河北省元氏县孕晚期妇女叶酸受体抗体IgG状况及其与叶酸水平关联性

河北省元氏县孕晚期妇女叶酸受体抗体IgG状况及其与叶酸水平关联性 河北省元氏县孕晚期妇女叶酸受体抗体 IgG 状况及其与叶酸水平关联性 袁悦，刘建蒙，王琳琳 5 (北京大学生育健康研究所/卫生部生育健康重点) 摘要:目的 了解河北省元氏县孕晚期妇女血浆叶酸受体抗体 IgG 水平，并评价孕晚期妇女 血浆叶酸受体抗体 IgG 水平与血浆叶酸的关联性。 方法 2009 年在河北省元氏县募集 53 名孕妇并观察至分娩。募集时用调查问卷收集一般资 料，临产前采集孕妇肘静脉血。采用微生物法检测血浆叶酸，采用酶联免疫吸附法检测血浆 10 叶酸受体抗体 IgG 水平。计量资料两组均数比较采用独立样本 t 检验，计数资料两组率的比 较采用卡方检验。采用 Spearman 和 Pearson 方法检验孕晚期妇女血浆叶酸水平与叶酸受体 抗体的关联性。 结果 河北省元氏县孕晚期妇女血浆叶酸受体抗体 IgG 平均水平为 1.2 (95%CI:1.1, 1.4)。血 浆叶酸平均水平为 7.8 ?4.6 nmol/L。孕妇血浆叶酸受体抗体 IgG 在不同年龄、BMI、职业及 15 文化程度等因素方面的差异无统计学意义。没有发现孕晚期妇女血浆叶酸与叶酸受体抗体 IgG 水平存在相关性。 结论 河北省元氏县孕晚期妇女血浆叶酸受体抗体 IgG 平均水平为 1.2 (95%CI:1.1, 1.4)，孕 晚期妇女血浆叶酸与叶酸受体抗体 IgG 水平没有关联性。 关键词:叶酸受体抗体;孕晚期;孕妇 20 中图分类号:R173 Status of plasma autoantibody to folate receptor and correlation between the autoantibody and plasma folate in the third trimester of pregnant women in Yuanshi county of 25 Heibei province Yuan yue, Liu Jianmeng, Wang Linlin (Institute of Reproductive and Child Health,Key Laboratory of Reproductive Health，Ministry of Health，Peking University) Abstract: Objective To observe the status of plasma autoantibody to folate receptor and assess the 30 correlation between the autoantibody and plasma folate in the third trimester of pregnant women in Yuanshi county of Heibei province. Methods Pregnant women in Yuanshi county of Hebei province in 2009 were recruited with related information collected at enrollment. The pregnant women being enrolled were foIlowed up until delivery. Maternal blood was collected before delivery. Data from 53 women were analyzed. 35 Plasma folate and autoantibody to folate receptor levels were measured by microbiological method and ELISA, respectively. Independent samples t-test or Chi-square test was used to examine statistical differences between two groups. Spearman and Pearson test were used for evaluate the correlation between the plasma autoantibody and folate. Results The geometric mean of maternal plasma autoantibody to folate receptor level was 1.2 40 (95%CI:1.1, 1.4). Maternal plasma folate concentration was 7.8 ? 