腰椎退变黄韧带中炎性细胞因子的表达及临床意义道

腰椎退变黄韧带中炎性细胞因子的表达及临床意义道 内蒙古医学院 硕士学位论文腰椎退变黄韧带中炎性细胞因子的表达及临床意义 姓名:李强 申请学位级别:硕士 专业:外科学 指导教师:赵建民车凤义 20100501 。 中 文 摘 要 目的探讨黄韧带退变与炎性细胞因子表达的关系及临床意义。方法收集术前通过,,、,,，影像学资料证明有黄韧带肥厚并行后路椎板切除减压治疗的患者黄韧带标本,,例(退变组)及正常对照,,例(正常组)取自脊柱外伤行后路手术治疗的青年患者。将黄韧带标本做病理切片，采用苏木精伊红(,,)染色，应用光学显微镜观察病理学改变，并用免疫组化技术观察黄韧带标本，,一,、，,一,(,,,—,的表达情况。结果正常黄韧带中，,一,、，,,,、,,,,—,低表达或不表达，弹力纤维呈波浪状，排列，弹力纤维间可见少量的胶原纤维和散在的成纤维细胞。退变黄韧带中胞浆或胞核中，，,—,、，，,,,、,,,—,高表达，弹力纤维明显减少、断裂且分布不规则，胶原纤维则增多，并且伴软骨细胞、成纤维细胞、毛细血管的增生。结论?，,一,、，,一,、,,,—,等参与调控的慢性炎症是黄韧带退变的原因之一。 关键词黄韧带炎性细胞因子表达 凼蓥直匿堂瞳亟?查壁塞生堂焦迨塞(垫～,垒, ,,, ,,,,,,,,,, ,, ,,,,,,,,,,,, ;,,,,,,, ,, ,,,,,,,,,,,, ,, ,,, ,,,,,,,,,, ,,,,,, ,, ,,,,,, ,,,,,,,,, ,,, ;,,,,;,, ,,,,,,,;,,;, ,,,,,,;, ,,,,;,,,, ,, ,,,;,,, ,,, ,,,, ,,, ,,,,,,,,, ,,,,,,, ,,,,,,,,,,,, ,, ,,,,, ,,,,,, ,,,,,,,,,,,,,,, ;,,,,,,, ,,, ;,,,,;,, ,,,,,,,;,,;,(,,,,,,, ,, ;,,,,;, ,,,,, ,,,,,,,,,,, ,, ,,,,,,,,,,, ,,,,,, ,,,,,,, ,,,;, ,,,, ,,,,,, ,, ,, ,,, ,,， ,,,,?,,,,,,, ,,, ,,, ,,,,,,, ,,,,,,,,,,,, ,, ,,,,,,,,, ,,,,,,;,,,,，,,, ,, ;,,,,;, ,,, ,,,,,, ,,,,,,,,,, ,,,,,, ,,,,,,, ,,,, ,，,,,,, ,,, ,,,, ,,, ,,,,,,,, ,, ,,,,,, ,,,;,,,, ,,, ;,,,,,, ,,, ,,,,,,,,,,,,,,,(,, ,,,, ,,,,,,,,,,,, ,,,,,, ,,,,,,, ,,,, ,,,,,,,,,;,, ,,;,,,,，,,, ,, ,,,,,,, ,,,,,,,,,,,—,,,,, ,,,,,,,,,(衄),,, ,,,,,,,,,,,;,,,,,,, ,,;,,,,,,, ,, ,,,,,,, ,,,,,,,,,;,, ;,,,,, ,,, ,,, ,,,,,,,,,,,,, ,,,,,,,,,,,一,(，,一,)，,,,,,,,,,,,,,(，,一,),,, ,,,,,, ,,;,,,,, ,,;,,,—,(,,,—,)(,,,,,,, ，,一,，，,,, ,,, ,,,—, ,,,, ,, ,,,,,,,,,, ,, ,,, ,,,,,,,,,, ,, ,,,