【word】 果蔬中二甲戊乐灵、氟乐灵、双丁乐灵残留测定

【word】 果蔬中二甲戊乐灵、氟乐灵、双丁乐灵残留测定 果蔬中二甲戊乐灵、氟乐灵、双丁乐灵残留 测定 检测分析 食品研究与并发 FoodResearchAndDevelooment 2011年9月 第32卷第9期 果蔬中二甲戊乐灵,氟乐灵,双丁乐灵残留测定 陈其勇,郑文杰,肖亚兵,王云凤,常春艳 (天津出入境检验检疫局,天津300456) 摘要:采用基质分散固相萃g~(MSPD)为样品前处理方法,建立气相色谱一串联四极杆质谱快速检测蔬菜,水果中 二甲戊乐灵,氟乐灵,双丁乐灵残留分析方法.果蔬类样品经乙腈提取,乙二胺一N一丙级甲烷(PSA)分散固相(DSPE) 净化后,应用气相色谱/四级杆质谱仪多离子反应监测(MRM)定量检测.结果表明,在0.005mg/kg~0.2mg/kg添加水平 内二甲戊乐灵,氟乐灵,双丁乐灵的平均添加回收率在78.5%,109.3%之间,相对标准偏差不大于8.8%. 关键词:基质分散固相萃取;果蔬类样品;二硝基苯胺类除草剂;测定 DeterminationofThreeDinitroanilineHerbicideinFruitsandVegetablesusi ngMSPD—GC—MS/MS CHENQi-yong,ZHENGWen-jie,XIAOYa—bing,WANGYun—feng,CH ANGChun—yan (TianjinEntry-ExitInspectionandQuarantineBureau,Tianjin300456,China) Abstract:Arapidmethodforthedeterminationofpendimethalin,trifluralinandbutralinresiduesinvegetables andfruitswasestablishedbasedonmatrixsolid-phasedispersionandgaschromatography-massspectrometry (GC-MS/MS).Thesamplewasextractedbyacetonitrileandthenpurifiedbypramimarysecondaryamine (PSA).ThethreedinitroanilineherbicideresidueswasanalyzedbyGC—MS IMSundermultiplereaction monitoringmode.Averagerecoveriesofthreedinitroanilineherbicideinvegetablesandfruitssampleswere foundintherangeof78.5%一 109.3%andthrespikinglevelsfrom0.005mg/kgto0.2mg/kgwithrelative standarddeviationslessthan8.8%. Keywords:MSPD;fruitsandvegetablessample;’dinitroanilineherbicide;d etermination 二甲戊乐灵(pendimethalin),氟乐灵(trifluralin)及 双甲乐灵(butralin)是在我国应用比较广泛的3种二硝 基苯胺类选择性土壤处理除草剂,其农药残留对后茬 作物会产生危害.二甲戊乐灵被认为是可疑的内分泌 干扰剂和可能的致癌物质_lJ,氟乐灵也可能会对大鼠肝, 肾微粒体酶产生影响闭,欧洲已有国家(组织)禁用或限 用此类农药,其他国家也对这3种农药提出了严格的限 制指标.有关资料显示,美国近几年的大豆除草剂种类 调查中,氟乐灵和二甲戊乐灵的使用量仅次于草甘膦网. 在已报道的果蔬类样品中关于二甲戊乐灵等药物 农药残留的测定中,大多采用传统的液一液萃取(LLE) 法提取样品中目标物.这种方法消耗大量有毒有害 的有机溶剂,繁琐费时,而且在萃取过程中容易产生大 量乳化液,影响萃取效率.自1989年美国Louisiana}~l立 基金项目:天津出入境检验检疫局资助项目(TK017—2009) 作者简介:陈其勇(1978一),男(汉),高级工程师,硕士,主要从事农 兽药及食品添加剂残留检测技术研究. 