ABO血型实验结果矛盾解析

ABO血型实验结果矛盾解析 ABO血型实验结果矛盾解析 2011年第46卷第5期生物学通报15 ABO血型实验结果矛盾解析 原素梅郝燕1任吉莲2 (1山西医科大学汾阳学院微生物学和免疫学教研室I西汾阳032200 2山西医科大学汾阳学院临床检验学和【0l液检验学教研室山西汾阳032200) 摘要通过观察近千例学生操作步骤,亲自操作以及查阅文献,解析学生实验"ABO血型 测定"结果不一致的原因发现ABO血型测定结果矛盾的原因是:正向定型玻片法灵敏度 低:学生操作技术不规范或者抗原,抗体反应条件不当;低质量的血清试剂:献血车上测定结 果可能错误以及其他小概率事件等.因此在教学实验过程中要求:规范学生操作,培养基本技 能;尽量选用质量稳定,可靠的试剂,培养科学的态度;要重视学生实验中发现的意外结果,培 养学生的创新思维. 关键词ABO血型测定正向定型法操作技术血型变异 中国图书分类号:O337文献标识码:C ABO血型是指红细胞上的A,B抗原或某种 组合,是一种稳定的遗传性状,一般终身不变,控 制其表达的基因有H,A,B.在医学免疫学实验 中,主要考虑到取材容易,试剂购买方便,操作简 便,结果观察不需特殊仪器等冈素,"ABO血型测 定"常作为抗原一抗体反应中观察直接凝集反应 的项目.血型测定的方法很多l】,,鉴于教学的目 的,意义,条件等因素.实验室的"ABO血型测定" 常采用正向定型玻片法,其操作步骤,原理,灵敏 度明显不同于应用于临床,血站及法医学上"ABO 血型的鉴定"的反向定型法,免疫标记技术,基因 分析法等. 所谓"血型测定实验结果矛盾",主要是指学 生反映比较多的"自己测定的血型结果和父母的 血型不符合遗传规律".或者"和以前献血时测定 的结果不一致".正定型玻片法指在实验室用已知 的抗红细胞A,B抗原的单克隆抗体,检测学生自 己末梢血红细胞上是否带有A,B抗原或某种组 合,通过一定条件的反应,肉眼观察载玻片上直接 凝集现象来判断是何种血型.所以解析血型测定 的矛盾结果.还得从免疫学的原理,方法人手,同 时结合学生实验条件的特殊性.下面就影响因素 的概率大小进行分析. 1抗原,抗体反应条件以及操作技术是影响红 细胞A,B抗原测定结果的重要因素 1)抗原,抗体的比例.红细胞浓度与检测抗体 比例合适时,反应最明显.一般红细胞悬液浓度在 2%,5%之问,如过浓,血清中抗体全部被吸 收,呈后带现象,导致不明显凝集或不凝集:反 之,低于2%,抗体浓度相对太高,呈前带现象,也 会发生不易凝集或凝集很弱.另外,因为凝集反应 是红细胞这一颗粒性抗原与抗体的反应,若红细 胞由于某种原因发生溶皿,同样也会影响凝集效 果,出现不明显凝集. 2)抗原,抗体反应的温度.血型测定时,红细 胞和标准血清反应的温度应在20,25?之间,若 反应温度偏高,不利于免疫复合物的形成,温度过 高,还可能引起红细胞呈缗钱状排列;如果反应温 度偏低,凝集现象出现需要的时间延长,若温度过 低(低于10?),可能会产生冷凝集,结果会导致 假凝集.. 3)电解质也是影响反应的重要因素.一般用 0.85%的理盐水配制红细胞悬液,除了不使红 细胞溶血,还要保证抗原,抗体带电性质,数量, 这些素都会影响实验结果的判断. 4)抗原和抗体一定要及时充分混匀.反应的 抗原和抗体一定要及时充分混匀,一般在2, 5min内观察结果.考虑到抗体效价,弱抗原性, 反应温度等因素所致的弱凝集,反应时间可延长 到10min.这时需要注意保证湿度,若时间放置 l6生物学通报2011年第46卷第5期 过长,水分蒸发也可出现红细胞缗钱状排列,导致 假凝集. 5)操作技术熟练程度.在医学院校,做此实验 的学生多为大一或大二学生,还未接触临床,有的 还是第1次采血.学习观察凝集现象,技术不熟练 是肯定的.