高效液相色谱法测定百消毒解颗粒中甘草酸的含量

高效液相色谱法测定百消毒解颗粒中甘草酸的含量 高效液相色谱法测定百消毒解颗粒中甘草 酸的含量 国际医药卫生导报2006年第12卷第22期(半月刊) 高效液相色谱法测定百消毒解颗粒中甘草酸的含量 李守富 北京强寿新医药开发中心北京100000 摘要目的建立一种高效液相色谱法测定百消毒解颗粒中甘草酸的含量,探讨本品的质量控制方法.方法色谱柱 Cl8ODS柱(3.9mmx150mm);流动相以甲醇一水一冰醋酸(60:40:5);波长256nm;室温20?左右;流量lml/min. 结果回收率平均值为l01.3%,RSD为2.68%.结论本方法快速,重现性和稳定性好,可用于百消毒解颗粒的质量控 制. 关键词百消解毒颗粒甘草酸含量测定HPLC法 中图分类号:R284.1文献标识码:A文章编号:1007一l245(2006)22—0074—02 百消毒解颗粒为中药复方制剂,具有清热解毒,消肿散 结,止咳化痰.用于热毒蕴结所致的疮疖肿毒,肺热咳嗽等病 症.现代医学中的疖病,皮肤疮疡及急性支气管炎,气管炎见 上述症侯者.甘草在本品中为君药.故以其有效成分甘草酸 (Glycyrrhizicacid)为指标成分进行测定.方法如下; 1仪器和试药与试验样品 高效液相色谱仪Waters公司制造.带730数据处理机,480 紫外可见光柃测器:甲醇为色谱纯,冰醋酸为纯;对照品 甘草酸单铵盐购自II】国药品生物制品检定所.经制备色谱柱纯 化后,含量98%以上,符合中药化学对照品含量限度要求.试 验样品由广西强寿药业集团有限公司生产提供. 2方法与结果 2.1色谱条件色谱柱C.ODS柱(3.9mm×150mm); 流动相以甲醇一水一冰醋酸(60:40:5);检测波长256nm:室 温20?左右.流量lml/min.理论板数按甘草酸单铵盐峰计算, 应不低于6000.在此条件下,甘草酸与其它相关峰均能达到基 线分离. 2.2线性关系考察精密吸取对照品溶液(0.4mg/m1) 1ul,5ul,10u1,20u1,30ul,40ul,进样澳9定, 结果,见l. 表1线性关系考察结果 Y=2389.7x_34.7r=0.9999 结果表明,对照品在0.4~16ug范围内,具有良好的线性 关系. 2.3对照品溶液的制备精密称取甘草酸单铵盐对照品 lOmg,置25ml量瓶中,加lOml甲醇溶解后,再加水稀释至刻 74 度,摇匀,即得(每lml中含甘草酸单铵盐0.4FIIg). 2.4供试品溶液的制各取本品20g,研细,精密称取 0.5g,置具塞锥形瓶中,加水20ml(每10ml水中..加2滴 INNHOH),超声处理40分钟,离心5分钟(3000转/分钟),分 离提取液,再用上述滴有氨水的蒸馏水洗药渣两次,将提取液 和洗涤液一并转移到50ml量瓶中,再加水到刻度. 2.5测定方法分别精密吸取对照品溶液5ul与供试品 溶液25ul,注入液相色谱仪测定,按外标法计算,本品按干燥 品计,含甘草酸以草酸单铵盐CHNO.计,即得 2.6精密度试验精密吸取供试品溶液,连续进样6次, 每次20ul,6次峰面积值的相对偏差<2%.结果见表2. 表2精密度试验结果 2.7重复性试验精密称取批号为040219的样品6份, 按"供试品溶液制各"制各样品溶液,进样测定,相对偏差<2%, 结果见表3. 表3重复性试验结果 2.8稳定性试验按"供试品溶液制备"制各样品溶液, 按下列时问问隔进样,结果见表4. 国际医药卫生导报2005年第12卷第22期(半月刊) 表5回收率测定结果 结果测得回收率平均值为101.3%. 表4测定方法稳定性试验 结果表明,样品在5个小时内测定是比较稳定的. 2.9加样回收率试验取百消毒解颗粒(批号040219含 甘草酸单铵盐0.93%)6份,重量分别为0.2449g,0.2588g,0. 2702g,0.2785g,0.2825g,0.2773g,采用加样回收法,将甘 草酸单铵盐对照品溶液,加入到颗粒剂中,再按供试品溶液制 备方法,超声提取,用HPLC测定,按下式计算回收率,结果见 表5. 测出的甘草酸量一供试品中甘草酸量 回收率=——×100% 添加的甘草酸量 2.10样品中甘草酸含量测定分别精密吸取对照品溶 液51,供试品溶液251,进样测定,按外标法计算含量. 结果见表6. 表6成品含量测定结果 根据上述结果,本品含甘草酸(以甘草酸单铵盐计)不得 少于0.60%. 3讨论 3.1本方法简便,快速,重现性和稳定性好,适合于百 消毒解颗粒的含量测定. 3.2甘草酸的定量分析,文献上报道的方法很多,有电 化学法,比色法,光度法,薄层扫描法,气相色谱法和液相色 谱法等.而当前用得较多的还是高效液相色谱法.色谱条件, 一 般多用反相柱,流动相为甲醇一水一冰醋酸,本法亦如此. 参考文献 [1】李章万,等.甘草及其制剂中甘草酸含量的高效液相色谱测 定法[J】.华西药学杂志,1990,5(1):19 [2】2吕归宝,等.高效液相色谱法测定甘草及其制剂中甘草酸含 量[J】.药物分析杂志,1998,8【3):137 【3】刘世端,等.反相离子对高效液相色谱法测定甘草及其制剂 中甘草酸含量[J】.华西医科大学,1993,24【1):111 [4】粱月琴,等.用高效液相色谱法测定甘草及其制剂中甘草酸 含量[J】.军事医学科学院院报,1997,21(3):214 [5】王文彤,等.复方益寿胶囊中甘草酸的定量测定方法[J】.天 津医学,1997,9(1):71 [6】王荣,等.甘草复方制剂中甘草酸含量的HPLC~定研究[J】. 中国药学杂志,1996,31(9):548 收稿日期:2006—0927 75