涂片找抗酸杆菌的标准操作规程
*******医院 * 版 本 号:1.0
检 验 科 文 件 号:JY-JY-CZ-JH-120
作 业 指 导
页 码:第1页 共6页 涂片找抗酸杆菌的标准操作规程 生效日期:2012年11月01日 编制人: 审核人: 批 准 人:
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员工培训记录
签 名 日 期 签 名 日 期
年度审核记录
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作 业 指 导 书 页 码:第4页 共6页 涂片找抗酸杆菌的标准操作规程 生效日期:2012年11月01日
涂片找抗酸杆菌的标准操作规程 1 检验目的
检验样本中是否含有抗酸杆菌,为临床提供诊断依据。 2 原理
结核菌、麻疯杆菌、耻垢菌等抗酸性菌,因其菌体
面有一层脂或脂质之皮膜不易着色,但一经着色后酸或乙醇的作用亦是不容易把它脱色。利用这特性并以增强的染色液予染色,然后再以酸及乙醇加以处理,使其脱色后再对比染色,此时抗酸性菌仍是固定着最初色素的颜色(红色)。
3标本要求
(1)标本类型:病人的痰、穿刺关节液、腹水、胸积液、组织、脑脊液、分泌物、尿液等
(2)标本采集:见标本采集手册(一般须得深咳痰,其它无特殊要求。)
(3)标本储存和运输:可室温保存、室温运送。病人标本须密封运送以避免污染环境。
4 容器和添加剂类型
痰盒、试管等
6 试剂
(1)试剂名称:结核菌染色液
(2)试剂生产厂家:贝索
(3)包装规格:4X250ML
(4)试剂盒组成:
试剂1:石碳酸复红液
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作 业 指 导 书 页 码:第5页 共6页 涂片找抗酸杆菌的标准操作规程 生效日期:2012年11月01日 试剂2:酸性酒精溶液
试剂3:亚甲基蓝溶液
7仪器设备:
奥林巴斯CX-21显微镜
8 校准程序
送无锡市计量质量检测研究所校准
9操作步骤
1、取待检标本1-2ml置于玻璃管中,加入3ml0.5%NAOH溶液。 2、将玻璃试管放入试管架并用水煮沸灭菌30min。
3、等冷却经4000转/min离心20分钟后取沉淀涂片检查。 4、涂片经火焰固定,加石碳酸复红液染色5分钟或更久(需加温)。 5、水洗(之后尽可能将水沥干)。
6、加酸性酒精溶液,脱色1-2分钟。
7、水洗(假如标本面还可以看到残存红色时,再加酸性酒精溶液脱掉红色为止)。
8、加亚甲基蓝溶液染色30秒,水洗,干燥。
9、镜检。
10质量控制:
参加我科质量管理组的质量控制活动。
11干扰和交叉反应
麻风菌可能对检验结果产生影响。
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作 业 指 导 书 页 码:第6页 共6页 涂片找抗酸杆菌的标准操作规程 生效日期:2012年11月01日 12生物参考区间
涂片未见抗酸杆菌
13患者检验结果的可
区间
涂片未见抗酸杆菌/涂片见细长、红色抗酸杆菌
阴性: 全视野未找到抗酸杆菌
,: 全视野发现3,9个抗酸杆菌
,,: 全视野发现10,99个抗酸杆菌
,,,: 每视野发现1,9个抗酸杆菌
,,,,: 每视野发现10个以上抗酸杆菌
(全视野发现1,2个抗酸杆菌时,报告抗酸杆菌个数) 14临床意义:
结核分枝杆菌不产生内毒素和外毒素,其毒力主要是在机体中细胞内、外生长与大量繁殖的能力,细菌成分与其代谢产物引起免疫反应(?型)导致一系列组织学上的意义。
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