【doc】乳腺疾病雌、孕激素受体检测与临床应用研究进展

【doc】乳腺疾病雌、孕激素受体检测与临床应用研究进展 乳腺疾病雌、孕激素受体检测与临床应用研 究进展 第14卷第2期 2001年4月 华夏医学 ACTAMEDICINAESINICA Vo1.14No.2 Apr.2001 乳腺疾病雌,孕激素受体检测与临床应用研究进展 李西融 (广西区第二人民医院嫡理科,广西桂林541002) 关麓词:乳腺肿瘤;雌激素受体;孕激素受体 中瞳分类号R655.8,R737.9~R446.9文献标识码;A文章缩号:10o8—2409(2001)02 —0241—03 自1974年Betllesda国际会议肯定了雌激素受体与激素 疗效的相互关系之后.人们相继发现了雌,孕激素受体在乳腺 癌描疗选择及估计瑗后中的作用.提示这两种受体的测定对 赫床实践具有重要意义.现在受体的免疫标记检测已不 断加以简化,临床应用范国将它们扩太到乳腺的良性肿块的 受体测定.其结果指导临床进行试验性的内分泌治疗.获得一 定的进展,但疗教有待于进一步观察. 1雌,孕激素受体的研究概况 1965年Tort等首状在体外发现大白鼠子宫内有特异吸 附雌激素的物质,称之为雎激素受体(EstrogenReceptor, ER).1967年Jensen等在乳腺癌曲癌细胞浆内发现有与性娄 固薛相结台的特异蛋白质.亦称为ER.1973年Terenius等用 H3标记孕酮,发珊它能结合到ER阳性的乳腺癌细胞内,明 乳腺瘟细胞内既有ER也有孕激素受体(ProgesteroneRecep tol"}PR). 白Jensen在1967年首先建立了ER的实验室放射化学 测定法"].并应用于测定乳腺癌内的ER状况.1973年 McGiure发表临床应甩结果以后口],大量的资料证明,ER和 PR的检测有利于乳腺癌患者的预后估计及治疗的选 择[H].近十几年来,ER和PR的研究主要是在测定方法上进 行改进,相继建立的ER,PR测定的方法有:?生化法;@亲和 组化法@免疫组化法;固单克隆抗体免疫组化法等等L5叫0]. 在检测方式上.多采用石蜡切片,并在其它方法如冰冻切片, 细胞印片或穿刺细胞涂片上也有应用. 2ER,PR的生理功能与乳腺疾病的关系 2.1生理功能趸作用机理雌,孕擞素属于甾体激素,是一 种亲脂性物质.分子量较小.由卵巢(和胎盘)产生.通过血循 环到靶器官,如子宫,阴道,输卵瞥和乳腺,能顺利通过细胞 膜,进人细胞浆.主要起调节细胞代谢,控制机体生长发育的 作用. 而ER/PR是一种蛋白质(糖蛋白),存在于靶器官的细胞 浆内.对雌,孕激翥具有高度选择性.高亲和力并与其相结台 的生理功能特点其作用机理是雌激素到达靶器官后首先在 胞浆内与受体结台形成ER复合物,后由胞浆向细胞核内移 动,通过棱膜进入棱内并牯附予染色质上,促使DNA转录成 mRNA.mRNA通过核膜进人胞浆,作为新的蛋白质台成模 板.台成特定的蛋白质,从而调节靶细胞的生长,分裂和代谢. 22与良性乳腺疾赢的关系正常乳腺组织的导管和小叶 的上皮细胞存在有ER和PR.数量因乳腺的分化程度而异.良 性乳腺疾病(如乳腺小叶增生瘟,男性乳腺增生症,乳腺纤维 腺宿等)肿块组织内的ER和PR阳性率高于正常组织.但较 恶性肿瘤低.因病变类型的不同.ER和PR的分布及浓度亦 不同 临床上,乳腺良性肿骁比罂性肿瘤更常见,占乳腺疾病的 9o以上,常见的乳腺良性肿骁有乳腺小叶增生症(包括乳腺 腺病,硬化性乳踪病,乳腺囊性痛等),男性乳腺增生症及良性 肿瘤如乳腺腺瘤,纤维腺瘤,导管内乳头状瘤等.但是,这一类 疾病的ER,PR表选情况及与痰病发展的相互关系,临床上研 究的不多,有学者[]检测乳腺良性肿块167倒,ER阳性率 39.乳腺癌32倒,ER阳性率46,也提示良性ER/PR的表 达略低于恶性肿瘤. 