4.6 nmol/L. No significant difference for maternal plasma autoantibody to folate receptor level was found between different ages, BMI, occupation, and education. No correlation was found between plasma levels of autoantibody to folate receptor and folate in the third trimester of pregnant women. Conclusions Maternal plasma autoantibody to folate receptor level was 1.2 (95%CI:1.1, 1.4). The 45 基金项目:高等学校博士学科点专项科研基金资助课(20100001120132) 作者简介:袁悦(1986-)，男，博士，研究方向为出生缺陷 通信联系人:王琳琳(1976-)，女，副研究员，博士，研究方向为生育健康. E-mail: linlinwang@bjmu.edu.cn -1- plasma level of autoantibody to folate receptor was not related to plasma folate level in the third trimester of pregnant women in Yuanshi county of Heibei province. Key words: Autoantibody to folate receptor; Last trimester; Pregnant women 0 引言 50 叶酸参与人体内 DNA 复制与修复，与胎儿发育密切相关。细胞叶酸摄取通过叶酸受体 (Folate receptor, FR)，还原叶酸载体(reduced folate carrier, RFC)及质子偶联的高亲和性叶酸转 运体三种转运体[1]。其中叶酸受体在介导叶酸进入细胞中起重要作用，它通过糖基化的磷脂 酰肌醇与细胞面连接，并通过受体介导的内吞作用来吸收叶酸，具有高亲和性[2]。然而， 2004 年新英格兰杂志报道，Rothenberg 等首次在妇女血清中观察到叶酸受体自身抗体的存 55 在，并发现叶酸受体自身免疫可能降低了人体对叶酸的利用，增加神经管缺陷的发生几率[3]。 目前，对于我们国家的妇女体内叶酸受体抗体的状况尚没有研究，也缺乏对妇女血叶酸受体 抗体与叶酸水平的关系研究。 为此，我们拟对我国北方农村--河北省元氏县孕晚期妇女血浆叶酸受体抗体 IgG 水平进 行调查，并评价孕晚期妇女血浆叶酸受体抗体 IgG 水平与血浆叶酸的关联性。 60 1 对象与方法 1.1 研究对象 研究现场选择河北省元氏县，农业人口占 80%以上。2009 年在研究现场募集孕期妇女， 观察至分娩。研究对象纳入:长期居住在元氏县本地;年龄满 20 周岁以上;募集时怀 孕不足 20 周;无活产儿生育史;未患贫血或其他慢性疾病;未服用叶酸增补剂;自愿参加 65 项目。收集研究对象的年龄、身高、体重、职业和文化程度等一般状况。共募集 53 名。本 研究经北京大学医学部医学伦理委员会批准后实施。 1.2 样品采集 用 EDTA 抗凝管采集临产前孕妇肘静脉血，即时分离血浆，并于 4?，3000 r/min，离 心 15 分钟，冻存于-20?冰箱。所有样品用干冰运至北京大学生育健康研究所后。储存于-80? 70 冰箱备检。 1.3 样品检测 采用 96 孔酶标板改良法[4]检测样品血浆叶酸水平，乳酸杆菌氯霉素耐药菌株购自英国 NCIB 公司。批内和批间变异系数<10,。采用改良的酶联免疫吸附法(ELISA)[5]检测样品血 浆叶酸受体抗体水平，叶酸受体抗体标准品系列采用健康人混合血浆梯度稀释，IgG 的批内 75 和批间变异<5%。 1.4 统计学分析 用几何均数(95% 可信区间 CI)描述孕晚期妇女血浆叶酸受体抗体 IgG 平均水平。计量 资料两组均数比较采用独立样本 t 检验，计数资料采用比例(%)描述，两组率的比较采用卡 方检验。有关变量取值:年龄 (<25 岁=0，?25 岁=1)、体重指数(BMI) (<24.0 kg/m2=0，?24.0 80 kg/m2=1)、职业(农民或家务=0，其他=1)和文化程度(初中及以下=0，高中及以上=1)。采用 Spearman 和 Pearson 方法检验孕晚期妇女血浆叶酸水平与叶酸受体抗体的关联性。使用 SPSS 18.0 软件进行数据分析，以双侧 P<0.05 为统计学上有差异显著性。 -2- 2 结果 85 2.1 一般情况 53 名孕妇平均年龄为 21.9 ?2.1 岁，BMI 为 23.0 ?2.8 kg/m2，全部为汉族，其中 96.2% 为农民或者家庭主妇，84.9%为初中及以下文化程度，血浆叶酸水平平均为 7.8 ?4.6 nmol/L， 见表 l。 表 1 研究对象的一般情况 变量 均数或率 年龄(岁) 21.9 ?2.1 汉族(%) 100.0 BMI (kg/m2) 23.0 ?2.8 农民或家务(%) 96.2 初中及以下文化程度(%) 84.9 血浆叶酸水平 (nmol/L) 7.8 ?4.6 90 2.2 孕晚期妇女血浆叶酸受体抗体 IgG 水平 孕晚期妇女血浆叶酸受体抗体 IgG 平均水平为 1.2 (95%CI:1.1, 1.4)。孕妇血浆叶酸受 体抗体 IgG 在不同年龄、BMI、职业及文化程度等因素方面的差异无统计学意义(P>0.05) (表 95 2)。 表 2 河北省元氏 53 名孕晚期妇女血浆叶酸受体抗体 IgG 水平 变量 人数 几何均数 (95%可信区间) 总体 1.2 (1.1, 1.4) 53 年龄(岁) <25 48 1.2 (1.0, 1.5) >=25 5 1.1 (0.8, 1.5) BMI (kg/m2) <24 35 1.3 (1.1, 1.6) >=24 1.1 (0.9, 1.4) 18 职业 农民或家务 51 1.2 (1.1, 1.5) 其他 2 1.0 (0.9, 1.0) 文化程度 初中及以下 45 1.2 (1.0, 1.5) 高中及以上 1.2 (0.8, 1.6) 8 2.3 孕晚期妇女血浆叶酸水平与叶酸受体抗体的关联性 图 1 为河北省元氏 53 名孕晚期妇女血浆叶酸与叶酸受体抗体 IgG 水平散点图。