高效液相色谱法测定蛇床子中蛇床子素的含量

高效液相色谱法测定蛇床子中蛇床子素的含量 高效液相色谱法测定蛇床子中蛇床子素的 含量 中国临床医药研究杂志2007年总第175期 2.2.2采用科玛嘉的显色培养基从尿中分离出18株酵母样菌, 以n色念珠蒲为丰,占66.7%(12株),其次是热带念珠菌6株.对 其采用6种抗生素,见3. 表3I8种酵母样菌的耐药率% 抗生素两性霉素B5一富胞嘧啶制霉菌素咪康唑益康唑酮康唑 3种唑类抗生素的中介耐药率达83‰167%,16.7‰ 3讨论 从实验数据可见:大肠埃希氏菌是尿道感染的主要病原菌, 占48.5%,其次是酵母样菌占17.5%,感染者多以肿瘤,昏迷病人 及老年人为主(内科多见).大肠埃希氏菌对青霉素类耐药率较 高,高达88%,但对丁胺卡那霉素敏感率为90%,鲍曼多重耐药, 且耐药率高.白色念珠菌是酵母样菌中最主要的人体机会病原 菌,前3种抗生素为首选药,3种唑类的中介耐药率较前3种 高. 尿路感染在临床上最常见,属多发病,给患者带来极大的痛 苦,故检测出尿道感染菌,并进行药敏试验,使临床医生有的放 矢的治疗,缩短病程减少病人经济和精神负担.同时也密切监视 了耐药菌株的流行情况,严格限制广谱抗生素的使用,减少耐药 菌株的出现. 参考文献 1.周贵民,谢灵,杨继勇深部酵母菌感染的病原学变化及临床意义.中华 医学检验杂志,1999;8:27 高效液相色谱法测定蛇床子中蛇床子素的含量 辽宁省大连医科大学附属第二医院药剂科(116027)费淑香 辽宁省大连水产药业有限公司(116027)梁志忠 摘要目的:采用高效液相色谱法对蛇床子中蛇床子素含量进行测定.方法:色谱柱: 以乙腈一水(55:45)为流动相,流速为1.Oral/ min,检测波长~322nm.结果:此方法的平均回收率为98名;RSD值为1.O:稳定性良 好.结论:使用此法测定蛇床子中蛇床子素含量方 法简便易行,准确度高,重复性好. 关键词蛇床子素高效液相色谱法含量测定 蛇床子为伞形科植物蛇床子干燥成熟的果实,形状为双悬 果,呈椭圆形,表面辉黄色或灰褐色,其提取物具有抗氧化,杀菌 消毒,燥湿止氧的功能?.本文提供了测定蛇床子中蛇床子索含 最的简单易行的方法,可以有效的指导实践工作. 1仪器与试剂 大连伊利特高效液相色谱仪,包括UV20011紫外检测器;乙 腈色谱纯(天津科密欧):蛇床子对照品(供含量测定编号: 110822.2oo4o6:购于中国药品生物制品检定所):万分之一天平 (瑞士AG245电子分析),蛇床子(主产于安徽毫州). 2方法与结果 2.1色谱条什 色谱柱:大连伊利特KromaillC18柱f4.6mm*250mm);流动 相为乙腈一水(55:45);流速为1.Oml/min;检测波长为 322nm;室温操作.在本条件下,理论板数按蛇床子峰计算不低于 3000: 2.2对照品溶液的制备 精密称取蛇床子索对照品适量加乙醇制成45ug/ml的溶 液,即得. 2.3供试品溶液的制备 取蛇床子粉末(过三号筛)约0.1g,置具塞椎形瓶中,加入元 水乙醇25ml,密塞,称定重量,放置2小时,超声处理(功率 300W,频率50Hz)30分钟,放冷,再称定重量,用无水乙醇补足减 失的重量,摇匀,称取上清液5ml,置10ml的量瓶中,加无水乙 醇稀释至刻度,摇匀,即得. 2.4线性关系的考察 精密称取蛇床子索对照品8.200mg,置100ml棕色量瓶中, 加乙醇稀释至别进样5.0,100,15.0,20.0,25.0ul色谱峰 面积,以蛇床子素进样量为横坐标,峰面积为纵坐标,做线性回 归,得蛇床子索回归方程: y=160+128xr=0.996表明在0.41—2.05ug色范围内有良好 的线性关系. 图l高效液相色谱图 A对照品B供试品c蛇床子 3 4 2.5精密度实验 取2.2项下的对照溶液连续进样6次,测定峰面积RSD 为O.5%,表明仪器精密度良好. 2.6稳定性试验 取供试品试液(批号:070206),分别在0,2,24,48h进样,测 定峰而积,RSD为09%. 