乳腺肿瘤的发病原因与卵巢机能失调有关.一些学者认 为因为体内黄体素分泌减少.雎激素量就相对增多.刺激了乳 腺组织的增生.另一些学者认为体内雌激素分泌并不多.而是 雌激素受体明显增多[1目.对雎激素感受性增加导致乳腺组织 发生增生.甚至产生细胞癌变.赫床上检测乳腺癌ER/PR水 平后用三苯氧氨可阻断雌辩素对乳腺的刺激.有助于瑗防复 发. 但三苯氧氨用于乳腺小叶增生症,男性乳腺增生症或歼 维腺瘤的治疗.是否可缓冲雎激素对乳腺的莉澈,减轻小叶 增生和男性乳腺增生症的症状或者预防乳腺良性肿瘤癌变, 目前尚未有应用于临床治疗的报道.作为实验性治疗.有待于 进一步的研究.但是.检测乳腺良性肿块的ER/PR表达情况, 来指导临床做内分泌治疗,亦有人在探索,结果有待于观察. 2.3与乳腺癌的关系 23.1肿瘤分趣肿瘤组织中ER/PR在乳腺癌的形成,发 展过程中起关键作用.ER/PB的l丑性表达率随乳腺癌分级升 高而降低大多者认为ER,PR的量与乳腺癌肿瘤分 级有很大关系.Furm认为受体量与肿瘤分级有显着关系,1 ? 241? 2期华夏医学14卷 级者受体水平高,肿瘤很少复发,?级者受体水平低,术后易 复发,二者有显着统计学意义 2.3.2年龄,月竖状态的关系部分学者认为乳腺癌组织中 ER,PR的阳性率随着年龄的增加而升高.Martin等表明EB (+)患者年龄平均为58.9岁,而ER(--)患者的平均年龄小 于上述年龄,两者有显着性差别.研究结果还发现,受体量与 患者的月经状态有密切关系.ER,PR的阳性率绝经后高于 绝经前. 2.3.3与病程长短,肿块太小的关系部分学者研究表明, ER和PR的含量与患者就诊时病程长短无关至于与乳腺癌 肿块大小的关系各家有不同见解+有的认为肿块直径越大,受 体量越低.但也有人认为肿块直径大小与ER,PR的量无相 关性. 2.3.4与临床分期,淋巴结转移的关系有学者认为ER, PR的古量与患者临床分期呈反比关系l4],越是疾病的进展 期,受体古量越低.而ER,PR的含量与淋巴结转移率呈反比 关系,受体水平越高,淋巴结转移率越低. 2.4受体测定与临床应用的关系受体的检测结果在临床 应用上具有两种意见多数人接受两者之间有因果关系的观 点+表现在以下几个方面. 2.4.1判断生转学抒为和慎后估计乳腺癌的预后与受体 水平有密切关系一般认为ER和PR阳性的乳腺癌细胞增生 能力弱,生长缓慢,生物学行为偏良,术后复发晚,存活时间 长.相反受体阴性的乳腺癌细胞增生分裂快,侵袭力强,复发 早,生存时间短.因此受体水平从侧面反映了乳腺癌的生物学 行为,为翔断预后提供了一个重要指标 2,4,2临床选择性治疗的意义经研究表明,受体阳性者对 内分泌治疗的反应率高于受体阴性者f而受体阴性者对化疗 的有效率高于受体阳性患者因此当前为使乳腺癌综合治疗 更合理,国外将受体测定作为外科病理常规工作之一,每倒患 者都常规作受体测定,来指导其临床选择合理的治疗方案 1980年Degenshein等人根据受体表达情况制定了一个治疗 方案,并得到了临床广泛采用受体阳性,腋淋巴结无转移者, 手术治疗并术后定期复查,一般不必辅助治疗.受体阳性,腋 淋巴结有转移者或受体阴性,不论腋淋巴结有无转移者,术 后均应作化疗I在晚期癌或复发癌,受体阳性内脏无转移者, 考虑用激索疗法,内脏有转移,则用激素治疗加化疗.近几年 来,国内也相应开展了ER和PR的检测,指导临床选择合理 的治疗方案D,并对三苯氧氨服药时间,放疗或化疗加三苯氧 氨的作用,绝经后腋窝淋巴结阴性服用三苯氧氨者是否需要 追加化疗,绝经前腋窝淋巴结l,3个阳性和受体阳性的完全 性激素封闭治疗等都进行了研究. 3ER,PR表达与相关基因关系的研究进展 近几年来,乳腺肿瘤中的一些癌基因,抑癌基因,细胞凋 亡基因,细胞增殖活性等与激素受体表达的相关性也正在受 到关注?