,,, ,,,,,,,—,,, ,,,,,, ,,,,,,,，,,, ,,,,,,; ,,),, ,,,, ,,,,,,, ,,, ,,,,,，,,, , ,,, ;,,,,,,, ,,,,,, ,,,,,,,,;,,, ,, ,,,,,,; ,,,,,,(，,一,，，, ,, ,,, ,,,—, ,,,, ,,,,, ,,,,,,,,,, ,, ,,,,,,,,,,, ,,〔,,,,,,,,, ,,,,,, ,,,,,,,(,,,,,,; ,,,,,, ,,;,,,,,, ,,,,,,,,,，,,,, ,,,,,,,,,, ,,, ,,,,,,,,,,,,，,,, ;,,,,,,, ,,,,,, ,,;,,,,,,(,,,,,,, ;,,,,,,,, ;,,,,，,,,,,;,,, ,,, ;,,,,,,,, ,,,, ,,,,,,,,,,,,;(,,,,,,,,, ,,,, ,, ,,,,,,,,,,,, ,, ,,, ,,,,,,,,,, ,,,,,, ,,, ,, ,,,,,,,,,; ,,,,,,,,,,,,; ,,,;, ,硇;,,,,, ,, ，,一,，几,, ,,,’,,,—,( ,,, ,,,,, ,,,,,,,,,, ,,,,,, ,,,,,,,,,,,, ,,,,,,,, ,,,,,,,,,, 。 腰椎退变黄韧带中炎性细胞因子的表达及临床意义 黄韧带是脊柱后部的重要连接结构，位于相邻的椎弓之间，主要由弹力纤维构成。黄韧带作为脊柱运动节段的成分之一，具有维持脊柱稳定的作用。由于黄韧带退变导致其弹性下降，当脊柱后伸时黄韧带可出现皱褶或折叠而突入椎管，使椎管容积减少，尤其伴有椎间盘突出或关节突增生肥大时，在这些因素的共同作用下，可使椎管的有效空间更加减小，导致脊髓、神经根受压，出现神经症状，严重者可致瘫痪、病残。国内外对该病的治疗以手术治疗为主，药物缓解症状为辅，但大部分患者最终均需行手术治疗解除症状，可是除手术创伤本身对患者造成的痛苦外，术中减压加剧了病椎相邻椎体问的不稳定，从而需要进行内固定，对患者、社会造成极大的经济负担。不幸的是，不是所有手术均能完全获得满意的疗效，国内外报道腰椎术后失败综合征的发生率,—,,,【，捌不等，这样更加重了患者、家庭及社会的负担和压力，而且部分患者因为并发其他系统的疾病而不能耐受手术。目前对这类患者没有很好的治疗方法。因此，阐明黄韧带退变的机制，探寻一种行之有效的预防和保守治疗方法，减少手术率，具有极大的社会效益和经济效益。近年来，黄韧带退行病变(,,,,,,,,,,,, ,, ,,, ,,,,,,,,,, ,,,,,,，,,,)在椎管的发病学方面日益受到学者的重视，并且促进了对其病理学及病因学的深入研究，一般认为黄韧带的退变同机体的老化、创伤、代谢异常和家族遗传等众多因素有关，尽管有许多相关研究，但黄韧带退变的病因至今仍不十分明了。泰德安等【,,发现退变黄韧带中血管内皮生长因子(,,,,)和环氧化酶,,(,,,一,)的表达阳性, ,,,一,是一种与炎症相关的酶，其功能为生成蛋白酶、前列腺素及其他致炎介质，引起炎症，正常一般不表达或低表达。此外有研究认为,,,—,、，,一, ,、，,一,、，,—,,、，,一,及，，,一,,等〔,,，与黄韧带肥厚有关。但是关于也一,、，,一,，,,,—,等炎性细胞因子在退变的黄韧带中的表达的相关性研究国内外文献资料报道很少，因此，,一,、，,一,(,,,—,等炎性细胞因子与黄韧带退变的关系有待于进一步研究。