保健食品中油酸、亚油酸、亚麻酸检测方法

保健食品中油酸、亚油酸、亚麻酸检测 亚油酸的测定方法(气相色谱法) A1.1方法提要 样品经三氟化硼甲醇甲酯化后，用正己烷提取，经DEGS气相色谱柱分离，并附氢火焰离子化检测器测定，用相对保留时间定性，与标准系列的峰高比较定量。 A1.2 仪器 A1.2.1 气相色谱仪;附氢火焰离子化检测器。 A1.2.2 超级恒温水浴:精度(?0.1?)。 A1.2.3 Eppendorf管(mP管):0.5-1.0mL。 A1.3 试剂 所用试剂除注明者外，均为纯;水为重蒸馏水。 A1.3.1 0.5mol/L氢氧化钠甲醇溶液:称取2.0g氢氧化钠溶于少量无水甲醇中，并稀释定容至100mL。 A1.3.2 饱和氯化钠溶液:称取72g氯化钠溶解于200ml蒸馏水中。 A1.3.3 三氟化硼甲醇溶液:量取浓度约为47%三氟化硼乙醚溶液30mL，加入到75mL无水甲醇中，混匀。 A1.3.4 正己烷。 A1.3.5 甲醇:优级纯。 A1.3.6 标准储备液:准确称取0.050g 亚油酸标准品，用正己烷溶解，并定容于10mL容量瓶，此标准储备液亚油酸浓度为5.0mg/mL。 A1.3.7 标准使用液:将标准储备液用正己烷稀释成亚油酸浓度为1.00、2.00、3.00、4.00、5.00mg/mL。 A1.4 测定步骤 A1.4.1 样品处理:准确吸取10-20μL样品于10mL具塞比色管中，加入0.5mol/L氢氧化钠甲醇溶液2mL，充氮气，加塞，于60?水浴中(约10min)至小油滴完全消失。加入三氟化硼甲醇溶液2mL，混匀，于60?水浴中放置30min，取出冷却至室温，加入饱和氯化钠2mL和正己烷0.5mL，充分振荡萃取，静置分层。取上层正己烷液于EP管中，加少量无水硫酸钠，充氮气，于4?冰箱中保存，备色谱分析。 A1.4.2色谱参考条件: 色谱柱:玻璃柱或不锈钢柱，内径3mm，长2m。内充填涂以8%(质量分数)DEGS，1%(质量分数)HPO固定液的60-80目Chromosorb W.AW.DMCS。 34 气体流速:载气N50mL/min(氮气和空气和氢气之比按各仪器型号不同选择最佳比例)。 2 温度:进样口190?，检测器190?，柱温160?。 进样量:1μL。 A1.4.3标准曲线的绘制:用微量进样器准确取1μL标准系列各浓度标准使用液注入气相色谱仪，以测得的不同浓度的亚油酸的峰高为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线。 A1.4.4样品测定:准确吸取1μL样品溶液进样，测得的峰高与标准曲线比较定量。 A1.5 结果计算 1m，100 X= 2V m，，10001V 式中X———样品中亚油酸的含量(mg/100g); m———测定用样品液中的质量(μg); 1 m———样品的质量(g); V———加入正己烷的体积(μL); 1 V———测定时进样的体积(μL)。 2 A1.6 注释 本法是《保健食品检验与评价技术规范实施手册》(2003版)第五编 第三章 第四节 二十八 EPA和DHA的测定方法的内容，本法同时可以适用于测定EPA、DHA、油酸、亚油酸和亚麻酸，只是色谱条件稍有区别，其他条件相同。