卜. 3.1与癌基困的关系原癌基困c—erbB一2位于l7号染色体 长臂,参与调控细胞生长,增殖及分化.它的过度表达提示恶 ?242? 性程度高,预后差.有学者研究表明1.15_,乳腺癌cerbB一2基 因扩增与ER/PR表达里负相关,提示c—erbB一2的过度表达与 乳腺上皮恶性转化密切相关. 3.2与抑癌基因的关系P21蛋白的阳性表达率随乳腺癌分 级升高而上升.P53抑癌基因位于17号染色体短臂,正常的野 生型P53基因能监控细胞基因组的完整性,在调节细胞周期 及诱导凋亡起重要作用,是人类肿瘤相关性最密切的基因之 一 .当出现DNA损伤或异常时,启动程序性死亡,清除这 种异常细胞当该基因发生突变后,将丧失这种监控功能,使 宪变细胞逃逸凋亡,导致恶性肿瘪发生结果表明""],乳腺 肿瘤P53的积聚与ER/PR表达状态有关.良性乳腺肿瘤P53 的积聚与ER/PR表达无显着性差异,恶性乳腺肿瘤P53的积 聚与ER/PR表达呈负相关. 3.3与细胞凋亡基困的关系bcI一2是凋亡研究中最受重视 的基因之一,它通过抑制细胞凋亡,延长细胞生存参与肿瘤发 生研究表明[蜘,bcl一2在乳腺良性肿块中均有不同程度的表 达,在乳腺癌组织中阳性表达率为57,be!-2表达和乳腺癌 中的激素调节具有相关性.认为bcl一2蛋白可使乳腺癌细胞 ER/PR的数量增加,使临床的内分泌治疗更有效.他还认为 乳腺癌中ER/PRf一)的患者是否可通过转基因的方法将bcl一 2蛋白基因转^到乳腺细胞中,使其获得激素受体,由ER/PR (一)转变为ER/PR(+)的细胞,使患者的预后大为改善.而 乳腺癌中的P53蛋白表达增高者bcl一2表达下降,提示突变型 P53能够下调b~l一2的表达,其机制可能是由于细胞对抗凋亡 刺激因素的能力有所增高所致 3.4与细胞增殖活性的关系Ki一67是反映细胞增殖活性的 标记抗原【)在良性乳腺肿瘤中l(i一67表达在ER/'PB阳性组 与ER/PR阴性组问有显着性差异,关系密切.在恶性乳腺肿 瘤中,Ki67与PR有关,提示PR阴性乳腺癌细胞较PR阳性 乳腺癌细胞具有更强的增殖活性.增殖细胞核抗原(PCNA)阳 性表达与乳腺癌组织学分级,类型和肿瘤复发呈正相关,与生 存期里负相关而ER/PR表达随组织学分级升高而降低,这 提示乳腺癌细胞PCNA表达增高时其是处于细胞增殖活跃 期,它们的ER/PR数量相对而言就步. 4雌,孕激素受体检测方法的研究与应用进展 4.1组织学检测当前,国内外ER,PR的检测比较成熟并 得以在临床上应用的方法有生化法(D),亲和组化法,免疫 组化法,单克隆抗体免疫组化法,流式细胞仪计数法等等.而 近几年来国内一些单位或实验室也开展受体检测的研究,但 方法上基本与国外相同0)在临床病理中,组纲学切片或 冰冻切片检梗4ER/PR现多采用单克隆抗体免疫组化法,该方 法技术成熟,得到广泛应用.其试剂已商品化.检测方法也在 不断简化但是,组织学检测有两个缺陷,就是标本来源必需 手术活检,创伤性大,对失去手术机会的晚期乳腺癌患者及常 见的乳腺良性肿块如乳腺小叶增生症(包括乳腺腺病,硬化性 乳腺病,乳腺囊性病等),男性乳腺增生症等不需手术的患者t 就无法检测;另外组织学检测尚需做石蜡切片或冰冻切片,设 备仪器多,操作繁杂费时,在基层单位无法推广应用. 2期李西融:乳腺疾病雌,孕激素受体检测与临床应用研究进展l4卷 4.2细针穿刺细胞学检测为了克服以上缺点,扩大应用范 围,在基层单位能推广应用,近年来国内一些学者采用细针穿 刺细胞学标记雌,孕激素受体,结果表明本方法较组织学检测 方法更为简便,易掌握,且更加经济.成为国内目前研究的课 题之一口,卦1.该方法具有较广泛的临床应用前景,其璜期的 研究结果有如下几十方面. 