题目:机体免疫功能测定的指标
汇报要点:
简要回顾免疫应答、免疫系统及其功能
简略介绍相关免疫技术
汇报重点:
实际需求不同,采用不同的测定
综合多项指标,分析机体的免疫功能
报告人:刘娜
*注:引自immunology
基本功能 生理性反应 病理性反应
免疫防御 清除病源微生物及其他抗原
超敏反应
免疫缺陷病
免疫自稳 清除损伤细胞或衰老的细胞 自身免疫病
免疫监视 清除突变或畸变的恶性细胞 恶性肿瘤
回顾:Ⅰ.免疫系统的功能
回顾: Ⅱ.免疫应答(1)
*注:细胞因子:细胞间信号传递分子,具有高活性、多功能等特点。
回顾: Ⅱ.免疫应答(2)
*注:天然免疫应答:在获得性免疫应答发挥作用之前,控
制病原微生物不能迅速扩散,并使感染不成功。
回顾: Ⅱ.免疫应答(3)
回顾: Ⅲ.免疫系统的组成
*注:引自immunology
其中:血液中T细胞约占75%,脾脏中B细胞约占65%
(据杨汉春《动物免疫学》P76)
概要:反映机体免疫功能的指标
*注:后三者在兽医科研实践中运用较少
其中兽医科研实践中常用的指标是:IgG, IgM, IgA水平以及
CD3+ T, CD4+ T, CD8+ T亚群和 CD4+ / CD8+ 比值。
指标 方法
体液免疫 抗体效价 IgG, IgM, IgA, 间接ELISA法
抗体形成细胞数目 溶血空斑实验,转化试验
细胞免疫 T细胞总数 活性EA花环,Et花环;转化试验
T细胞亚群 CD4+ T, CD8+ T, CD4+ / CD8+ , CD3+ T
效应分子* IFN-γ,IL-4;基因
达水平
非特异性
免疫
NK细胞* 颗粒酶、FasL基因表达水平
吞噬细胞* 吞噬实验
• 敏感性:真阳性/(真阳性+假阴性)×100%
• 特异性:真阴性/(真阴性+假阳性)×100%
*注: 不同的资料数值有出入,仅供参考。据杨汉春《动物免疫学》P281)
• 淋巴细胞的准备:
测定方法 敏感性(μg/ml)
间接凝集试验 0.005
化学发光标记技术
0.0001 放射免疫测定
病毒中和试验 0.01
Ⅰ.体液免疫相关(一): 抗体效价
直接血凝试验
病毒的血凝抑制试验
间接ELISA:
回顾:免疫球蛋白
抗体类别 IgG IgM IgA IgE IgD
重链亚类 4个亚类 - -
单体数 1 5 1,2 1 1
抗原结合价 2 5~10 2 2 2
占血清Ig总量% 75~80 5~10 10~20 0.008 0.3
血清半衰期(d) 23 5 6 2.8 2.8
穿过胎盘 √ - - - -
主要功能 主动免疫主
要抗体
初次免疫
最早产生
粘膜免疫 介导Ⅰ型
过敏反应
免疫记忆
免
疫
学
功
能
裂解细菌能力 + +++ + ? ?
抗病毒能力 + + +++ ? ?
粒细胞脱颗粒 ? - - ++++ -
其他 固定补体
,与SPA结合
溶菌,溶血,
固定补体
激活补体
旁路
成熟B细
胞表面Ig
*注:参考杨汉春《动物免疫学》P46
若测得体内IgG
模板 (至少7
个梯度)
3.做出直线相关回归方程,
计算基因表达水平
• (表达方法:竞争模板基
准值的倍数)
指标:免疫效应细胞颗粒酶、FasL基因表达水平
判断:NK细胞、CTL细胞活性
Ⅴ.案例:肺癌患者免疫状态的综合评价
• 理论分析:抗癌效应主要通过内源性细胞免疫来实现,肿瘤细胞对患者免疫
功能具有抑制作用
• 指标变化:运用流式细胞仪,对189例肺癌患者外周血中免疫细胞进行检测
*注:
选自杨辉《肺癌患者免疫状态的综合评价及化疗对其免疫状态的影响》(2006年)
细胞百分数 CD4+ ↓ CD8+ ↑ CD3+ ↓ NK细胞↓
分析: 肿瘤细胞产生免疫抑制因子,使TH↓,Ts↑
活性T细胞*
IFN-γ↓IL-4↑抑制性调节细胞↑CTL↓活化T细胞↓
分析: 肿瘤细胞抑制抗肿瘤免疫,TH1/TH2偏移,TH2极化
细胞毒作用 颗粒酶\FasL↓
分析: NK细胞、CTL细胞毒作用的杀伤分子
抑制性调节细胞 CTL 活化T细胞
检测 CD4+
CD25+
CD8+ CD28+ CD3+
HLA-DR+
Ⅵ.小结:
免疫
免疫系统:免疫应答的基础
实际情况不同,采用不同的测定方法
综合多项指标,分析机体的免疫功能
识别 自身or非自身
清除 非自身的大分子物质
平衡 机体内外环境
.主要参考资料
动物免疫学实验教程,郭鑫主编,中国农业大学出版社,
2007年3月
动物免疫学(第二版),杨汉春主编,中国农业大学出版
社,2008年2月
肺癌患者免疫状态的综合评价及化疗对其免疫状态的影响
,杨辉,中国人民解放军军事医学科学院,2006年硕士学
位
国家精品课程资源网, http://www.jingpinke.com/