瑞舒伐他汀钙片中国人体的药动学

中国医院药学杂志2OO7 第27卷第11期 ChinHosp Pharm J，兰【JIJ7Nov，Vol 27-‘＼l — lI · 1497 · 比较分析EJ]．现代中药研究与实践。2【J【】5，19(2)：53—55． [5] 徐必达，陈康，林文津，等．麻黄与密麻黄超l洒界萃取物的化学 成分比较EJ]．广州中医药大学学报，2004，21(3)：211f212． E6] 陈耕夫．水蒸汽提取与超临界萃取丁香化学成分的研究EJ]．海 南医学院学报，2002，8(2)：65—67． E7] 陈峰，郭立玮，井山林，等．超临界 C(h萃取延胡索中延胡索乙 素的正交试验研究EJ]．中药新药与临床药理，2【J【】5，16(2)： 137—138． 瑞舒伐他汀钙片中国人体的药动学 [8] 王玳珠，井山林，陈峰，等．SFE等方法提取延胡索中延胡索乙 素的的研究EJ]．南京中医药大学学报，2003，19(6)：356-357． [ 莫尚志，黄星，王峥涛，等．超临界 )2萃取紫菀中紫菀酮的工 艺研究[J]．中药材，2004，27(9)：676—678． [11)]陶玲，黄际薇，麦海燕．肉桂挥发油的超临界C02萃取法和水 蒸气蒸馏法提取的比较分析[J]．分析测试学报，2OO4，23(4)： 65—67． [收稿日期]2006—1 2(J 蒋娟娟，田蕾，黄一玲，刘红，严岩，许莉，李一石 (中国医学科学院阜外心血管病医院临床药理中心，卫生部心血管药 物临床研究重点实验室，北京 1 0()037) [摘要] 目的：研究瑞舒伐他汀在中国健康志愿者体内的药动学特征。方法：健康男性受试者24名，随机分为3个剂量组：瑞 舒伐他汀5，10和20 mg组，每组 8名，分别口服对应剂量的瑞舒伐他汀钙片。以高效液相一质谱／质谱(HPLC-MS／MS)法测 定血药浓度。结果：受试者单剂量空腹口服瑞舒伐他汀 5，1()，20 mg后，达峰浓度 分别为(6．5±1．5) g、(12。6±4。4) g和(39．7±24．8)ptg·L一 ，AUGl_1分另0为(58。5±12．9)ptg·h·L一’，(123．5±36。5)ptg·h·L一 ，(268．1±161．1)ttg‘h。L一 ， 达峰时间分别为(3。8±1。9)h，(3．5±1．3)h，(2。9±1。())h，半衰期 ￡l／2分别为(14．5±4。2)h、(12。3±I．9)h、(10．3± 1．9)h；受试者多次口服瑞舒伐他汀 5，1()和 20 mg达稳态后 ，稳态达峰 浓度 分别为(6。I±I。4) g·L～、I6．1±6。0 · I 一 (35．8±19．8) g·L一’、AUC 分另《为(71。4±6。2) g·h·L一 、(168．6±50。4)ptg·h·L一 和 (359．4±128。2)ptg‘h‘L一 ，稳 态达峰时间￡ 分别为(3。6±0．7)h、(3．9±1。1)h、(3．0±0。9)h，稳态半衰期 tl／2分别为(15．6±3．1)h、(12。8±2．4)h、 (11。2±1。4)h。结论：在本研究剂量范围内，瑞舒伐他汀呈线性动力学特征而无饱和性，中国人与白种人的药动学特征存在 明显的种族 差异 。 [关键词] 瑞舒伐他汀；药动学；高效液相色谱一串联质谱；种族差异 [中图分类号]R969．1 [文献标识码]A [文章编号]10{J卜5213(2007)11—1497—04 Study on pharmacokinetics of rosuvastatin calcium tablets in Chinese healthy subjects JIANG Juan-juan，TIAN Lei，HUANG Yi—ling，LIU Hong，Yan yan，XU Li，LI Yi—shi(The Key Laboratory of Clinical Trial Research of Cardiovascular Drugs。Fuwai Cardiovascular Hospital，CAMS and PUMC，Beijing 100037，China) ABSTRACT：OK1『ECTIVE To study the pharmacokinetics of rosuvastatin calcium tablets in Chinese healthy volunteers．METH— ODS 24 male volunteers were divided into 3 groups at random，and were administrated with Rosuvastatin calcium tablets 5 mg，1 0rng or 20mg respectively．Plasma concentration was detected by reverse-phase HPLC-MS／MS．RESULTS After single- dose administration，the C was(6。5±1．5)，(12。6±4．4)，(39。7±24．8)ptg·L一 for 5，10，20 mg rosuvastatin respectively， AUG was(58。