐茎茎尖,用流水冲洗 3090min.先用75%酒精消毒30s,再用无菌 水冲洗3,5次,然后用0.1%的升汞处理8一 IOmin.最后用无菌水冲洗5,6次.在超净工作 台上剥取0.5mm的草莓茎尖生长点,接人诱导 分化培养基中. 以Ms为基本培养基,加蔗糖30g/L,琼脂 6g/L,PH5.8.培养室温度为(25?1)?,光照强度 150020001ux.光照时间每天12h.诱导培养基 为MS+BA0.5,1.5mg/L+NAA0.O1,O.1mg/L;继 代增殖培养基为MS+BA1,0mg/L+IBA0.O1, 0.15mg/L;生根培养基为MS,1/4MS, l/2MS+NAAO.5mgL,1/2MS+NAA0.1mg,L. 2结果和讨论 2.1茎尖的诱导分化培养 在如表1所示的试验中,每处理接种4O 瓶材料(1瓶接1个芽生长点),重复实验3次. 在接种45d后统计萌芽率(不计污染瓶数). 计算公式为:萌芽率(%)=发生萌芽的外 植体数/接种的外植体数×100% 从表1中分析得出:各处理组对"红脸颊" 草莓茎尖都能诱导出芽,从NAA的浓度影响来 看,最适浓度为O.O5,当浓度过高时,萌芽率减 少,当NAA浓度为O.O5时,添加BA的浓度为 1.0mg/L时,芽的诱导率最高,为78.3%.但从诱 导的试管苗来看,后一组的试管苗叶片出现了 畸形,叶柄变脆,芽丛呈莲座状,是由于激素浓度 过高所致.由此可见,"红脸颊"草莓茎尖诱导 的培养基为MS+BA1.0mg/L+NAA0.0Smg/L. 在诱导分化培养过程中发现,接人培养基 的茎尖生长点太细小或剥取操作时间过长,都 易死亡,接材较大易成活,但脱毒草效果差.故剥 接茎尖时,需经多次试验,接人的茎尖生长点在 可以成活的前提下越小越好. 表1BA与NAA对"红脸颊"草莓茎尖 诱导分化的影响 2.2继代培养 将诱导出的健壮试管苗转接到继代培养 基上,每组培养基转接1O瓶,每瓶接苗3株,培 养25天后调查芽的增殖情况,结果如表2所 示: 表2BA和IBA对久久草莓继代增殖的影响 从表中可看出,在MS培养基添加4种I_ BA浓度中,以浓度为O.1m~CL芽的增殖系数最 高,浓度再增加增殖系数反而降低.增殖系数最 高的是MS+BA1.0+IBA0.1m~CL,增殖系数为 4.73,且丛生苗的叶色浓绿,生长健壮. 在继代培养过程中发现,以每株带4—5 个芽为一簇的方式 进行转接增殖速度 快,可缩短培养周 期;单株苗转接增 殖缓慢,不利于快 速繁殖. 2-3试管苗的 生根培养 将生长健壮, 苗高2—3cm的试 管苗移到生根培养 基中进行生根对比, 25d后调查生根 率,结果见表3.从 表3看出.在MS, 1/4MS, 1/2MS+NAA0.05mg/ L,1/2MS+NAA0.1m~CL培养基都可诱导生根,但 以1/2MS+NAA0.05mg/L+糖15mg/L为佳,生根 率可达98.6%,且根粗壮,单株生根6—7条. 表3不同培养基对草莓生根的影响 平均报数(幕 2.4练苗移栽 打开生根试管苗瓶口,温室内放置2—3 天.取出洗净根上的培养基,移栽到2,3腐殖土 加1/3河沙的炼苗基质上,温度保持在15— 25?.相对湿度85%,90%,适当遮荫,后期逐渐 通风增加光照,2—3周后,移栽到田问,成活率 达98%. 3小结 草莓"红脸颊"茎尖组织培养,诱导产生不 定芽的培养基为MS+6一BA1. Omg/L+NAA0.05mg/L,继代增殖培养基为 MS+6一BA1.0mg/L+IBA0.1ragE,,生根培养培养 基为1/2MS+NAA0.05+白砂糖15g/L,生根率 可达98.6%.试管苗移栽宜选用2/3腐殖土加 1/3河沙的炼苗基质,成活率达98%且根粗壮, 无缓苗期,生长健壮.只要精心管理,移栽后4 个月即可开花结果. 参考文献 „赵佐敏,唐红.草莓组织培养及产业化应用 初步研究『J1.种子,2002(5):56—58. 【2】知道什么是草莓组培脱毒原种苗吗[J】.新农 业,2000(4):2O. 【3】张志宏等.图说草莓棚室高效栽培关键技术 『M1.北京:金盾出版社,2006,3. [4】陈世昌.植物组织培养[M】.重庆:重庆大学出 版社,2oo6,8. 一 138一