【doc】 均匀设计优选当归苦参丸方药的半仿生提取工艺条件

【doc】 均匀设计优选当归苦参丸方药的半仿生提取工艺条件 均匀设计优选当归苦参丸方药的半仿生提 取工艺条件 .212?中草药ChineseTraditionalandHerbalDrugs第36卷第2期2005年2月 赠 A一产品温度B一搁板温度 A—.producttemperatureB—-dummyplatetemperature 图2苦芩粉针剂冻干曲线 Fig.2LyophilizationcurveofKuqinPowderInjection 外观均匀疏松,含水量小于3,说明该工艺稳定 可行. 3讨论 3.1影响冷冻干燥的因素很多,除了提及的因素以 外,溶液的浓度,升温速率,真空度均对冻干结果有 一 定影响. 3.2共晶点温度和崩解温度是冷冻干燥的两个重 要参数,一般来说,产品预冻的温度应低于产品共晶 点温度5,10?,升华阶段的温度必须低于产品的 崩解温度(collapsetemperature),以防产品供热过 剩而塌陷,但过低的升华温度会延长干燥时间,增加 能耗. 3.3HP一[3-CD是f}_环糊精与1,2一环氧丙烷的缩合 反应产物,水溶性极好(75g/100mL),无溶血作 用,无刺激性,是一种极具潜力的注射用辅料[3]. References: E1]ZhaoXX.StudiesonChineseHerbalInjections(中药注射剂 学)EM].Guangzhou:GuangdongScienceandTechnology PublishingHouse,2000. E23GuoXQ,LiN,ChenN.Technologicalresearchonfreeze— dryingpreparationEJ].ProgPharmSci(药学进展),1999, 23(4):234—237. [3]DingPT,WuXM.Newdosageform:2-hydroxypropyl— cyclodextrinEJ].kVorld--Sythe,Biochem,andPrepara(国 外医药?合成药,生化药,制剂分册),1996,17(2):107—110. 均匀设计优选当归苦参丸方药的半仿生提取工艺条件 王英姿,张兆旺,孙秀梅,王芳 (1.北京中医药大学,北京100102;2.山东中医药大学,山东济南250014) 当归苦参丸源自《古今医鉴》中的参归丸,由当 归和苦参两味药组成.其功效主要为清热活血,祛风 燥湿,杀虫止痒,临床主要用来治疗湿热蕴结,熏蒸 于上所致的头面生疮,湿疹刺痒,酒糟鼻赤以及粉刺 疙瘩等.它具有疗效可靠,不良反应小,无需联合用 药的优点,但在剂型方面仍以药材原粉入药,不仅服 用不便,挥发性成分易损失,而且质量难以控制.为 对其进行剂改研究,本实验根据半仿生提取法(简称 SBE法)的理论口],以阿魏酸,苦参碱,苦参总碱和 干浸膏为指标,采用均匀设计优选其SBE法的工艺 条件. 1仪器与. pHS一3C型精密pH计(上海雷磁仪器厂), MAll0型电子分析天平(上海第二天平仪器厂), LXJ—I型离心沉淀机(上海第三分析仪器厂), KQ一250E型医用超声波清洗器(昆山市超声仪器 有限公司),CS一930薄层扫描仪(日本岛津),定量 毛细管(日本). 当归为伞形科植物当归Angelicasinensis (Oliv.)Diels的干燥根,苦参为豆科植物苦参 Sophora/PscPsAit.的干燥根,经张兆旺教授鉴 定.阿魏酸对照品(批号:773—9001),苦参碱对照品(批 号:805—9001)均购自中国药品生物制品检定所,甲醇 为色谱纯,水为自制高纯水,其余试剂均为分析纯. 2方法与结果 2.1工艺优选设计:在药材粒度,煎提温度,煎提用 水量,滤过,浓缩等条件相同的情况下,确定考察的 主要因素与水平,根据中国航天工业总公司第三研 究所提供的U.(9×3.)均匀设计拟水平安排试 验,试验见表1. 