为此我们对黄韧带退变标本与正常标本进行病理学观察及免疫组化分析，对，,一,、，,一,、,,,一仅在黄韧带退变过程中的作用进行探讨，阐明黄韧带退变的机制，以期从黄韧带退变发展链上寻找阻止其进程的方法，为这类患者的治疗提供更多的选择, ,(资料与方法 ,(,资料 ,(,(,研究对象, 凼蓥直匡堂医亟?堑塞生堂焦迨塞(垫～,生,( 选取临床确诊的腰椎管狭窄症或 腰椎间盘突出症的患者,,例，其中男,,例，女,,例，年龄,,—,,岁，平均年龄,,(,岁。术前通过,,、,,，影像学资料证明有黄韧带肥厚，但无钙化及骨化，且通过,,、,,，横断面成像测量黄韧带中线部位最大厚度超过,,,【,】,并行后路探查减压手术证实。(图,一,) 选取腰椎骨折的患者,,例，其中男,例，女,例，年龄,,,,,岁，平均年龄,,(,岁。术前通过,,、,,，影像学资料证明无黄韧带增厚、钙化及骨化的征象，且通过,,、,,，横断面成像测量黄韧带中线部位最大厚度小于,,,,行后路手术探查证实,(图,) ,(,(,主要试剂 (,)白细胞介素一,,(，,—,,,)兔抗人多克隆抗体: 武汉博士德公司提供 (,)白细胞介素一,(，,一,)兔抗人多克隆抗体: 武汉博士德公司提供 (,)肿瘤坏死因子一,(,,,,,)兔抗人多克隆抗体: 武汉博士德公司提供 (,)二抗试剂盒: 北京康为世纪生物科技 有限公司提供 (,),,,显色试剂盒: 北京康为世纪生物科技 有限公司提供 ,(,(,辅助 (,),,,,防脱胶片:江苏海门神鹰实验器材厂 (,),(,, ,,,缓冲液:内蒙古医学院附属医院中心实验室、病理科提供 ,(,(,实验仪器 (,)石蜡切片机:,,，,, ,, ,,,,，德国产 (,)光学显微镜:,,—,,,,,,,，日本产 (,)自动数码图像分析系统，日本产 (,)生物医学微波炉:,,一,型，上海创大科技有限公司 ,(,方法 ,(,(,标本的收集和处理:选择符合纳入的病例,,例后，均行后路探查手术，将后路术中切除的黄韧带剔除骨、脂肪及筋膜等组织，然后将黄韧带修成约,;,,,(,;,,,(,,,,大小，立刻放人,,,福尔马林溶液中固定，,,,一,,,后取出，制备成石蜡切片。 ,(,(,石蜡切片的制备:将黄韧带标本进行梯度酒精脱水，二甲苯透明，浸蜡，液体石蜡包埋，冷却，石蜡切片机连续切片，厚度,,，,，捞片(所有玻片均为,,,,防脱胶片)，切片置,,?烤箱内,小时。凼蓥直匡堂睦亟?堑塞生堂垡迨塞《垫～,生) , ,(,(, ,,染色步骤 (,)将石蜡切片入二甲苯，中,,分钟; (,)二甲苯?中,,分钟; (,)无水乙醇，中,,分钟; (,)无水乙醇?中,,分钟; (,),,,乙醇,,分钟; (,),,,乙醇,,分钟; (,)流动的自来水冲洗,分钟，不挂水珠为止; (,)过中性,,,缓冲液; (,)苏木精染液,—,,分钟; (,,)流动的自来水冲洗,分钟; (,,),,盐酸酒精溶液分化,(,—,分钟; (,,)流动的自来水冲洗,,分钟; (,,)伊红水溶液,分钟; (,,)流动的自来水冲洗,分钟; (,,),,,乙醇,,秒钟; (,,),,,乙醇，中,分钟; (,,),,,乙醇?中,乡槲; (,,)元水乙醇，中,,分钟; (,,)元水乙醇?中,,分钟; (,,)二甲苯，中,,分钟; (,,),,甲苯?