淡竹叶及其水煎剂中氨基酸和微量元素的含量分析

� 淡竹叶及其水煎剂中氨基酸和微量元素的含量分析 王微宏1, 范俊源1 , 周春山2 ( 1.中南大学湘雅医学院化学教研室,长沙 410078; 2.中南大学化学化工学院,长沙 410083) [关键词] � 淡竹叶; � 氨基酸; � 微量元素; � 水煎剂 [中图分类号] � R284�2 � � � [文献标识码] � B � � � [文章编号] � 1000�5625( 2002) 03�0291�02 � � 淡竹叶( Lophatherum gracile Brongn)为禾本科淡竹叶属植 物,在我国分布较广, 茎叶可入药, 具有清热、利尿、生津、止 渴等功效[ 1]。在食品工业上已研制了淡竹叶天然保健饮 料[2]。据报道, 淡竹叶中含有萜类、蒲公英甾醇、酚性成分、 有机酸、氨基酸、糖类等[3, 4] , 但淡竹叶及其水煎剂中氨基酸 和微量元素含量的全面分析未见文献报道。本研究对其进 行了系统分析,报道如下。 1 � 材料与方法 1. 1� 材料 � ( 1)药物: 淡竹叶购于长沙市金沙大药房, 产地 湖南。取适量淡竹叶用双蒸水洗净, 稍阴干, 置电热干燥箱 中 60 烘干至恒重, 备用。( 2)试剂: 浓HCl和浓HNO3 均为 优级纯(衡阳江东化学试剂厂生产) , 邻苯二甲醛(瑞士 Fluka 公司生产) ,氨基酸品(美国 � 公司提供) ,均为色谱纯。 ( 3)仪器:日本岛津 LC�6A型高效液相色谱仪, 岛津 RF�530 型 荧光检测器,岛津 AA�680型原子吸收分光光度计和 GFA�4B 型石墨炉。 1. 2� 方法 1. 2. 1 � 淡竹叶水煎剂的制备 � 准确称取 5. 0g 淡竹叶样品, 稍剪碎, 加入 50ml双蒸水, 煎煮 40min, 过滤得第一煎; 残渣 加入 40ml双蒸水, 煎煮 30min, 过滤得第二煎。残渣再加适 量双蒸水洗涤,洗液与前两煎合并且定容至 100. 0ml,备用。 1. 2. 2 � 氨基酸样品溶液的制备 � ( 1)生品: 将样品在玛瑙研 钵中捣碎研细后, 称取 100. 0mg 于 10ml 安培瓶中, 加入 5N HCl 10ml, 用氮气赶尽瓶内空气后封口, 置 110 烘箱中水解 24h, 冷却后过滤并定容。取滤液 0. 50ml真空抽干后, 加入 2ml流动相 A液混匀后过滤[ 5]备用。( 2)水煎剂: 取 5ml水煎 剂加入 5ml浓HCl, 水解方法同生品。 1. 2. 3 � 微量元素样液的制备 � ( 1)生品: 取上述备用样, 按 文献[ 5]方法制备。( 2)水煎剂: 取 20. 0ml水煎剂, 加 5ml优质 纯浓 HNO3 在电热板上低温加热浓缩至约 5ml, 冷却后再加 15ml浓 HNO3 , 低温加热,消化至约 5ml。后续过程同生品的 处理方法。 1. 2. 4 � 测定方法 � 氨基酸含量的测定采用高效液相色谱 仪,用邻苯二甲醛衍生化高效液相色谱法[ 6]。取上述样品液 5�l加100�l邻苯二甲醛衍生 1min, 取5�l溶液进样。Nova�pak C18柱, 荧光检测器检测 ,激发波长 338nm, 发射波长 425nm, 用外标法定量, 色谱图如附图。微量元素 Cu, Fe, Zn, Mn 及 Mg分析采用火焰原子吸收法[5] ; Pb, Cr, Cd 采用石墨炉原子 吸收法测定[5]。 附图 � 标准品( A)、生品( B) 和水煎剂( C) 的液相色谱图 � 峰: 1 ~ 15为 15种氨基酸,其余的为杂质峰 Fig. � HPLC pictures of standard sample( A) , raw sample( B) and de� coction( C) � Peaks: 1~ 15 are 15 kinds of amino acids, the or� thers are impurity 291 湖南医科大学学报 BULL HUNAN MED UNIV � 2002, 27(3) � 收稿日期: 2002�03�15 � 作者简介:王微宏( 1965�) ,男,湖南衡阳人,讲师,主要从事天然药物化学成份研究 2 � 结 � � 果 2. 1� 淡竹叶生品及水煎剂中氨基酸的含量 � 结果见 1。 表 1 � 淡竹叶生品及水煎剂中氨基酸的含量( mg!g- 1) 氨基酸 � � 生品 水煎剂 必需氨基酸 生品 水煎剂 天门冬氨酸 20. 