HPLC测定决明降脂片中维生素C的含量

HPLC测定决明降脂片中维生素C的含量 Vo1.28.NO.5.2005.9 陕西中医学院 JournalofShaanxiCollegeofTraditionalChin~eMedicine61 HPLC测定决明降脂片中维生素C的含量 史亚军唐志书崔春利 (陕西中医学院,陕西成阳712083) 摘要:目的用高效液相色谱法测定决明降脂片中维生素c的含量.方法采用 ODSCm柱(5m,4.6 ×200ram),流动相为O.1%磷酸,检测波长为242nm,流速为1.Ora1.min_.,柱温:室温. 结果维生素C在 0.128,0.64btg范围内线性关系良好(r=0.9999),方法的回收率为97.79%,RSD为 O.9O%(n=5).结 论该方法能准确可靠地进行含量测定,能够有效地控制该制剂的含量. 关键词:决明降脂片;维生素C;高效液相色谱法;含量测定 中图分类号:R961文献标识码:A文章编号:1002—168X{2005)05—0061—02 DeterminationofVitaminCinJuemingJiangzhiPillwithHPLC ShiYajunFangZhishuCuiChunli (ShaanxiCollegeofTraditionalChinesemedicine.Xianyang.Shaanxi.712083) Abstract:0bjectiveToestablishamethodtodeterminevitaminCinJuemingJiangzhiPil1wit hHPIC. MethodsKrom&ailC18column(5m,4.6× 200mm)wasused.Themobilephaseis0.1%Phosphoricacid withflowrate1.Om1.min一1.Thedetectionwavelengthwassetat242nm. Thecolumntemperaturewas rcx->mtemperature.ResultsThelinearrangeofVitaminCwasintherangeof0.128--0.64 1~g(r=0.9999). TheaveragerecoverywaB97.79%andRSDwas0.9O%(n=5).ConclusionThemethodisrap id.highlyac— curateandpreci~.hmaycontrolthequalityofJuemingJiangzhiPil1. Keyword:JuemingJiangzhiPill;VitaminC;HPLC;Determination 决明降脂片为部颁标准收载品种,由决明子, 茵陈,维生素C等九味组成的中西药结合制剂,具 有降血脂,降血清胆固醇的功效,主要用于冠心病 或慢性肝炎所引起的高脂血症,血清胆固醇增高 症.部颁标准中无含量测定项目,为了更加合理地 对本品进行含量控制,对处方中处方量较大的西药 成分维生素C进行了含量测定研究.维生素C具 有增强机体免疫能力,清除自由基,降低脂质过氧 用研究[J].癌变?畸变?突变,1995;7(3):160—163. [6]王迎进,白元让.绞股蓝总皂甙在沙门茵试验中的 抗诱变作用[J].中国药理学通报,1995:ll(1):43—45. [7]张春玲,等.几种中草药及绿茶对B(a)P和NNK 的抗诱变作用J].癌变?畸变?突变,2003;15(2):101一 l()3. [8]马龙,等.新疆红景天水提取液抗诱变作用的实验 研究[J].现代康复,1998;2(1):58—59. [9]向仁德.等.中药蛇床子水提物活性成分的研究 [J].中草药.1999:30(11):813—815. [10]王明艳,吴海涛,等.4种方药对环磷酰胺诱发的 化,改善新陈代谢和参与解毒等功效,因此,本产品 中维生素C应作为质量标准中重要指标之一.对 于其含量测定方法,文献报道主要采用酸碱滴定法 和库仑滴定法等,经过试验,均不能够成功进行测 定,经过大量实验摸索,最终采用高效液相色谱法 建立了适合本制剂的含量测定方法,并制定出合理 的含量限度.经过方法学考察及三批样品测定,测 定方法在提取完全性,重视性,精密度良好,回收率 SCE的抑制作用[J].中成药.2000,22(3):212—214. [11]周坤福,王明艳,陈全良,等.四物汤抗突变作用的 实验研究[J].