中,,分钟; (,,)用中性树胶,—,滴封片, ,(,(,免疫组织化学步骤 (,)石蜡切片脱蜡和水化后，用,,,缓冲液(,,,,(,)冲洗三次，每次三分钟; (,)用柠檬酸盐抗原修复液，微波处理，高温高压充分修复抗原，取出冷却至室温; (,)每张切片滴加一滴或,,出,,,:,:(试剂,)，室温下孵育,,分钟，以阻断内源性过氧化物酶; (,),,,冲洗三次，每次三分钟; (,)甩取,,,液，每张切片滴加一滴或,,山的非免疫动物血清(试剂,)，室温下孵。育十分钟; (,)甩取血清，每张切片滴加一滴第一抗体，室温下孵育,,分钟或,。,过夜; (,),,,冲洗冲洗三次，每次五分钟; (,)甩取,,,液，每张切 片滴加一滴或,,一的第二抗体(试剂,)，室温下孵育十分钟; (,),,,冲洗三次，每次三分钟; (,,)甩取,,,液，每张切片滴加一滴,,一的链霉菌抗生物素一过氧化物酶溶液(试剂,)，室温下孵育,,分钟; (,,),,,冲洗三次，每次三分钟; (,,)甩取,,,液，每张切片滴加,滴,,,,的,,,显色液，显微镜下观察,一,,分钟; (,,)自来水冲洗，苏木素复染，,(,,,,,分化，,,,冲洗返蓝; (,,)梯度酒精脱水，二甲苯透明，中性树胶封固。 ,(,(,观测指标 (,),,染色:分别在低倍镜(×,,,)和高倍镜(×,,,)下观察两个组别的常规,,切片，并且每张,,切片随机取,个高倍视野(×,,,)，观察,个高倍视野中成纤维细胞的总数，结果采用,,,,,表示, (,)免疫组化:用,,,,,,,光学显微镜观察两个组别免疫组化切片中，,—,、，,,,及,,,—,的表达情况。将各组切片置于低倍(×,,,)和高倍镜(,,,,)观察。每张免疫组化切片随机观察,,个高倍视野(×,,,)，以在细胞胞浆或胞核中出现浅棕黄色、棕黄色或褐色染色为阳性。染色结果结合阳性细胞百分率和着色强度进行半定量分析，由两项积分相加进行评分,(见表,) 表, ，,一,(，,,,(,,,染色结果评分标准 ,(,(,统计学分析方法 (,),,染色:退变组、正常组黄韧带标本经,,染色观察所得数据均以均数,,标准差表示，采用,,,,,,(,软件，退行性变组、正常对照组的组间差异应用均数的,检验(完由苤直匿堂睦亟?婴塞生堂焦迨塞(垫～,堡, ,全随机两样本均数比较的,检验), ,,,(,,认为差异有统计学意义, (,)免疫组化,—,法:退变组、正常组黄韧带标本经免疫组化染色观察所得数据以阳性率表示，采用,,,,,,(,软件，退行性变组、正常对照组的组间差异应用,,检验(两独立样本率比较的四格表,,检验), ,,,(,,认为差异有统计学意义, ,(结果 ,(, ,,染色结果 (,)正常组:光镜下呈现典型的弹力致密结缔组织结构特点，主要由弹力纤维组成，弹力纤维呈波浪状，排列规则，与韧带纵轴一致，弹力纤维间可见少量的胶原纤维和散在的成纤维细胞。(见图,) (,)退变组:弹力纤维明显减少、断裂且分布不规则，胶原纤维则增多，并且伴软骨细胞、成纤维细胞、毛细血管的增生,(见图,、,、,)( (,)退变组中胶原纤维、成纤维细胞增生明显高于正常组，且两组成纤维细胞计数差异有统计学意义,(见表,) 裹,正常组与退变组中成纤维细胞数(,’,,,)比较 注:经校正,检验，,’,,,(,,,，,,,(,,, ,(,免疫组化 (,),,例肥厚黄韧带免疫组化结果显示:,,例(,,(,,),，,—,在软骨细胞及成纤维细胞的胞浆或胞核中表达阳性(见图,);,,例(,,,)，,一,在软骨细胞及成纤维细胞的胞浆或胞核中表达阳性(见图,,);,,例(,,(,,)，,一,在软骨细胞及成纤维细胞的胞浆或胞核中表达阳性(见图,,), (,),,例正常黄韧带免疫组化结果显示:,例(,,,),,,—,在软骨细胞及成纤维细胞的胞浆或胞核中表达阳性(见图,,);,例(,,,),—,在软骨细胞及成纤维细胞的胞浆或胞核中表达阳性(见图,,);,例(,,,)几一,在软骨细胞及成纤维细胞的胞浆或胞核中表达阳性(见图,,), (,)退变组中软骨细胞及成纤维细胞的胞浆或胞核中儿一,、，,,,、,,,—,的表达明显高于正常组，且差异有统计学意义,(见表,，,、,)。 