大学Barker教授首次提出基质固相分散(MSPD)技术[61 后,该技术已在蔬菜,水果等农药残留检测中得到一定 的应用. 目前,该类除草剂残留检测方法以GC/ECD或GC/ MS居多,检测对象以土壤,水,果蔬等样品为主.文 献检索表明,目前鲜见应用MSPD样品处理并采用GC— MS/MS分析果蔬中以上二甲戊乐灵,氟乐灵,双丁乐灵 多残留检测的相关报道.本研究优化MSPD条件,并采 用GC—Ms/Ms测定提取液中的目标化合物,满足果蔬 类复杂机体的定性及定量需要. 1材料与方法 1.1仪器与试剂 TSQQuantumXLS串联四极杆气质联用仪:美国 ThermoFisherScientific公司,配置电子轰击电离(EI) 源;T一25型组织匀浆机:德国IKA公司;氮吹仪:美国 Organomation公司;离心机:美l~Sigma公司. —===156陈其勇,等:果蔬中二甲戊乐灵,氟乐灵,双丁乐灵残留测定检测分析 乙腈,正己烷,乙酸:美国Fisher公司;色谱纯;PSA 填料,Cl8填料:美国Waters公司;无水硫酸镁,氯化钠 为分析纯:天津化学试剂二厂;二硝基苯胺类除草剂标 准品:美国Sigma公司;以正己烷稀释成1mg/mL的储备 液,临用时根据需要用正己烷稀释成适当含量的混合 标准溶液. 1.2方法 1.2.1样品的提取 准确称取10.0g试样7:50mEn旋盖聚丙烯离心管 中,加入5g无水硫酸镁,2g氯化钠,10mL0.5%乙酸 乙腈溶液.10000r/min均质1min.7000r/min离心5min, 取上清液转移至15mL螺旋盖聚丙烯离心管. 1.2.2样品的净化 将上述样品转移到事先装有300mg无水硫酸镁, 200mgPSA填料的小试管中;充分涡旋1min,过0.22m 滤膜,供气相色谱串联质谱测定. 1.2I3气相色谱一质谱条件 色谱柱:TR一5MS色谱柱,15mx0.25mm(内径)× 0.25m;柱温:初始温度50oC(1min),以25~C/min升至 150oC,再以10~C/min升至250oC,最后以35%/min升至 290?,保持5min;进样口温度:200oC;色谱质谱接口 温度:280oC;载气:氦气;进样方式:不分流进样,1min 后开阀;离子源:EI源;离子源温度:250?;电子能量: 70eV;溶剂延迟时间:4min;扫描方式:反应离子监测 模式(MRM);定量离子对及碰撞能量见表1. 表1选择离子,碰撞能量及保留时间 Table1Selectedions,collisionenergyandretentiontime 农药名称保留时间/rain母离子l(m/z)子离子/(m/z)碰撞能量/V 注:n定量离子,对于不同质谱仪器,仪器参数可能存在差异,测定前 应将质谱参数优化到最佳. 2结果与讨论 2.1提取条件的选择 MSPD法快速农药多残留分析方法通常采用振荡 提取,改进后的方法采用均质提取,提取效率更高,尤 其对于纤维较长,不易制备为均匀试样的果蔬类样品 更为合适.提取溶液为经正己烷饱和的乙腈溶液,在一 定程度上降低了提取溶剂的极性,降低了含水基质提 取液中的水含量,从而减轻了后续的除水压力. 2.2净化条件的选择 乙二胺一N一丙级硅烷(PSA)吸附剂能够清除许多 极性基质成分如来自样品共萃取物的脂肪酸,亲脂性 色素和糖类等,而十八烷基硅烷(ODS),石墨化炭黑去 除维生素,色素,甾醇的能力较好,然而石墨化炭黑碳 黑具有强吸附性,会造成平面型农药(极性芳香族化合 物)的流失,使一些农药不易洗脱.本研究采用气相色 谱/四级杆质谱仪多离子反应监测(MRM)测定目标化 合物,仪器本身具有较强的高分辨,高质量精度及选择 性,所以综合考虑,本研究最终采用单一的PSA作为净 化剂,效果良好. 2.3不同色谱柱的比较 本研究对两种不同色谱柱:THERMOTR一5MS SQC15mxO.25mmIDx0.25m[其有效成分为5% phenyl(equiv)polysilphenylene-siloxane]与Rxi-5ms30mx 0.25mmIDx0.25Ixm(其有效成分为5%diphenyl/95% dimethylpolysiloxane)进行比较,发现Rxi一5ms虽然在总 离子流色谱图上有更好的分离效果,但THERMOTR一 5MS总体分析时间仅为Rxi一5ms色谱柱的一半,能达到 快速测定的目的,故最终采用TR,5Ms色谱柱进行测定. 