嗜银细胞

GRIMELIUS - PASCUAL'S MODIFIED – 嗜银细胞 目的：类似亲银细胞，大量存在同一部位。亲银细胞对嗜银技术呈阳性反应。而嗜银细胞不能对嗜银技术呈阳性反应，此程序被用于良性肿瘤的鉴别。 原理：嗜银细胞能被银浸透，但需要还原剂将银还原可见的金属银。而亲银细胞既可以被银浸透，又直接能将银还原。 对照：含嗜银颗粒或小肠组织。 固定：10% 甲醛 技术：4μ石蜡切片 设备：酸洗玻璃器皿，pH 计，微波炉 试剂： 柠檬酸液： 蒸馏水Distilled water 1000.0 ml 0.3%柠檬酸 Citric acid 50.0 ml 逐滴加入0.3%柠檬酸，直至pH值稳定为4.2，用后丢弃 警告：避免接触和吸入。 1%硝酸银： 硝酸银Silver nitrate 0.5 gm 柠檬酸液Acidulated water 50.0 ml 新鲜配制，用后丢弃。 警告：避免接触和吸入。 还原液： 无水亚硫酸钠Sodium sulfite, anhydrous 2.5 gm 对苯二酚Hydroquinone 0.5 gm 柠檬酸液Acidulated water 50.0 ml 新鲜配制，用后丢弃。 警告：避免接触和吸入。 安全：穿戴手套、护目镜和白大衣。避免接触和吸入。 硝酸银：对皮肤和眼睛有强烈刺激性。氧化剂。摄入可能引起严重胃肠道不适。可能致癌：可疑的致癌因素 亚硫酸钠：摄入毒性，对胃有刺激性，对皮肤、眼睛和呼吸道有刺激性。 对苯二酚：对皮肤和眼睛有刺激性。侵入途径为吸入和摄入。老鼠长期接触产生膀胱癌。 程序： 1. 脱蜡至水，柠檬酸液。 2. *1%银液，微波80火力，50seconds，保留溶液。 3. 热柠檬酸液稍洗。 4. *加热的还原液，微波高火55 seconds。玻片置于热溶液中3-5 minutes，保存溶液。 5. 热柠檬酸液洗3次 6. *1%银液，微波80火力，30seconds。 7. 热柠檬酸液稍洗。 8. *再加热的还原液，微波高火5 seconds。玻片置于热溶液中1-2 minutes，直至镜检见黑色的细胞质内颗粒，如果需要可重复6-8项。 9. 流水冲洗几分钟。 10. 脱水、透明和封固。 *传统方法。： 2. 银液，60°C，1 hour. 4. 热还原液，58°C，5 minutes. 6. 银液，58°C，10 minutes. 8. 热还原液，58°C，10 minutes。 结果： 嗜银细胞黑色 背景黄-金黄色 参考文献： Pascual JS, A New Method for Easy Demonstration of Argyrophil cells. Stain Tech, 51:231-235, 1976 Sheehan D, Hrapchak B, Theory and practice of Histotechnology, 2nd Ed, 1980, pp 278-279, Battelle Press, Ohio Crookham,J, Dapson,R, Hazardous Chemicals in the Histopathology Laboratory, 2nd ED, 1991, Anatech 程序卡 GRIMELIUS - PASCUAL'S MODIFIED – 嗜银细胞 对照：含嗜银颗粒或小肠组织。 技术：4μ石蜡切片 程序： 1. 脱蜡至水，柠檬酸液。 2. *1%银液，微波80火力，50seconds，保留溶液。 3. 热柠檬酸液稍洗。 4. *加热的还原液，微波高火55 seconds。玻片置于热溶液中3-5 minutes，保存溶液。 5. 热柠檬酸液洗3次 6. *1%银液，微波80火力，30seconds。 7. 热柠檬酸液稍洗。 8. *再加热的还原液，微波高火5 seconds。玻片置于热溶液中1-2 minutes，直至镜检见黑色的细胞质内颗粒，如果需要可重复6-8项。 9. 流水冲洗几分钟。 10. 脱水、透明和封固。 *传统方法。： 2. 银液，60°C，1 hour. 4. 热还原液，58°C，5 minutes. 6. 银液，58°C，10 minutes. 8. 热还原液，58°C，10 minutes。 结果： 嗜银细胞黑色 背景黄-金黄色 柠檬酸液： 蒸馏水Distilled water 1000.0 ml 0.3%柠檬酸 Citric acid 50.0 ml 逐滴加入0.3%柠檬酸，直至pH值稳定为4.2，用后丢弃 警告：避免接触和吸入。 1%硝酸银： 硝酸银Silver nitrate 0.5 gm 柠檬酸液Acidulated water 50.0 ml 新鲜配制，用后丢弃。 警告：避免接触和吸入。 还原液： 无水亚硫酸钠Sodium sulfite, anhydrous 2.5 gm 对苯二酚Hydroquinone 0.5 gm 柠檬酸液Acidulated water 50.0 ml 新鲜配制，用后丢弃。 警告：避免接触和吸入。