[word doc]泽泻吴茱萸方对SHR大鼠血压及心脏影响的实验研究

[word doc]泽泻吴茱萸方对SHR大鼠血压及心脏影响的实验研究 泽泻吴茱萸方对SHR大鼠血压及心脏影响 的实验研究 陕西中医学院2010年11月第33卷第6期 JournalofShaanxiCollegeofTraditionalChineseMedicineNov.2010Vo1.3 3No.6 泽泻吴茱萸方对SHR大鼠血压及心脏影响的实验研究 赵晓丽李长伟吴水生 (福建中医药大学药学院,福建福州350108) 摘要:目的探讨泽泻吴茱萸方(AED)时SHR大鼠血压及心脏影响.方法将56只SHR大鼠按收缩压血压 水平以每10mmHg为组距分成4个区组,再以区组随机分为7组,每组8只,即SHR模型组,安博诺组,泽泻吴茱 萸配比1:l,l:3,1:6,3:1和6:1组;另取l7周龄Wistar大鼠l0只作为空白对照组.结果AED不同配比组给药 后血压明显降低.结论AED不同配比对高血压治疗有一定效果. 关键词:泽泻吴茱萸方;SHR大鼠;实验研究 中图分类号:R285.5文献标识码:A文章编号:1002—168X(2010)06—0080—03 原发性高血压病是一种常见的慢性心血管疾 病,不仅发病率高,病程长,病理机制复杂,且并发 症多,常伴有心,脑,.肾等重要脏器的损害?J,严重 影响人类健康和生活质量.目前,高血压病的治疗 主要还是借助药物手段,因此,高血压病治疗药物 的研发,一直是国内外医学界研究的热点.临床上 所应用的降血压药物绝大多数以西药为主,中药只 占有极少的部分.而中医药治疗高血压病,有其独 特优势和有效方剂,研制疗效肯定的新降血压中 药,是中医药现代化的重要内容.本文通过临床应 用结合现代中药药理研究成果,选用泽泻和吴 茱萸药对组成泽泻吴茱萸方(AED),以自发性 高血压大鼠(SHR)为研究对象,验证其高血压病 的治疗效果,为研制降血压新药奠定基础. 1材料 1.1实验动物自发性高血压大鼠(SHR),17W 龄,雌雄不限,体重(300?30)g,SPF级;成年雄性 Wistar大鼠,体重(300?30)g,均购自上海斯莱克 实验动物有限责任公司(SCXK(沪)2007—0005). 1.2主要仪器ALC—NIBP型高血压大鼠测压 仪,上海奥尔科特生物科技有限公司;海尔冰箱,青 岛海尔公司;JA503型电子天平,上海天平仪器厂. 1.3实验药品及制备泽泻购自建瓯吉阳泽泻 GAP基地,吴茱萸购自福建中医学院国医堂药房, 经福建中医学院中药鉴定教研室杨成梓副教授鉴 定,其来源分别为泽泻科多年生沼泽植物泽泻Al— ismaorientalis(Sam.)Juzep.的块茎;芸香科落叶灌 木吴茱萸EvodiarutaecarpaJuss.)Benth.接近成熟 的果实.以泽泻10g和吴茱萸10g(1:1)总计20g 的临床用量为基准,根据不同配比调整两药的用 量,具体如1:3=泽泻5g而吴茱萸15g,1:6=泽 泻2.86g而吴茱萸17.14g,其余依此类推.泽泻 与吴茱萸按各配比方,以药材的8倍量8O%乙醇 浸泡30min,首次超声45min,过滤,再加6倍量 80%乙醇超声提取30min,合并两次滤液,抽滤, 浓缩回收乙醇,浓度调至每mL相当于生药材 0.2g,冰箱保存备用.安博诺(厄贝沙蛆/氢氯噻 嗪复方片剂)由杭州赛诺菲安万特民生制药有限 公司生产,用前配制成1.5mg/mL的悬液,置4oC 冰箱保存备用. 2方法 2.1动物分组正式实验前每天测压训练1次, 连续7d,待大鼠适应环境,血压稳定后将56只 SHR大鼠按收缩压血压水平以每10mmHg为组距 分成4个区组,再以区组随机分为7组,每组8只, 即SHR模型组,安博诺组,泽泻吴茱萸配比1:1,1: 3,1:6,3:1和6:1组.