Pearson 100 和 Spearman 相关性检验均显示孕晚期妇女血浆叶酸与叶酸受体抗体 IgG 水平没有相关性(表 3)。 -3- 血浆叶酸水平(nmol/L) 血浆叶酸受体抗体IgG水平 图 1 河北省元氏 53 名孕晚期妇女血浆叶酸与叶酸受体抗体 IgG 水平散点图 105 表 3 河北省元氏 53 名孕晚期妇女血浆叶酸水平与叶酸受体抗体的关联性检验 血浆叶酸水平与叶酸受体抗体 IgG 的关联性 N 53 Pearson 相关系数 -0.010 P(双侧) 0.942 Spearman 相关系数 0.134 P(双侧) 0.338 3 讨论 本研究结果显示我国河北省元氏县孕晚期妇女血浆叶酸受体抗体 IgG 平均水平为 1.2 110 (95%CI:1.1, 1.4)，血浆叶酸平均水平为 7.8 ?4.6 nmol/L，孕晚期妇女血浆叶酸与叶酸受体 抗体 IgG 水平没有关联性。 目前叶酸受体抗体的检测方法有放射性同位素标记法和酶联免疫吸附试验两种。 Rothenberg 首先用放射性同位素标记的方法，实验操作复杂[6]。Finnell 研究小组首次运用酶 联免疫吸附试验方法检测叶酸受体自身抗体[5, 7]。这种方法简便，检测灵敏度高，环境污染 少，然而该方法运用牛源的叶酸受体蛋白作为包被抗体，虽然牛源的叶酸受体蛋白与人源的 115 叶酸受体蛋白具有一定同源性，但两者还是具有一定的差异。本研究采用人源的叶酸受体蛋 白为包被抗体，检测结果准确性及方法灵敏度高。 由于国际上对于叶酸受体抗体的检测尚缺乏统一的标准品，因此还不能进行横向比较， 现有研究一般都是基于病例对照研究，研究结果限于各研究内部的组间比较。本次对河北元 氏孕晚期妇女血浆叶酸受体抗体 IgG 平均水平的描述性研究是为了后续病例对照研究及干 120 预研究做基础。 -4- 国内尚未见有关血浆叶酸与叶酸受体抗体 IgG 水平关联性研究。我们研究没有发现两者 存在关联性，可能由于研究对象的叶酸摄入状况不均一的影响，本研究虽然排除了服用叶酸 增补剂的孕妇，但未收集孕妇膳食资料，因而不能观察研究对象的叶酸摄入状况，这是本研 究的局限性。 125 [参考文献] (References) [1] Antony AC. The biological chemistry of folate receptors. Blood,1992,79:2807-2820. [2] Salazar MD, Ratnam M. The folate receptor: what does it promise in tissue-targeted therapeutics? Cancer Metastasis Rev, 2007, 26:141-152. [3] Rothenberg SP, da Costa MP, Sequeira JM, Cracco J, Roberts JL, Weedon J, Quadros EV. Autoantibodies 130 against folate receptors in women with a pregnancy complicated by a neural-tube defect. N Engl J Med,2004,350:134-142. [4] O'Broin S, Kelleher B. Microbiological assay on microtitre plates of folate in serum and red cells. J Clin Pathol,1992, 45:344-347. [5] Cabrera RM, Shaw GM, Ballard JL, Carmichael SL, Yang W, Lammer EJ, Finnell RH. Autoantibodies to 135 folate receptor during pregnancy and neural tube defect risk. J Reprod Immunol,2008, 79:85-92. [6] Rothenberg SP, Da CMP, Sequeira JM, Cracco J, Roberts JL, Weedon J, Quadros EV.Autoantibodies against folate receptors in women with a pregnancy complicated by a neural-tube defect. N Engl J Med,2004,350:134-142. [7] Bille C, Pedersen DA, Andersen AM, Mansilla MA, Murray JC, Christensen K, Ballard JL, Gorman EB, Cabrera RM, Finnell RH. Autoantibodies to folate receptor alpha during early pregnancy and risk of oral clefts in 140 Denmark. Pediatr Res,2010,67:274-279. -5-