表,正常组与退变组中，,一,表达情况比较 注:经卡方检验。,,,,,(,,,，,,,(,,, 表 ,正常组与退变组中，,一,表达情况比较 注:经卡方检验，,,,,,(,,,，,,,(,,, 表,正常组与退变组中,,,—,表达情况比较 注:经卡方检验，,,,,,(,,,，,,,(,,, ,(讨论 ,(,黄韧带退变的机制 黄韧带是由薄而坚韧的黄色弹力纤维构成，位于相临两椎弓板之间，韧带上方附着于上位椎弓板下缘及前面，下方附着于下位椎弓板的上缘及后面，薄而较宽，犹如屋瓦叠掩。内侧在棘突基底部相互连接，外侧一直扩展至椎间关节囊，但并不与其融合。黄韧带正常时可限制脊柱过度前屈，其弹性在过大外力时能对能量进行吸收，起着稳定脊柱和保护脊髓的作用。近年来，对黄韧带退行病变(,,,,,,,,,,,, ,, ,,,,,,,,,,,,, ,,,,,,，,,,)的研究越来越多，有的学者认为黄韧带退变主要包括黄韧带肥厚、钙化和骨化【,】，但大多者认为黄韧带增生肥厚并不包括骨化及钙化【,】，由于黄韧带骨化、钙化症的发病人群、病变部位、病理变化等具有各自的特点，两种病理变化已被公认为独立的疾患‘,?,,。,,,,,,,, ,,加,提出黄韧带退行性变的概念:是以弹力纤维明显减少和胶原纤维的增生为主要组织病理学特征的增生肥厚改变，区别于黄韧带骨化和钙化。这个概念被我国学者接受〔,,，,,〕。腰椎黄韧带正常厚度中线为,—,,,，侧方为,,,,,,,。中线部位凼鐾直匿堂睦亟?堑塞生堂焦迨塞(兰,～,生, ,如黄韧带超过,,,，即可认 徽 , 邢卟课怀 担恚砣衔 屎窨凇浚镉捎谕馍嘶蚱渌 颍 迫痛 フ ,崛砑霸ふ帕Φ奶匦裕 湮 橹 踔量珊翊铮浮 保叮颍幔恚 ?芍羼藁蛘鄣 蝗俗倒埽 岷竦南宋 鹱倒芟琳 贾律窬 苎梗 现厥笨芍绿被尽?目前对于黄韧带退变发生发展的机制仍然不是十分清楚。研究发现:黄韧带肥厚程度与纤维化程度、弹性纤维减少程度均呈正相关(“’,引。戴力扬等〔,,对手术后的黄韧带标本进行组织学研究显示:弹性纤维含量下降以及胶原纤维数量增加，正是黄韧带肥厚的原因。我们对,,例肥厚黄韧带组织进行组织病理学观察，结果显示:病变黄韧带正常的组织结构丧失，黄韧带弹力纤维减少，胶原成分显著增加，弹性纤维直径减少、变细，排列杂乱而无规则，部分断裂变形，并被大束的胶原纤维所分隔，并且伴软骨细胞、成纤维细胞、毛细血管的增生，与文献报道的结果一致【,,(埔】, 于是有学者开始从纤维化的机制着手研究黄韧带的肥厚过程，并取得了一定的进展，其中研究最多的细胞因子是转化生长因子一,,(,,,—,,)。已证实,,耶一,可通过刺激黄韧带细胞分泌，、?和,型胶原导致韧带增生肥厚, ,,,,,【,列等研究发现，随黄韧带肥厚程度增加，,,,—,表达减少，其他的一些研究,刀也发现,,,—,只在瘢痕形成早期表达，肥厚的瘢痕愈合后即停止表达，因黄韧带肥厚与瘢痕形成的具备共同特征:胞外基质胶原纤维的大量增生、沉积和血管形成，且主要影响细胞均为成纤维细胞。