另取17周龄Wistar大鼠10 只作为空白对照.具体安排见表1. 表1实验分组情况表 2.2给药1W适应期内各组正常喂养,自由饮 水.中药治疗组和西药对照组均从第2W开始给 药.分别灌胃给药,给药量根据体重计算(2g/ kg/d),药物浓度0.2g/mL,给药体积为1mL/lO0g 体重;而模型组,空白对照组则给予相同体积的蒸 馏水.给药时间为每天早晚(8:30Am,5:00Pm)各 1次,连续给药60d,分别于给药后15d,30d,45d 和第61d测定给药后的血压.各组于末次灌胃后 24h取材制作标本. 2.3检测指标与方法 2010年11月第33卷第6期陕西中医学院 Nov.2010Vo1.33No.6JournalofShaanxiCollegeofTraditionalChineseMe dicine?8l? 2.3.1大鼠体重的测量将大鼠装入测量盒内, JAS03型电子天平(上海天平仪器厂)测量大鼠体 重,精确到0.2g. 2.3.2血压,心率测量实验前后分别检测SHR 收缩压,舒张压及心率.采用大鼠心率血压仪,测 量清醒状态下的大鼠尾动脉心率及收缩压和舒张 压.机器开机预热后,将在37?的温度下已加热 约l0,15min的待测大鼠装入专门设计的有机玻 璃大鼠测压固定器内,鼠尾穿过压尾器,压上固定 压片.间隔5min后重复测量,取两次血压测量值 的平均数记为大鼠血压,取两次心率测量值的平均 数记为大鼠心率数. 2.3.3心脏重量测定末次测大鼠体重后,断头 法处死大鼠,迅速开胸分离心脏,滤纸吸干后以电 子天平称重,记录全心湿重;剪除主动脉,左右心房 及右心室,0.9%生理盐水由主动脉开口灌洗左室 后,经滤纸吸干,电子天平称重后记为左室湿重 (左室游离壁+室间隔).精确到0.1mg. 2.4统计学处理方法实验数据以(4-s)表示, 各组间差异的显着性用t检验进行. 3结果 3.1各组SHR大鼠治疗前后收缩压的变化见 表2. 表2各组SHR大鼠治疗前后血压变化(x?S) 注:与SHR模型组比较,’.P(O.05 实验结果显示,各组别给药前收缩压与舒张压 没有显着性差异(P>0.1),说明分组均衡,有可比 性.经治疗后,AED各配比组和安博诺组均具有明 显的降压疗效,与模型组比较,具有显着性差异(P <0.05),其中AED3:1组和安博诺组比较无明显 AED确有良好的降压疗效. 3.2SHR大鼠给药前后的血压变化(mmHg)按 照以往实验的经验,安博诺组与AED均在给药后1 — 6h血压下降达最低点.因此,在给药第15d记录 各组给药前(0h)和给药后2h,4h,6h血压.给药 差异(P>0.05),表明两组降压疗效相当.说明时间均为上午8,9时,结果见表3. 表3各组SHR大鼠给药前后血压变化(x?s) 注:与SHR模型组比较,P<0.05. 模型组给予生理盐水后血压无明显变化;安博3.3各组SHR大鼠心脏重,左室重,心体比和左心 诺组给药后血压明显降低,AED不同配比组给药后体比的比较见表4. 血压的降低亦具有统计学意义. ? 82? 陕西中医学院2010年11月第33卷第6期 JournalofShaanxiCollegeofTraditionalChineseMedicineNov.2Ol0Vo1.3 3No.6 表4各组SHR大鼠心脏重,左室重,心体比和左心体比的比较 泣:与SHR模型组比较.’P<0.05. 实验结果显示,除安博诺组外,其余各组SHR 大鼠体重无显着差别,说明安博诺组可能具有减轻 体重的作用.