无论老师怎么强调也可能只是加深了 理论印象.所以第1次做血型测定,受学生操作技 术影响比较大.但若发现了矛盾结果后再次验证 时的测定结果仍然不符,那可能就要考虑其他因 素了.所以在实验时一定要强调,并重点观察学生 采血针,毛细吸管,搅拌棒,移液管,试管,载玻片 等用品的一次性使用情况,规范学生基本操作,避 免检测抗体或血样交叉污染,产生错误结果.同时 让学生对比观察其他学生的阴性或阳性凝集,真 正学会观察凝集现象. 2检测试剂因素 所需血清试剂是IgM类单克隆抗体,其纯度和 效价是关键因素,这些与抗体质量,保存时间和温 度有关,低效价的血清尤其在遇到抗原性较差或弱 表达抗原时,更容易显示不凝集,而且不能检mA, B抗原的某些亚型.故在使用标准血清试剂时应注 意检测血清试剂的效价,有效期及生成批号.总之, 血清试剂不纯,效价太低,亲和力不强,超过有效期 等都可能会产生不正确的结果.尤其在学生实验 中.有时会因为实验经费紧缺和实验结果不指导临 床和提供法律依据,可能使用低质量血清试剂甚至 过期的试剂,这样不但会有异常结果解释不清,更 重要的是会影响学生的学习态度. 3其他引起"ABO血型测定实验结果矛盾"的 因素 1)红细胞上A,B抗原确实能发生改变.血型 抗原是一种较稳定的遗传性状,但在一些特定因 素的影响下,和其他抗原一样,也能发生变化.其 变异的原因也不外乎表型修饰产生的变化和遗传 型变异2种,更多的是表型变异'i3].比如:?由于 感染,肿瘤或长期服用某种药物等因素致使体内 出现类A,B抗原物质,结合在红细胞上,使红细 胞因获得A,B抗原而产生表型修饰;或者由于白 血病,肿瘤,感染,化疗或年龄等因素导致的红细 胞抗原暂时性消失,表达减弱或未完全表达.2种 情况都可导致ABO血型抗原发生变化;?骨髓移 植或大量输入异型红细胞,则表现为外源性的血 型外观:?控制A,B抗原的H,A,B基因任何一 个突变或组合突变都可能造成血型变异或罕见血 型出现.以上?,?种情况多见于医院的病人,对 于检测对象为在校大学生这一特殊群体.红细胞 上A,B抗原发生变异是小概率事件. 2)不符合血型遗传规律的"假象"客观存在. 尤其是近些年来,随着生殖技术提高和生育观的 变化,父母由于生理因素或其他社会因素不能生 育或不愿生育的.领养或借用其他精子或卵子生 育的,甚至非婚生育,产房抱错等情况,也可能造 成不符合血型遗传规律的"假象". 3)大胆设想.从认识论的角度,任何事物都是 在不断变化的,尤其对于不断进化的生物,随着探 索生物技术的不断提高.人们对"ABO血型的遗 传规律"也应该用发展的眼光来看待. 另外,有文献报道.由于献血车上街头采血 模式中的特殊性也偶尔存在血型鉴定错误的情 况所以也不能排除以前自己血型测定结果错误 或父母血型测定结果错误. 分析以上各种因素.如果在实验室里出现 ABO血型测定结果不一致.首先排除学生操作不 规范造成的血清或红细胞交叉污染,检查抗体和 红细胞反应条件是否合适,血清的效价水平等主 要因素考虑到正向定型法本身灵敏度偏低的局 限性,可用"反向定型法",免疫标记技术,基因分 析法等排除自己或父母血型抗原减弱,ABO亚 型,红细胞覆盖或修饰新抗原,自己与父母的血缘 关系等其他小概率事件.但是不要轻易用"你肯定 是记错了"等搪塞学生.另外,还要提示教学有关 部门学生实验教学中还是要尽量选用质量稳定, 可靠的血清,不要用过期的试剂,也许这一次血型 测定结果指导临床的意义不是很大.但对培养学 生形成科学,严谨的学习态度,创新思维习惯有重 要影响.尤其对那些会产生重要临床意义的实验, 实验结果的准确,意外实验结果的发现,对医学生 今后临床工作敏锐性,警觉性的培养也是非常重 要的.