2-4标准曲线及线性范围 以正己烷为溶剂配制3种二硝基苯胺类除草剂的 系列混合标准品溶液,以峰面积为纵轴,浓度为横轴制 作标准曲线,得到各种农药的线性方程及相关系数,结 果见表2. 表23种二硝基苯胺类除草剂的线性回归方程及相关系数 Table2Theregressionequation,Rofelevendinitroaniline herbicides 由表2可以看出,在1.0ng/mL,20.0ng/mL质量浓度 范围内3种农药的线性关系均良好,混合标准工作溶液 的总离子流色谱图见图1. 2.5方法的回收率与精密度 采用标准添加法,选择卷心菜,橙与洋葱基质,在 3种基质中分别添加0.005,0.01,0.02mg/kg水平的3种 二硝基苯胺类除草剂混合标准,每个加标水平平行测 定7次,结果表明,方法的平均回收率范围在78.5%, 109.3%之间,相对标准偏差小于8.8%,满足国内外对 残留分析的要求.0.005mg/kg添加水平的二硝基苯胺 类除草剂在洋葱中的加标回收及空白谱图见图2. 检测分析陈其勇,等:果蔬中二甲戊乐灵,氟乐灵,双丁乐灵残留测定 R116.0O一10.99 6.O6.57.O7.58.O8.59.09.510.010.5 时间\min 图1氟乐灵,双丁乐灵及二甲戊乐灵混合标准溶液总离子流色谱圈 Fig.1GC/MS-MStotalionchromatogramofpendimethalin,trifluralinand 检测分析 jj/\77.33 j6’\, 9.IlJ 1 9.76 0 厂\\9_98/\1o.111链48 0人们 刀/.9.5O9.559609.659.709.759暑09.859-9099510.0O10.O51O.1010.15l0.2O1O.2510.3010.35104010.451 0.50 Time/n-fin 圈2洋葱样品空白及添加O.005mg~g-硝基苯胺类除草剂标准物质MRM色谱图 Fig.2MRMchromatogramsofblankonionsampleandspikedwith0.005m~/ kgbifenoxstandard 3结论 本研究通过对果蔬类样品中二甲戊乐灵,双丁乐 灵,氟乐灵提取,净化,分析测定的方法研究,建立可 靠,灵敏,准确,快速的MSPD—GC—MS/MS法测定果蔬 类样品中的二硝基苯胺类除草剂残留量测定方法,方 法的灵敏度达到0.005mg/kg,完全满足目前日本,欧盟 等国际上对二硝基苯胺类除草剂的残留分析要求. 参考文献: 【1]张智超,曾敏,李朝阳,等.以涂敷硝酸银的碱性氧化铝为分散 剂的基质固相分散法测定大蒜中二甲戊灵残留?.农药,2005,7 (3):264-268 [2】杜柳涛,邬惠琼,杨兴芬,等.氟乐灵对大鼠肝,肾微粒体酶的影 响『JI_中国职业医学,2000,27(5):16—18 [3]霍江莲,李军,葛毅强,等.二硝基苯胺类除草剂残留检测技术 的研究进展lJ1.农药,2004,45(4):222—225 [4]黄雅丽,毛黎娟,吴慧明,等.二甲戊乐灵在甘蓝及土壤中的残 留及消解动态研究硼.农业环境科学,2004,23(6):1147—1150 [5]杨挺,朱勇,赵健,等.豆类蔬菜中二甲戊乐灵残留检测方法研 究lJ1.食品科技,2006,31(10):246—248 [6]BarkerSA,LongAR,ShonCR.IsolationofDrugResidusfrom TissuesbySolidPhaseDispersion[J].Chromatogr,1989,475(2):361— 363 [7]SchenckFJ,HobbsJE.Evaluationofthequick,easy,cheap, effective,ruggedandsafe(QuEChERS)approachtopesticideresidue analysis[J].BullEnvironContamToxico,2004,73(1):24—30 收稿日期:2010—12—15 }三????0????加0?舳??加O?舳?蚰加0