心脏重以安博诺组最小,与其它组别 比较有显着性差异;而模型组虽高于其它组别,但 尚未出现统计学意义.左心室重量模型组最大,空 白组最小,说明SHR模型已经造成了心肌增生肥厚 的现象;与模型组比较各组左心室重和左室体重比 均有显着性差异(P<0.05),说明各治疗组均有减 缓心肌肥大的作用. 4讨论 本实验立足于对新方创制规律进行有益的探 索,中医自古就有”不传之秘在用量”的说法,因此, 泽泻与吴茱萸之间的用量比例是本实验的一个重 要考察因素.参考泽泻汤,左金丸,六一散,当归补 斑汤等传统古方的用量之比,我们确定了以泽泻与 吴茱萸按1:1,1:3,1:6和3:1,6:1等五种配比来评 估其可能的最佳配比组合,以期通过其降血压等药 理效应来探求并揭示已被证明有效单味药在复方 环境中的协同作用以及配伍后的降压作用机理. 实验结果表明,AED各配比组和安博诺组均具有明 显的降压疗效,其中AED3:1组降压作用最明显且 稳定持久. 高血压病的主要危害是对重要靶器官结构和 功能的影响,左心室肥厚是最常见的并发症.高血 压合并左心室肥厚的猝死率,心律失常,心力衰竭 及心肌梗死的发生率远高于无左心室肥厚者.故 左心室肥厚已作为一个独立的危险因素而受到重 视.左心体比是反映着左心室肥厚的指标j. 实验结果显示,左心室重模型组最大,空白组最小, 说明SHR模型已经造成了心肌增生肥厚的现象;与 模型组比较各组左心室重和左室体重比均有显着 性差异(P<0.05),说明AED还有减缓心肌肥大 的作用. 本实验结果表明泽泻与吴茱萸组成的新方或 药对具有良好的降血压临床应用前景,从传统配伍 理论来解释也有其合理性.因为泽泻味甘淡而性 寒,寒能胜热泻火,淡能渗利水湿.入肾经,长于泻 肾之相火;入膀胱,又善于渗利膀胱之水湿,为通利 小便,去湿泻热,渗泻浊阴之品.凡湿热内蕴,痰涎 随风火上壅,浊阴干于清阳所致之眩晕,泽泻有很 好的治疗作用.《金贵要略》心下有支饮,其人苦冒 眩,泽泻汤主之.其用机理可以通过利小便,泻浊 阴.《本草图经》病甚欲眩者,服之(泽泻)必瘥,亦 说明泽泻治疗眩晕有较好的疗效.《本草纲目》在 眩晕篇里也提到泽泻可以治疗痰热所致的眩晕. 吴茱萸辛散苦降,性热,性善下行.长于温肝暖脾, 降逆止呕.又善疏肝解郁,行气止痛,且能燥湿. 主人肝经,能行气,解郁,降气,能下引上逆之肝气, 降顺上逆之气血,故常以吴茱萸外用贴于涌泉穴以 引火归源,降顺上逆之气血与上亢之肝阳.以泽泻 为君,利小便,泻浊阴,去湿,化痰,泻热.吴茱萸佐 使为用,疏得气机,降逆行气,温暖燥湿以利痰湿之 消化.两药相伍,相须为用,泻中有降,一主一辅, 一 寒一热,相反相成,既可行气化痰,渗利湿浊,又 可清泻肝火,降逆气血.可应用于痰湿壅盛,气机 阻滞所致之眩晕,头痛之症的治疗. 参考文献 [1]景舒南,鲁一兵,卢静,等.高血压左心室肥厚与脉压关 系的临床观察[J].高血压杂志,2001,9(03):223. [2]吴水生.泽泻的药学与临床研究[M].第1版.北京:中 国中医药出版社,2006. [3]李成,麦春秋,莫景兰,等.吴菜萸提取液对大白鼠降压 作用的实验研究[J].右江民族医学院,2005,27 (2):134—136. [4]StruthersAD.Angiotoensinreceptorantagonistsforheart 6. faiure[J].Heart,2004,8(1):5— [5]郑亚丽,张卫,汪斌.原发性高血压左室肥厚患者的颈 动脉结构和血流动力学特征探讨[J].广东药学院学 报,2006,22(3):331. (收稿日期:2010—09—06)