4,2.1简化受体拴剐手段和方法对乳腺疾病包括莨性或 恶性肿块要检测的标本不必手术而仅用针吸细胞学涂片即可 获取,术前就髓确认并直接在涂片上测定受体,操作方法大大 简化,所需仪器设备步,竹格便宜.完全克服了上述组织学检 测方法的缺陷,可望成为探受患者欢迎的一种新的检测方法. 4.2,2扩大应用范圊针暇细胞学涂片测定受体,术前能确 诊.不仅可用于不能手术切除乳腺癌的治疗监护,且可用于其 它部位转移灶的辅助诊断检测.并将原来仅作为乳腺癌受体 单项目的检测,扩大到乳腺其它良性肿块如乳腺小叶增生症 (包括乳腺腺病,硬化性乳腺病,乳腺囊性病等),男性乳腺增 生症,乳腺纤维腺瘤等的ER/PR检测. 4.2.3推广普覆应用针吸细胞学直接涂片测定受体,不必 手术,不需要冰球切片或石蜡切片,需仪器设备步,不必增加 新的设备及人员,操作简单,经济快捷,可以在一般的基层医 院普及推广开展运用,因此具有普及推广运用的意义. 综上所述.乳腺疾病检测ER/PR并用以指导临床选择适 当合理的治疗方法,其发展方向是:在检测方法上简化操作规 程,减少标记步骤和时间,降低成本和检测费用}在应用上就 是从单纯检测乳腺癌扩太到对乳腺莨性疾病如乳腺小叶增生 症(包括乳腺腺病,硬化性乳腺病,乳腺囊性病等),男性乳腺 增生症,乳腺纤维腺瘤,腺瞎等的FR/PR检测.探索一条对其 新的合理的治疗方法.而激素受体与相关基因的关系正日益 受到重视. [参考文献] 口]Je..enEv.Est~genretoind蚰uesand tumo'~[M].In:WulerRW,TL,WoodSIr.eds.Endogenous Face.ormlm'ine|nmi~'rlostTumorBalal{ee.ChicagotUnlversiLy0{ ChicagoPress,1987.]5--30. [2]McGiureJ.Improvedsenaitivityinthe眦删rE眦mofestrogen receptorinhumanbz~.ast?r[J].JCklaEndo~rlnolMetab, l973.53|577—578. [3]TaylorRE.Effectsofendocrinetherapyonsteroidreceptorcon- tertofbreastcaner[J].BrJCa~er,1982,45:8o一85. ]Be~wodaWr,EsmereD,DanseyR.etaLThevalueofestrogen andprogesterone0rdeterminationsinadvancedbreast ean~CJ].Cancer.]991,68f867—878. _5]Me~erWD.LippmanM,WahlM.etaLTheuseofimmunnocy— t.chcem日1techniquesforthedetectionofsteroie[hormonesin breast?rcells[』].Cancer.1980,6;2859--2868. [6]SchsrLA.t—ina0DofestToge~and progesteronereceptorsusingmonoelonalantibodiesinbreast r:Comparisonwithhiochemica[receptoranalysis[J]. Pathology.1989,】0:31—38. [7]HelinHj,He[hMJ,K~l[ioniemJ0,eca】.Immunohistoehemical determination0festrogenondprogesteronereceptorsinhuman- breastcarcinoma:Corz~lafionwithhistopathologyandDNA floweytometry[J].Cancer.1989,63f]761--]767. [胡Rei~ezEstrogen~eeeptoranalysis.