2.2样品液的制备:将处方中药材分别粉碎,按处 方比例称取10,20目粗粉50g,混匀,用”双提法” 在常压下加热回流提取3次(加水量分别为药材质 量的10,6,6倍,水的pH值及提取时间按表1),提 取液分别滤过,3000r/min离心15min,合并上清 液,浓缩并定容至100mL,即得1,9号样品液(每 收稿日期:2004—04—01 作者筒介:王英姿(1975一),女,山东济南人,博士,研究方向:中药新药开发与新剂型研制.E—mail.wangyzi@sina.com 中草药ChineseTraditionalandHerbalDrugs第36卷第2期2005年2月’213. 毫升样品液相当于原处方药材0.5g).挥发油另器 保存. 表1U,(9×33)试验设计表 Table1U.(9’×35)uniformdesigntest 3煎提取时同比为2;1;0.5 Proportionofextractiontimeofthreedecocdingisin2:1:0.5 2.3供试液的制备:取样品液各10mL,于蒸发皿 中水浴蒸至近干,加硅藻土3g,搅匀,烘干,研细,以 醋酸乙酯一甲酸(19:1)100mL索氏提取2h,回收 溶剂,残渣以甲醇定容至2mL,得到供试液A,.. 取样品液各50mL,于蒸发皿中水浴蒸至近干, 加硅藻土6g,搅匀,烘干,研细,以氯仿100mL索 氏提取2h后,回收氯仿,残渣以氯仿定容25mL, 得到供试液B,. 2.4对照液的制备:精密称取阿魏酸对照品1.70 mg,甲醇定容至2mL;精密称取苦参碱对照品1.20 mg,无水乙醇定容至5mL,备用. 2.5阿魏酸的测定L3] 2.5.1线性关系考察:取阿魏酸对照液2.0,4.0, 6.0,8.0,10.0,12.0L分别点于一块0.3CMC— Na硅胶G薄层板上,用苯一冰醋酸一甲醇(15:1: 1.5)上行展开15cm,挥干溶剂,双波长反射式锯齿 扫描,检测波长为320nm,参比波长为370nm, Sx=3,狭缝1.2mm×1.2mm,灵敏度中,薄层扫 描测定.以峰面积积分值和阿魏酸点样量进行回归, 得回归方程:y一43062+36292X,r一0.9966.在 1.7,l0.2g线性关系良好,直线不过原点,故用 外标两点法测定含量. 2.5.2供试液的测定:取供试液A各10.0v.L,阿 魏酸对照液4.0,8.0v.L,分别点于同一块0.3oA CMC—Na硅胶G薄层板上,按2.5.1项下条件展 开,定位,扫描,结果见表2. 2.6苦参碱的测定[ 2.6.1线性关系考察:取苦参碱对照液10.0, 15.0,2O.0,25.0,30.0L分别点于一块0.3 CIVIC—Na硅胶G薄层板上,用甲苯一丙酮一无水乙醇一 浓氨水(18:2:1.5:1)展开15cm挥干展开剂,改 良碘化铋钾显色,玻璃板覆盖定位,双波长反射式锯 齿扫描,检测波长为500nm,参比波长为600nm, Sx一3,狭缝1.2mm×1.2mm,灵敏度中.以点样 量为横坐标,峰面积积分值为纵坐标进行回归分析, 得回归方程:y一2088.6X一3125.3,r一0.9991, 在2.4,7.2g线性关系良好,并采用外标两点法 测定. 2.6.2供试液的测定:取供试液B各20.0L,苦 参碱对照液10.0,15.0L,分别点于同一块0.3 CMC—Na硅胶G薄层板上,按2.6.1项下条件展 开,定位,扫描,结果见表2. 表29种提取液中各指标成分的含量(,l一3)及综合评价值 Table2Eachindexingredientinnineextractsolutions (,l一3)andcomprehensiveevaluationvalues 2.7苦参总碱的测定[5]:取供试液B各5mL于三 角瓶中,水浴蒸干,残渣用无水乙醇5mL溶解,水 浴蒸干,加乙醚5mL溶解后,加0.O1mol/L硫酸 10mL,水浴挥净乙醚,加新沸过的冷蒸馏水10 mL,甲基红指示液2滴,以0.01318mol/L氢氧化 钠滴定至黄色,以无水乙醇5mL和硫酸液(0.O1 mol/L)10mL为空白对照,计算苦参总碱的质量分 数,苦参总碱质量分数以苦参碱计,结果见表2. 苦参总碱的质量分数一c(x0一x)248/5 式中c:氢氧化钠的浓度,x0:空白对照中消耗的氢氧化钠的 体积(mL),X:供试液消耗的氢氧化钠的体积(mL),248:苦 参碱的相对分子质量 2.8干浸膏得率的测定:取样品液5mL于已恒重 的蒸发皿中,水浴蒸干,在烘箱中烘至恒重,计算干 浸膏得率,结果见表2. 