2,7回收率实验 精密称取己知含量的样品,准确加入对照品一定量,按拟定 含量方法制备,一发测定,计算回收率,结果见表l 表1回收率测定结果 biResultsofrecovelytests 编号样品原有量mg对照品加入量mg测得总量mg回收率%蓁回收RSD% 2.8样品含嚣测定 分别精密吸如照品溶液与供试品溶液各20ul进样,按外标 法计算样品中蛇床子素含量,测定结果见表2 3讨论 中国临床医菊研究杂志2007年总第175期 表2样品蛇床子含量测定结果 Tab2Resultsofcontentdeterminationofsamples 实验过程中发现流动相比例乙腈一水按中国药典2005版陶 一 音5要求(65:35)比例分离蛇床子索样品峰效果不好.保留时间 过短,通过实验发现,调整流动相乙腈一水(55:45)蛇床子峰保 留时间大约14分钟,样品峰分离良好,效果理想,本法具有操作 简便,结果可靠,易于掌握的特点,适用于中药材蛇床子的质量 控制. 从紫外扫描图谱得知,蛇床子索在322nm波长吸收性能良 好,故选择该波长进行测定. 参考文献 1.张晓霞.周卯星,张高勇等.高效液相色谱法测定蛇床子索[J】'日用化 学工业2006;36~):395—397 2国家药典委员会编.中华人民共和国药典(一部)[s]2oo5年版.化学工业 出版社,2005;219:220 临床研究 产气肠杆菌菌体内核苷磷酸化酶酶活测定条件的分析 天津科技大学食品工程与生物技术学院(300457)魏晓琨王昌禄 黑龙江省齐齐哈尔大学生命科学与工程学院(161005)张春艳 上海华东理工大学生物反应器工程重点实验室(200237)丁庆豹 摘要背景与日的:以产气肠杆菌完整细胞为酶源合成阿糖腺苷,确定合适的酶活测定方法和酶反应条件.方法:用分光光度法测定 不同菌体浓度,不同反应时间条件下酶反应生成的碱基.结果:尿苷磷酸化酶的酶活测定条件为:0.5鬈菌体量,10ram01/L尿苷,印cc水 浴下反应20min.胸苷磷酸化酶的酶活测定条件为:3老菌体量,10mmo1儿胸苷,6Occ水浴下反应lOmin.嘌呤核苷磷酸化酶的酶活测 定条件为:lOmmol/L肌苷溶液.60cc水浴下反应20min.结论:用分光光度法测定酶 反应生成的碱基,据此判断产气肠杆菌菌体内核苷 磷酸化酶酶活,方法简单易操作,灵敏度高,反应体系稳定. 关键词产气肠杆菌,尿苷磷酸酶,胸苷磷酸化酶,嘌呤核苷磷酸化酶,酶活 AbstractBackgroundandObjective:Todefiniteoptimizationofmethodstodetectenzymeactivityandconditionsofenxzymereactiom duringthesynthes~ofAdeninearabinosidewithenzymeofwholeEnterobacteraerogenescel1.Methods:basesweredetectedby spectrophotometunderdifferentcellconcentrationandreactiontime.Resulu:detectionconditionsofuridinephosphorylaseareO.5%cell concentration,10mmol/Luridine,reacting20minunder60qCwaterbath.Conditionsofthymidinephosphorylaseare3%cellconcentration, 1Ommol/Lthymidine.reacting10rainunder60~Cwaterbath.Conditionsofpurinenucleosidephosphorylaseare0.5%cellconcentration. 1Ommol/Lpurinenucleoside,reacting20rainunder60~Cwaterbath.Conclusion:ThemethodtOdetectenzymeactivitywithspectrophotomet