力biopsiesandfine—needlea— spiratesand[mmunohistochemiealmethodsuB_mgmoaoctofial antibodiesIT].AmJPathol,1986,125:443--446. [9]MasoodS,DeeS,JeffreyD,et.Irnmunoeytochemlea[analysLs inb~easte~neerg].AmJa.mPathol 1991,96f59—63. [10]Oz~[oL,DeRosaC,DavidV,eta】.An ~luationoftotinfor'~asections.paraffinsec_ tionsB_ldcytologicimprmtsofbreastcaeinoma[J].Cancer, 1991,671455--462. [11]李西融.邱小芬.蜘春宝,等.乳膝肿瘤细针穿刺细胞学雌,孕擞 素受体检测口]_广西医科大学,8000,17(4):56o一568. [12]周禧先.王稚青.乳腺良性肿瘤针暖细胞雌激素受体(ER)的测 定与中医分翌的美系口].实甩中西医结台杂志,1993,(9)571 , 578. [13]田舞蚺.高于芬,韩卷意,辞.乳腺癌c—ethB一8,PS1蛋白增殖 细胞棱抗原和激素受体的表选及意义[J].中华病理学象意, 8000,29(1),56—57. [1妇扬名辩.乳腺癌治疗的研究进展[J].癌症.80o0.19(]1):]047 — 1048. [15]酥允硕,王髓.镣肆,等.乳臃肿瘤雌,孕擞素受体表述与细胞增 殖[J].中国肿瘤临床,8000,87(9);646—648 [16]范宇,傅酉林,王额,等.细胞啊亡及相关基因与乳腺癌预后的 关系的研究rJ].中国肿瘤临床.2000,27(7):524—589. [17]张智慧.膊茂芳,铷树范.Ell,EGFR,P53在乳降癌曲免班组化 研究[J].诊断病理学杂志,1998,5(1):25—27. [18]许炳基,倪灿荣,詹镕洲.乳腺癌中bel一8的表述与激素受体的 相关性[J]肿瘤,2000,80(2),i16一i18. 口9]刘恩齐,王盛乾,扬家祥.乳腺癌雌擞寨受体和孕擞素受体测定 的ABC法与亲和酶标法对比研究[J].肿艚防治研究,]991,18 (4):222—224. [2o]程家暮,饯泫,金凡.等.一种人体雌激素受体和孕酮受体的教 量检测法口]_肿瘟.1992,l2(1):4—6. [21]姚先莹.乳腺击瞻按雌激素受体与胞装雌擞素受体的相关性研 究[J].中华病理学杂志.1998,21(1)37—39. E22]郑橱,Gunduz.针暧乳癌钿船的雌激素受体测定[J].中华肿唐 杂志,1985.(5)348--350. [z3]棣苓,刘尚康,沈镇宙,等.乳腺癌针I爰静片的雌激素受体酶 联雌二醇组化检猫{岳D].肿瘤.1989,9(3):126一lz7. [24]高维实.胡晓蔚.张境,等.细针穿刺乳腺癌检测雌擞素受体的 研究『J]_中华实验外科杂卷,1998.15(3);835--837. [25]贺青卿.荆步兰.单札成.等.乳腺肿瘤细针穿刺细拖DNA和 RNA古量的定量研究[J].中国肿瘤枯床.]997.24(12):914— 915 [26]泉小蒙.张长罹.黄受方.乳腺癌针嗳涂片检测性激素受体[J]. 诊断病理学杂意,1998,5(3){]29一]31. [27]牛保华,盂敢,粟安刚,等.乳腺癌针暧细胞性擞素受体的检测 及意义[J].开封医专,1999,18(z):6—7 (收辅日期:2o00—18--19) [责任编辑邓德曼] ? 243?