南京中医药大学,1998,14(1):23. [12]谢鸣.中药方剂现代研究[M].北京:学苑出版社, 1997:38 [13]夏勇,等.仙华胶囊抗突变作用的研究[J].癌变? 畸变?突变,2001;13(2):u2. [14].ac建伟,等.两种中药复方拮抗环磷酰胺致突变作 用的研究[J].癌变?畸变?突变,1999;ll(1):38—4(). (收稿日期:2005—03—28) 62陕西中医学院2{105年第28卷第5期 符合要求,整个试验过程可操作性强,能够客观地67C-36665.55,相关系数r=0.9999,结果明, 控制本品的含量.维生素C在0.128-0.64t~g之间线性范围良好. 1.仪器与试药2.3精密度实验 仪器Waters600E液相色谱仪;Water~00泵,精密吸取样品溶液10/~1,连续进样5次,记录 Waters2487紫外检测器;millog色谱工作站.峰面积,结果面积的RSD(%)为1.13结果表明, 试卉3与试药:维生素C对照品由中国药品生本方法精密度良好. 物制品检定所提供,水为重蒸馏水,磷酸和偏磷酸2.4重复性试验 均为纯,决明降脂片样品由陕西中医学院药物称取本品(批号:030301)5份,依供试品制备 研究所提供.方法制备供试品,依法测定含量,结果5份样品的 2.方法与结果含量分别相当于标示量(%)的98.46,96.34,97. 2.1色谱条件与系统适用性41,99.12,96.87,平均含量为97.64%,RSD(%) 色谱柱为KromosilODSCl8(5m,4.0mm×为1.17,结果表明,本方法重复性良好. 250mm),以0.1%磷酸为流动相,检测波长2.5稳定性试验 242nm;流速为1ml/min,柱温:室温.在此条件取样品(批号:030301),按供试品制备方法制 下,样品中维生素(得到良好分离,缺维生素C样备供试品,分别于0h,2h,5h测定峰面积,结果面 品在维生素C峰处无吸收,不影响本品的测定.积的RSD(%)为1.74,实验结果表明,本品在5小 2.2标准曲线与线性范围时内稳定性良好. 精密称取维生素C对照品适量,加甲醇制备2.6回收率试验 成每1ml含0.032mg的溶液,作为对照品溶液.采取加样回收法,取一定量已知含量的样品 分别精密吸取对照品溶液4,8,12,16,20t~l,按上述(批号:030301,C=23.4336mg/g),加适量对照品, 色谱条件.注入液相色谱仪,测定峰面积.以峰面依法制备成供试品溶液,测定含量,计算回收率,结 积对进样量(ftg)回归,得回归方程A=3981288.果见表1. 表1回收率试验结果 序号取相当对照品量 (mg) 加品量测量回收率平均回4炙率 ( R % SD mg)()(mg),.,(%) 0.0598 0.0629 0.0600 0.0681 0.0742 1.4013 1.4740 1.4060 1.5958 1.7388 1.2 1.2 1.5 1.5 1.7 2.5792 2.6406 2.8575 3.0808 3.3937 结果表明:本方法回收率良好. 2.7样品测定 取本品适量,除去糖衣,研细,精密称取0.1g, 置于三角瓶中,精密加2%偏磷酸50ml,称定重量, 超声提取40分钟,用2%偏磷酸补充减失重量,滤 过,取续滤液5ml,置于10ml量瓶中,加入2%偏磷 酸稀释至刻度,摇匀,作为供试品溶液.按前述色 谱条件测定,结果见表2. 表2决明降脂片测定结果(n=3) 经过三批含量测定结果及整个含量测定研究 过程,考虑到原料的含量及其它影响因素,暂定本 品含维生素C应为标本量的85,115%. 3.讨论 3.1维生素C对氧和光均不稳定,因此,本实 验应尽可能避光进行,经过稳定性考察实验,结果 表明,供试品在5小时内峰面积稳定,在样品制备 7小时后,测定结果表明,峰面积衰减约8%,24小 时后,面积衰减约l5%,因此,实验应尽可能在5 小时内完成. 3.2由于维生素C在酸性环境中稳定性较强, 因此.对提取溶媒进行了筛选,最终选择2%偏磷 酸作为溶剂制备样品.结果理想. 3.3流动相先后采用了乙腈和磷酸二氢钾缓 冲液不同比例,但均不能得到理想峰型,经过大量 实验筛选,最终采用0.1%磷酸作为流动相,得到 色谱峰理论板数高,对称性好. (收稿日期:2005—04—22) 0 9 ?0 7 9 ,7 9 62705 12703 ?????87697 99999