66 1. 80 苏氨酸 � � 8. 26 0. 44 谷氨酸 � � 24. 64 1. 20 蛋氨酸 � � 1. 63 0. 14 丝氨酸 � � 11. 31 0. 55 缬氨酸 � � 12. 31 0. 46 组氨酸 � � 4. 35 0. 12 苯丙氨酸 � 10. 81 0. 38 甘氨酸 � � 15. 12 0. 42 异亮氨酸 � 9. 32 0. 16 精氨酸 � � 10. 94 1. 18 亮氨酸 � � 16. 99 0. 36 丙氨酸 � � 12. 51 0. 29 赖氨酸 � � 8. 37 0. 24 酪氨酸 � � 5. 01 0. 51 2. 2� 淡竹叶中 8 种微量元素的含量 � 结果见表 2。 表 2 � 淡竹叶生品及水煎剂中微量元素的含量(�g!g - 1) 元素 Cu Mn Fe Zn Cr Mg Pb Cd 生品 8. 95 464 384 49. 5 9. 28 2054 1. 18 0. 66 水煎剂 1. 24 173. 6 44 10. 78 0. 68 1252 - - 煎出率( % ) 13. 85 37. 41 11. 46 21. 78 7. 33 60. 95 - - � � 表中∀ - #指未检出 3 � 讨 � � 论 从测定的结果可知,淡竹叶中含有 15 种氨基酸, 其中天 门冬氨酸和谷氨酸含量较高。在检出的氨基酸中, 有 7 种人 体必需氨基酸。每 1g生品中氨基酸总量为 172. 33mg , 必需 氨基酸总量达 67. 69 mg , 占氨基酸总量的 39. 3% , 水煎剂中 必需氨基酸占氨基酸总量的 26. 2%。含量较高的谷氨酸(占 氨基酸总量的 14. 3% )具有促进红细胞生成、改善脑细胞营 养及活跃思维等作用,是治疗神经衰弱和记忆力减退的有效 成分, 也是很好的胃酸调节剂[ 7]。在测定的 8 种微量元素 中,镁、锰、铁和锌的含量较高, 而有毒元素铅和镉的含量很 低,且在水煎剂中未检出。每 1g 生品中微量元素的含量顺 序为:Mg> Mn> Fe> Zn> Cr> Cu> Pb> Cd;水煎剂中,微量元 素的含量顺序为: Mg> Mn> Fe> Zn> Cu> Cr。由表 2 可知, 微量元素在水煎剂中损失较多, 但镁、锰、铁、锌等元素在水 煎剂中的煎出率较高。锰是多种酶的激活剂, 被认为是一种 抗癌元素,特别是与肝癌的发病有密切关系[8]。锌是人体生 长发育的促进剂[8] , 有促筋益精生血的功效, 可参与核酸与 蛋白质的代谢过程[9]。铁是人体内最丰富的微量元素,主要 以铁蛋白存在于人体内,缺铁后血红蛋白减少, 发生贫血, 易 疲劳,注意力不集中等症状。本实验从水煎剂中未检出有毒 元素 Pb 和 Cd。因此, 用淡竹叶研制保健饮料是很有价值的。 参考文献: [1] � 中国药科大学等主编.中药辞海[ M] .第 3卷,北京:中国医药科 技出版社, 1997. 594. [2] � 卢益中.淡竹叶天然保健饮料的研制[ J ] . 食品工业科技, 1998, 19( 4) : 48- 50. [3] � 江苏省植物研究所等.新华本草纲要(第 3册) [ M ] .上海:上海 科学技术出版社, 1990. 513. [4] � ∃全国中草药汇编%编写组编. 全国中草药汇编( 上册) [M ] . 北 京:人民卫生出版社, 1994. 751. [5] � 邓世林,周晓娟,李新凤,等.绞股蓝中氨基酸、维生素及多种化 学元素的分析[ J] .湖南医科大学学报, 1994, 19(6) : 487- 489. [6] � 叶淮泠.邻苯二甲醛衍生化高效液相色谱法分析脑氨基酸[ J ] . 生理学报, 1988, 40( 3) : 308- 313. [7] � 吴启南,王立新,吴德康,等.合子草中氨基酸及无机元素成分 分析[ J] .时珍国药研究, 1996, 7( 4) : 204- 205. [8] � 吴沈春. 环境与健康 [ M] . 北京: 人民卫生出版社, 1982. 39- 102. [9] � 夏献民,于树玉.硒的抗癌机制的研究- 对酵解及有关酶的影 响[ J] .中华肿瘤杂志, 1987, 9( 4) : 255- 257. (本文编辑 � 陈扬宝) 292 湖南医科大学学报, 2002, 27( 3)