因此推测可能,,,—,在黄韧带肥厚早期发挥作用，诱导胶原纤维的合成， 诨迫痛 屎裥纬珊笃冢 蚩赡苡衅渌 俳 涸 宋 铣傻南赴 蜃踊蛏 ひ蜃拥牟斡耄?,越,,,等,,,,报道腰椎管狭窄症肥厚黄韧带中,,,一,由韧带内皮细胞分泌，在所有病理标本均有表达，且与韧带厚度有一定的线性关系，泰德安等【,’发现退变黄韧带中血管内皮生长因子(,,,,)和环氧化酶一,(,,,一,)的表达阳性, ,,,一,是一种与炎症相关的酶,,,，其功能为生成蛋白酶、前列腺素、及其他致炎介质，引起炎症，正常一般不表达或低表达。研究发现炎症相关因子,,,,,、,,,—,、，,一, ,、，,一,、，,一,,、，,一,及,一,,等,,，也被认为与黄韧带肥厚有关。因此我们推测除,,,—,,，炎性细胞因子在黄韧带退变中起重要作用。 我们对,,例肥厚黄韧带组织进行免疫组化观察，结果显示:,,例中,,例(,,(,,)’，,,—,,在软骨细胞及成纤维细胞的胞浆或胞核中表达阳性;,,例(,,,)，,一,在软骨细胞及成纤维细胞的胞浆或胞核中表达阳性;,,例(,,(,,)，,一,在软骨细胞及成纤维细胞的胞浆或胞核中表达阳性，而,,例正常黄韧带免疫组化结果显示:,例(,,,),,,—,在软骨细胞及成纤维细胞的胞浆或胞核中表达阳性;,例(,,,)，,一,在软骨细胞, ( 内鐾直匡堂睦亟?堑塞生堂垡迨塞【垫～,生,及成纤维细胞的胞浆或胞核中表达阳性;,例(,,,)，,一,在软骨细胞及成纤维细胞的胞浆或胞核中表达阳性。与文献报道一致,, ,因此，本研究认为，尽管黄韧带退变的发病机制目前尚不明确，但在黄韧带退变过程中，一个重要机制可能是在几一,、，,一,、,,,—,等炎性细胞因子参与调控的慢性炎症, ,(, ,一,、，,,,、,,,—,在黄 —,、也,,、,,,—,被称为前炎性细胞因子，通过刺韧带退变中的作用 ，, 激炎症细胞的聚集、激活和炎症介质的释放，启动和促进炎症反应过程。 本组,,例退变黄韧带组织均有较高水平的几一,、几一,和,,,—,,三种细胞因子表达，提示它们在黄韧带退变的发生发展过程中起重要作用。结合文献，我们认为:几一,、，,一,和,,,—,在黄韧带退变中发挥致纤维化、致炎及致痛作用。 白细胞介素一,(,,,,,,,,,,,一,，几一,)是纤维化的重要因子，它能刺激成纤维细胞的增殖及胶原合成，在肉芽组织及病理性瘢痕组织中均有较强表达, ，，,一,还可能促进成纤维细胞分泌血小板源性生长因子(,,,,)，后者再刺激儿一,增殖, ,,,,通过对成纤维细胞的促分裂增殖、趋化及刺激纤维粘连蛋白合成等作用参与创伤修复，并且通过刺激成纤维细胞胶原合成及胶原酶活化，对胶原合成、分解也有调节作用【,引，调节胞外基质的更新。,,,,在成纤维细胞中能刺激胶原基因的表达和蛋白合成，高水平的,,,,可引起更快的组织修复，最终更有效的修复损伤。但如果作用过度，则会导致瘢痕过度形成, ，,一,还能引起成纤维细胞，型和?型前胶原蛋白,,,,表达，并且通过促进或抑制胶原酶的活力来影响细胞外间质成分堆积。它通过上调细胞间黏附因子一,表达，诱导炎症细胞黏附、迁移，通过诱导间充质细胞释放基质金属蛋白酶(,,,,)调节,,,降解。经儿一,处理后的成纤维细胞系产生大量的前列腺素,,(,,,,)，而,,,,的释放可增强胶原的活力。肿瘤坏死因子(,,,,, ,,;,,,,, ,,;,,,—,，,,,—,)也是一种致纤维化因子，并且可刺激成纤维细胞增殖及血管增生。