地衣芽胞杆菌BL20386株_整肠生_LD_50_测定

地衣芽胞杆菌BL20386株_整肠生_LD_50_测定 第 10 卷第 6 期Vol110 ,No16 中 国 微 生 态 学 杂 志1 9 9 8 年 12 月 Dec11 9 9 8 () 地衣芽胞杆菌 BL 20386 株 整肠生L D测定 50 Ξ 天津市第三医院检验科 300250 骆稽酉 吴铁林 天津市第二医院 曲淑敏 丁 宏 摘 要 整肠生是以 BL 20386 菌株研制而成的活菌生态制剂 ,该菌在试管内有抑制葡萄球菌 、白色念珠菌生长 ,促进大肠杆菌繁殖作用 ;对纠正肠道菌群失调及其它肠道病有一定疗效 。本 试验旨在测定 L D为临床安全使用提供依据 ,其结果提示该药使用是安全的 。 50 L D50 关键词 整肠生 地衣芽胞杆菌 BL 20386 株 整肠生是以 BL 20386 菌株研制而成的活,累计观察 72 小时内小白鼠死亡数 。温下饲养 115 预试验 菌生态制剂 。BL 20386 菌株是一种需氧芽胞杆 11511 最大最小平均法。给予每个剂量 菌 ,经第 203 医院微生态室及中国科学院微生 一只小白鼠腹腔注射 , 剂量逐渐增大 , 72 小时 物研究所鉴定为“地衣芽胞杆菌”。该菌在试 ( ) ( ) 内连续观察 ,则其生存 - 与死亡 + 情况出 管内有抑制葡萄球菌 、白色念珠菌生长 , 促进 现为 : 大肠杆菌繁殖作用 。该菌的活菌制剂“整肠 生”对纠正肠道菌群失调及其它肠道病具有一 定疗效 。 160mg/ kg 275mg/ kg ? ? 本试验测定 BL 20386 菌株 L D,旨在了解 50 该菌的生物毒力与毒性 ,为确定临床安全范围 - - - - + - - + - + + - + + + - + + + + 提供依据 。 ?最小致死量 最高忍受量 ?1 与 即 :从开始死亡剂量与开始全部死亡剂量平均 ) ( 值 :L D= 最小致死量 + 最高忍受量/ 2 = 50 () 160 + 275/ 2 = 218mg/ kg 。 111 菌种 先将 BL 20386 菌株接种于营11512 寇氏法 选择小白鼠 , 按体重分 养琼脂面上 ,37 ?下 ,培养 24 小时 ,然后将菌配于各组 ,每组 5 只 ,共设 1 、2 、3 、4 和 5 组 。按 苔制成 10 %盐水悬液 , 作为计数试验的原液 , 各组给菌量及小白鼠体重配制成不同浓度应 经稀释培养计数证明 ,每 mg 湿菌活菌 3000 亿 用菌液 ,小白鼠腹腔注射 。高剂量组要求死亡 个 。本试验所用剂量按 mg 计算 。 率能达 90 %以上 , 中剂量组死亡率能达 40 — 112 应用菌液 取上述菌苔若干 mg ,加 60 % ,低剂量组死亡率能达 0 —10 % ,每两个相 少量盐水稀释 ,充分混均 ,计算每 ml 含菌苔 mg 邻剂量须有一定比例关系 。剂量参考最 量 ,按各试验组设置剂量 ,给每只小白鼠菌量 , 大最小平均法所得值 , 进行试验 , 以找出适当 取上液 ,加盐水至 014ml ,作为注射应用菌液 。 剂量及比例关系 。 113 动物 本试验所有小白鼠由哈尔滨 医科大学动物室提供 , 试验前经过严密观察 , 体重一律选择在 16,22g 之间者 。 ( )116 正式试验 寇氏法 接种动物 , 选114 给菌方法 各试验组 , 每只小白鼠 择小白鼠 , 每组 10 只 。按预试验所得给菌量按体重 ,取已配好应用液 014ml ,一次性腹腔注 分成 120 、160 、210 、275 、360mg/ kg 五个试验 组 ,配好应用菌液 014ml , 进行小白鼠腹腔注 014ml ,72 小时内连续观察 。 各试验组动物死亡统计 ,见表 1 。 