2.9结果优化处理:将阿魏酸,苦参碱,苦参总碱, 干浸膏4个指标综合,按下列进行化处理, 以消除指标的单位和量纲不同及各指标成分在药材 中质量分数不同所造成的影响. ?214?中草药ChineseTraditionalandHerbalDrugs第36卷第2期2005 年2月 Xi一(Xij—X)/Sj 式中x标准化后的值,xij=样品中i种成分j的质量分数, :样品中i种成分j的平均值,S:成分j的标准偏差. 根据各指标在提取工艺选择中地位给予不同的 加权系数,分别将标准化后的值加权后求和,即得综 合评价指标值y:Y一(阿魏酸+苦参碱+苦参总 碱)×0.7+干浸膏×0.3,结果见表2. 将表1和表2中数据及计算的y值输入计算 机,用JYSYSJ的数据分析模块处理,得回归方程: Y一399.3827+1.084398×A一24.50808×B一 72.7401×C+2.961001×C×C一0.3400412× A×B+3.054278×B×C一0.01333397;SS一 0.004433422.r一0.999931,F一1035.208> F...(1,7).回归方程有意义,再将方程在计算机上 进行优化处理,y的期望值方向大者为佳,得出当归 苦参丸方药的”SBE法”最佳提取条件:3煎用水的 pH依次为2.0424,6.8024,8.0016,总提取时间为 3.1243h,预测最大y为3.9151.结合生产实际,确 定其SBE法最佳工艺条件是:3煎水的pH依次为 2.00,6.80,8.O0,煎煮时间依次为2,0.5,0.5h. 2.10验证优化条件:根据优选的工艺条件,依法进 行3次重复实验,将数据按公式Xj一(xj—Xj)/Sj 进行标准化处理.xj为验证实验样品液中成分j的 含量,xj,j分别为9个水平样品液中成分j的平均 值和标准差,xj为标准化后的值.以标准化后的值 加权求和,即得综合评价y值,结果见表3.表明验 证实验提取液综合评价y值接近于预测值. 表3验证性试验提取液各指标成分含量(,l一3) Table3Eachindexingredientofextractingliquid inverifyingtest(,l一3) 指标成分质量分数/(gg?g一)RsD/标准化值y 3讨论 用均匀设计优选当归苦参丸方药的半仿生提取 法提取工艺条件,3煎用水的pH依次为:2.0424, 6.8024,8.0016,煎煮总时间为:3.1243h.验证实 验的综合评价值接近预测值,说明优选条件可行.结 合实际生产,拟定其工艺条件为:3煎用水的pH依 次为2.O0,6.80,8.00;煎煮时间依次为2h,0.5h, 0.5h.从”齐同对比”的原则考虑,本实验未采用饮 片,而是选用10~20目粗粉,故干浸膏得率较高. 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RP—HPLC法测定乐脉颗粒中去氢木香内酯的含量 方鲁延,黄勋,徐佳 (1.四川大学分析测试中心(华西区),四川成都610041;2.四川大学华 西药学院,四川成都610041) 乐脉颗粒是《中华人民共和国药典))2000年版 一 部收载的中成药,由丹参,川I芎,芍药,木香等6味 中药组成,具有行气活血,化瘀通脉之功效,用于气 滞血瘀所致的头痛,眩晕,胸痛,心悸.但现行质量标 准仅选择了活血化瘀药材建立含量测定指标.为了 更好地控制药品质量,本实验选择了乐脉颗粒中的 另一理气止痛功效的药材木香,建立了去氢木香内 酯的HPLC测定方法,为进一步完善其质量标准提 收稿日期:2004—04—04 供了参考依据. 1仪器与试药 日本岛津LC一9A高效液相色谱仪,SPD一 6AV紫外可见检测器,C—R4A数据处理机,SIL一 6B自动进样器,HS6150D超声波清洗仪.甲醇(色 谱纯),高纯水,去氢木香内酯对照品(日本和光纯药 工业株式会社,纯度98以上,批号040—21881),乐 脉颗粒由华大制药厂生产,其余试剂均为分析纯.