在也一,及,,,—,,的共同作用下，导致成纤维细胞增生，胶原纤维合成增加，最终导致黄韧带肥厚。 研究表明汹】:儿一,可促进磷脂酶,,(,,,,)的激活, ,,,,是炎症级联反应的关键酶，可促进前列腺素、白三烯、血栓素、血小板源性生长因子等重要炎性介质的分泌，,,,,还可以直接降解细胞膜的磷脂造成细胞损伤【刎, ,,,,,,,等【,,】将,,,,注入兔腰小关节囊及附近组织，观察,,,,对腰椎组织的致炎效果和对周围神经的电生理学效应，结果在组织学上引起典型的白细胞浸润和血浆渗出等急性炎症反应;电生理学上，高剂量,,,,引起神经毒性作用，神经自发放电消失，机械刺激也不再引起神经放电。中等内苤直匿堂陵亟?婴壅生堂鱼迨塞(垫～,生 , ,剂量,,,,引起神经处于致敏状态，机械刺激后，后发放电位延长，静止伤害感受器发放电位。低剂量,,,,不引起神经电生理反应, ,,,,等嗌,将,,,,注入大鼠腰椎硬膜外腔，观察它对腰神经根结构和功能的影响。注入,天后，发现局部神经根纤维脱髓鞘，此时给予神经根机械刺激后引起持续异位放电。据此分析，高浓度的,,,,损伤神经，并使神经处于超敏状态, ,,,—,,是一种重要的炎症介质，可增强中性粒细胞和嗜酸性粒细胞功能，刺激它们产生超氧化物，释放溶酶体酶，对其周围细胞产生毒性作用，还可介导其他细胞因子和炎性因子的表达，增强内皮细胞的趋化特性和表面抗原性?】,在这些炎性介质的共同作用下，导致黄韧带周围血管内皮细胞受损、血管通透性增高、渗出增加、组织水肿，这些不仅使原本狭小的椎管空间更加拥挤，还导致局部的血循环障碍，缺血、缺氧。此外肥厚的黄韧带紧邻脊髓和神经根，由于硬脊膜的高通透性和神经根缺乏神经外膜，炎性因子很容易弥散至神经组织内部，引起神经结构和功能的伤害，最终导致神经受压及损害加重。 此外几一,与,,,一仅能够诱导组织细胞产生前列腺素,,(,,,,,,,,,,,,, ,,，,,,,)，前列腺素是重要的炎症调节因子，可引起组织的炎症损害，并且是重要的致痛因素【圳，其机理可能是降低伤害感受器的阈值并刺激;,类神经纤维【,,,，另外它可以提高其他致痛物质的敏感性，从而加强致痛作用，从而产生神经疼痛。 ,一,在退行性骨关节病和关节疾病中的病理作用研究较多，它已被认为是引起关节破坏和炎症的重要介质陋, , ,的效应，凡一,作为炎症介，,一,的致炎作用主要在于增加几一,和,,,— 质被认为是,,,—,的某些生物效应的放大因子。 临床发现，一些患者黄韧带肥厚明显，却没有明显的神经症状;有的患者黄韧带肥厚不明显，神经症状却异常显著，甚至比严重黄韧带肥厚症状更强烈。这些现象提示:黄韧带肥厚后神经受压程度与病人的临床症状并不呈正相关。同时手术也观察到，对于神经根有充血水肿等炎症改变、触之较敏感的患者，其神经性疼痛的表现也较剧烈。这些都提示单一机械致痛理论不能完全解释上述临床表现，结合本文研究结果及临床发现，，,一,、，,,,、,,,一位在黄韧带退变过程中发挥致炎及致痛作用, ,(,临床意义 腰椎管狭窄症是引起中老年患者腰腿痛和间歇性跛行的主要病因瞄】，而黄韧带肥厚是引起腰椎管狭窄症的常见原因田瑚】,在临床上，由于黄韧带退变导致的腰椎管狭窄症的治疗一直比较棘手，目前仍没有阻止该疾病发生发展的有效手段。针对症状较轻者，我们一般建议患者卧床休息、减少活动量及避免负重以减轻症状，但这往往会降低患 。, 凼鐾直匿堂睦亟?硒塞垒堂焦迨塞(垫～,堡,者的生活质量且影响工作;症状稍重者可口服一些非甾体类药物对症治疗，但非甾体类.