2 结果 表 1 寇氏法 L D计算表 50 ( ) X+ X死亡率对数剂量+ XP- P X组号剂量实验动物死亡动物1 1 + 21 1 + 2 1 + 2 1 ( )PXP- P i mg/ kg 数数ii1 + 2 1( )( )1 2 ( )( )( )( )( ) ( ) ( )3 4 ( )( )7 8 78= 9 5 6 1 120 10 0 0 108 128 12 186 24002120 4152 013 1136 2 160 10 2 012 3 210 10 5 015 2132 4176 013 1143 2144 510 012 110 018 4 275 10 8 5 360 10 10 110 2156 4165 = 0 . 03 给药后的中毒症状 开始出现竖毛 ,弓体( ) 代入公式 3 L D的 95 % 可信区间 = log - 1 活动减少 ,出现扭体反应 ,昏睡不食 ,呼吸微弱 50 - 1 (( ) 2133 - 1196 ×0103- log 2133 + 1196 × 而死 ,死前无惊厥 ,死亡多发生在给药 12 - 36 小时内 。 ) 0103= 21318 ?2716mg/ kg9 93 讨 论 L D= 21318 ×3000 ×10?2716 ×3000 ×10 50 12 12 寇氏公式 : = 64114 ×10?8218 ×10个菌/ kg , 重复上 述试验 , 取均值为 21713 ?2419mg/ kg 。试验 ( ) ( ) () logL D= [ 6 X+ XP- P] 150 i i + 1 i + 1 i 中动物中毒症状主要为中枢神经系统的深度 抑制 。实验结果提示 ,本菌株活菌生态制剂整 ()( ) () 2 6 Pi 1 - Pi?Ni - 1] SlogL D= d 50 肠生使用是安全的 。 ()3 LD的 95 %可信区间 = lgLD?196SlgLD 5050 50 参考文献式中 Pi 为死亡率 。 [ 1 ] 康白 1 微生态学 1 第一版 1 大连出版 11988 ; 173 剂量等比级排列即 : - 177 ( ) [ 2 ] 桂苡 1 大连医学院学报 11984 ;6 1:17 ddd 23kI = log = log = log [ 3 ] 上涨市卫生防疫站编 1 卫生防疫检验 1 上海科学 ddd1 2k - 1技术出版社 11963 ;864 - 870 已知 :[ 4 ] 吴铁林 1 地衣芽胞杆菌 BL 20386 株特性及其生 I = log160/ 120 ? log210/ 160 ? log275/ 210 ?( ) 态制剂的研究 1 中国微生态学杂志 11990 ; 2 2: ()log360/ 275?0112 ,代入公式 1 12 ( ) logL D= 6 4 . 65/ 2 ,L D= 21318mg/ kg ,代 50 50 [ 5 ] 实 用 医 学 统 计 手 册 1 福 建 科 学 技 术 出 版 社 ()入公式 2 11985 ;253 - 264 ( )收稿日期 :1998 - 03 - 03 SlogL D= 0112 50 0 ×1 0 . 2 ×0 . 80 . 5 ×0 . 5 0 . 8 ×0 . 2 1 ×0+ + + + 9 9 9 9 9 () 356 页 ,很可能造成微生态失调 ,回春生及其他原因 上接 作为一种安全 、无毒 ,无副作用的微生态调节 缩短腹泻促进肺炎恢复的良好作用 。如表 2 剂 ,将有无限的运用前途 。 示 ,观察组腹泻时间及原发病住院时间均较对 参考文献 照组有所缩短 ,证明回春生治疗婴幼儿肺炎腹 ( [ 1 ] 中国腹泻病诊断治疗 中国卫生部 1993 年 泻确有效果 ,且未见不良作用 。 ) 10 月修订1 临床儿科杂志 11994 ;12 :148 正常肠道微生物群与宿主维持微生态平 [ 2 ] 陈树宝主编 1 儿科学新理论与新技术 1 上海 : 上 衡 ,对机体的营养 、免疫 、生物拮抗等方面发挥 海科技教育出版社 11997 ;414 [ 2 ] ( )重要的作用。肺炎时广谱抗生素大量应用 收稿日期 :1998 - 05 - 22