当然如果通过这项实验确实发现了学生或 其父母一些疾病的蛛丝马迹,或一新的血型变异 型等其他情况,甚至血型遗传规律的例外,在医学 生中开展"ABO血型测定实验"的意义将更深远, 2011年笫46卷第5期牛物学通报17 容易张冠李戴的植物 陈瑞(广东河源职业技术学院人文学院广'东河源517000) 摘要采用图文对照的方式,介绍了罗汉松与罗汉果,雪莲与雪莲果,鸡蛋花与鸡蛋 果等 10种容易被张冠李戴的植物的名称来由和形态上的畀同点等内容,有助于读者正 确地识别和 利用它们 关键词识别张冠李戴植物 中国图书分类号:Q949文献标识码:E 在日常生活中,有一些植物很容易望文生义 而闹笑话,如:认为罗汉果是罗汉松的果实,把外 形酷似甘薯,甘甜爽口的雪莲果f菊薯1看作天山 雪莲的果实.人参果是人参的果实等等.为此,笔 者将一些生活中常见的易产生误解的植物及果实 作一个比较和分析,便于读者正确地识别它们. 1罗汉松与罗汉果 不少人误认为味甘性凉,有清热润肺,止咳化 痰,用于泡茶喝的罗汉果是罗汉松的果实,其实它 们是完全不同的植物.罗汉松(Podocampus macrophyllus),为裸子植物门罗汉松科罗汉松属 的常绿小乔木,是常见重要的庭院观赏植物和盆 景植物.由于成熟的种子和种托好似一个个披着 袈裟的罗汉,由此得名"罗汉松".其叶密生,革 质,狭披针形:雄花黄绿色,菜荑花序状;无真正 的果实.种子核果状,颜色从青绿色变为熟时的淡 紫色.其种柄会膨大为肉质味甜色艳可食的种托. 而罗汉果(Siraitiagrosvenoni),为被子植物门双子 叶纲葫芦科苦瓜属的多年生落叶攀援藤本.是药 食两用的经济植物.其叶心形宽大,茎细,有茎卷 须;花冠橙黄色,果为圆形瓠果.其果营养价值丰 富,被誉为"东方神果".它富含天然果糖及多种 更有价值. 另外.ABO血型实验结果矛盾解析对其他 ABO血型实验方法(如反向定型法),其他m型系 统(如Rh血型)的测定实验,甚至临床检验人员 也有借鉴意义. 主要参考文献 人体必须的微量元素,维生素,蛋白质和氨基酸. 热含量极低,常用于肺火燥咳,口因痛失音,肠燥便 秘等症,是清凉饮料之佳品,且对支气管炎,高血 压等疾病有显着疗效,对防治冠心病,肥胖症的也 有明显作用.传说是广西瑶族的一位叫罗汉的乡 村医生,最先用其果实人药医治咳嗽等病,人们为 纪念他而取名"罗汉果". 2雪莲花与雪莲果 雪莲(Saussureainvolucrata),为菊科风毛菊属 的多年生草本植物,分布新疆,两藏等高山雪线附 近,形似莲花而得名"雪莲".其根黑,叶绿,苞白, 花紫.性耐严寒,生长缓慢,4,5年后开花结果. 全草含伞形花内酯,东莨菪素,芹菜素等,有除 寒,抗菌,降压镇静,解痉,祛风,止痛,祛痰和抗 肿瘤作用等作用.由于被疯狂盗挖,野生资源日渐 减少,应注意保护.而雪莲果(SmallanthUSsonchi. folius).为菊科杯苞菊属的多年生草本植物,原产 南美洲的安第斯山.由于其块根食味清香,与雪莲 花的香味相近而得名"雪莲果".其块根形态酷似 甘薯,又是菊科植物,故其又被称为菊薯.其高约 2,3ITI,叶对生,阔叶形如心状:侧根逐渐膨大为 甘薯状的块根:花黄色,头状花序顶生,酷似向日 d:areviewandupdate.TransfilsClinBio1.2009,16(4):388--99. 2DavidJ.A..Redcellgenotypingandthefutureofpretransfusi— ontesting.blood.2009.114(21:248—256. 3邵超鹏.庄乃保.血型变异与临床输血.巾国输血杂志, 2009.22(7):591—594. 4胡军路,许德义.陈伟岳.街头献血者ABO血型初检定型错 误原因分析.现代实用医学,2005,17(12):776—777. (E—mail:ysm510@sohu.toni)