自交不亲和

自交不亲和 梨自交不亲和及其亲和突变品种花柱内S4(SSM4)基因的表达与作用的比较 提取梨(Pyrus serotina Rehd.)自交不亲和品种"二十世纪"(基因型为S2S4)、自交亲和的突变品种"奥嗄二十世纪"(S2S SM4,SM=Stylar-part mutant;花柱部分突变)及其亲和后代花柱的可溶性蛋白.经等电聚焦电泳(IEF-PAGE)分析表明,"奥嗄二十世纪"及其后代花柱仍存在SSM4 蛋白,但其含量逐代减少,同时发现"奥嗄二十世纪"的S SM4基因仅在柱头表达,而"二十世纪"的S4基因表达的部位除了柱头外,还包括花柱上部及花柱下部,且表达量呈现从柱头到花柱下部下降的趋势.S蛋白经等电聚焦电泳的凝胶板进行RNase活性染色处理,也得到相同的结果.从花柱(包括柱头)中纯化出的S蛋白经SDS-PAGE电泳后进行RNase活性染色的结果表明 ,S4与SSM4蛋白的分子量相近(约30 kD),并且均具有RNase活性.进一步以酵母RNA为基质测定的比活性也基本相等,约为275 U?min-1?mg-1蛋白.在离体条件下,上述两种S蛋白(S-RNase)也以相同的程度抑制S4或SSM4花粉发芽及花粉管伸长.研究证明,自交亲和突变品种"奥嗄二十世纪"的SSM4基因也具有原始自交不亲和品种"二十世纪"S4基因的功能.因此,其自交亲和的原因可归结为SSM4基因的表达量较少及 SSM4基因仅在柱头中表达的缘故. 梨花柱S-RNase 对花粉管内CaM分布的影响 采用免疫胶体金定位和电子显微技术研究了离体条件下梨花柱S-RNase对自花、异花花粉管中钙调素(CaM)分布的影响.结果显示:(1)花粉管中CaM主要分布在质膜附近,在细胞壁上也有少量分布.(2)不亲和(自花)花柱S-RNase 处理后花粉管远离质膜的位置发现CaM,处理24 h后在花粉管中部出现CaM,且CaM位置向花粉管内部移动;而亲和(异花)S-RNase处理后花粉管的CaM分布没有明显变化.研究表明,CaM参与了自交不亲和反应过程. 梨43个品种花粉生活力及4种测定方法的比较 用花粉离体培养法测定比较了43个梨品种花粉离体萌发率和花粉管生长长度;从中选择花粉相对生活力低、中、高3组6个品种(今村秋和雪花梨、金二十世纪和丰水、青松和满天红)的花粉,采用I-KI染色法、蓝墨水染色法、MTT染色法、过氧化物酶染色法4种花粉生活力测定方法,以花粉离体萌发法为对照.结果表明,花粉培养24h后,43个梨品种的花粉萌发率平均为66.15%,其中花粉萌发率 ?60%的品种约占84%,满天红萌发率最高为82.79%;花粉管长度平均为1.77mm,花粉管长度?1 mm的品种约占89%,其中奥萨二十世纪最长为3.25mm,说明多数梨品种花粉生活力较强.与对照相比,4种花粉生活力测定方法中I-KI染色法的测定值极显著偏低,MTT(噻唑蓝)染色法的测定值显著偏高,二者不适于梨花粉生活力的测定;过氧化物酶染色法测定值与对照差异显著,也不适宜用来测定梨花粉生活力;蓝墨水染色法测定值与对照没有显著性差异,可用于梨花粉生活力的快速测定. 梨配子体型自交不亲和性及其分子机理 综述了梨(Pyrus)配子体型自交不亲和性机理研究的一些进展,主要包括梨自交不亲和性的表现,雌蕊自交不亲和基因(S基因)的表达特性与克隆,S基因蛋白产物(S糖蛋白)的分离、特性鉴定,S糖蛋白的晶体结构与功能,梨S基因型的确定等方面的研究成果,并提出了梨自交不亲和性研究中尚待阐明的问题. 孢子体型自交不亲和反应中信号转导的研究进展 孢子体型自交不亲和性是植物特异性地识别并拒绝自花或亲缘关系很近的花粉的一种遗传机制,该特异性受S基因座控制.在前人的研究基础上了孢子体型植物自交不亲和反应过程中的信号转导的研究进展. 钙调素对梨自花及异花授粉后花柱自发荧光变化的影响 采用激光共聚焦显微镜研究了外源钙调素(CaM)及其抗血清对'丰水'梨自花(不亲和)和异花(亲和)授粉后花柱自发荧光变化的影响.结果表明:授粉12 h后,CaM处理后异花授粉花柱荧光值与未处理异花授粉花柱荧光值相比,花柱上部荧光值降低,下部升高;而CaM处理后自花授粉花柱自发荧光值除距柱头 2500,3000μm外其余部分均高于未处理白花授粉花柱;CaM抗血清处理后异花授粉花柱荧光值除距柱头1000,2000 μm外其余部分均高于未处理异花授粉花柱;CaM抗血清处理自花授粉花柱自发荧光与未处理白花授粉花柱相比,分布规律发生改变,最高值位于距柱头 1000,1500μm处.授粉72 h后CaM处理后异花授粉花柱荧光值高于未处理异花授粉花柱,最高值位于子房端;CaM处理后自花授粉与未处理白花授粉花柱自发荧光值相比,分布规律发生改变,最高值位于距柱头1500,2000 μm处;CaM抗血清处理后异花及自花授粉花柱自发荧光与未处理异花及自花授粉花柱相比较,分布规律均发生了改变,最高值均位于0,500 μm处.证实了外源CaM及其抗血清对白花、异花授粉的生理代谢过程均有影响. P