5±12．9)，(123。5±36。5)，(268．1±161。1)ttg·h·L一 ，respectively，￡～ was(3．8±1。9)，(3。5±1。3)，(2．9± 1。0)respectively，t1／2 was(14．5±4。2)，(12。3±1．9)，(10。3±1．9)respectively；after multi-dose administration，C was(6．1 ±1。4)、(16．1±6。())，(35。8±19．8)肛g·L一 for 5，10，20 mg respectively、AUCss were(71．4±6．2)、(168．6±50)，(359．4± 128．2)ptg·h·L一 respectively，￡ 憾 was(3。6±0．7)，(3。9±1。1)，(3。0±0。9)respectively，tl,／2 was(15。6±3。1)，(12。8±2。4)， (1 1。2±1。4)respectively。CONCI USION It has been shown that there is remarkable ethnic difference in pharmacokinetic pro— fi1es between Chinese and Caucasian．Rosuvastatin exhibited 1inear pharmocokinetic characteristics over the dose range studied． KEY WORDS：rosuvastatin；pharmacokinetics；HPLC-Ms／MS；ethnic difference 瑞舒伐他汀(rosuvastatin)为新的3一羟基一3一甲 基戊二酰辅酶 A(HMG-COA)还原酶抑制剂，是经 合成和筛选一系列嘧啶取代的 3，5一二羟基一6一庚烯 酸酯化合物后发现的一个他汀类新药，临床用于口 服治疗高胆固醇血症和脂质异常血症 。国外文献 多采用液相色谱一质谱联用法测定血浆中的瑞舒伐 [基金项目]863国家攻关项目(编号：2002AA2Z341A，2004AA2Z3760) [作者简介]蒋娟娟，女，助理研究员，E-mail：jiangjuanjuan一80@163 corn [通讯作者]李一石．女，主任医师，电话：01{J一68331753，E-mail：liyishi@public3．bta．net．cn 维普资讯 http://www.cqvip.com · 1498 · 中国医院药学杂志 2OO7年第27卷第 11期 Chin Hosp Pharm J，20()7 Nov，Vol 27，No．11 他汀浓度[2 ]，国内未见报道。已有研究证明瑞舒伐 他汀在白种人和亚洲人之间存在显著的种族差异， 相同剂量下亚洲人的血药浓度一时间曲线下面积 (AUC)和最大峰浓度(C瑚 )约为白种人的 2倍[5]， 但未见中国人口服瑞舒伐他汀后的药动学。本 研究通过高效液相色谱一质谱／质谱 (HPI C-MS／ MS)法测定血浆中的瑞舒伐他汀浓度，探讨其在健 康国人体内的药动学特征，并与国外临床研究结果 比较，该药在不同人种的种族差异。 1 材料 API 4000串联质谱仪(美国应用生物系统公 司)，包括 Analyst 1．3数据处理软件；Agilentl100 液相色谱系统(美国安捷伦公司)；瑞舒伐他汀钙片 (某制药有限公司，规格为 5 mg)；瑞舒伐他汀对照 品(某制药有限公司，纯度为99．1 )；匹伐他汀[内 标，兴和(株)东京创药第一研究所，纯度为99．35 ， 批号 NKOOSAIO]；甲酸、甲醇、叔丁基甲醚为色谱 纯；盐酸为分析纯；水为纯化水。 2 方法与结果 2．1 受试者选择 健康男性受试者 24名，年龄 (22．2±3．3)岁，身高 (172．1±4．6)cm，体 质量 (64．7±6．3)kg。经体检、胸片、心 电图、血、尿常 规、血生化检查均无异常。无吸烟、酗酒嗜好，无食 物、药物过敏史，无药物依赖史及精神病史。试验前 4周未服用任何药物。所有自愿受试者签署知情同 意书，试验经伦理委员会批准。 2．2 试验设计 采用随机开放试验设计，24名受 试者随机分为 3个剂量组：5，10，20 mg组，每组 8 名。受试者于试验第 1天晨 8：O0点按规定剂量空 腹口服瑞舒伐他汀钙片，200 mL温水送下。受试者 分别于试验第4天起每 日晨空腹口服相同剂量的瑞 舒伐他汀钙片，连续服药 7 d。每日服药 2 h后方可 饮水，4 h后进食标准午餐。试验期间统一饮食、禁 忌烟酒和含咖啡因的饮料。整个试验过程均在 I期 病房进行，医务人员在场并监测可能出现的药物不 良反应。 2．3 血样收集与处理 分别于第 1次给药(单剂 量)和最后一次给药(多剂量)前、给药后0．5，1，2，3， 4，6，8，12，18，24，36，48，60 h取静脉血 5 mL，肝素 抗凝，3 000 r·min 离心 10 min，取血浆 一7()℃ 保 存待测。取0．5 mL血浆样本置于 10 mL具塞离心 管中，加入0．2 tool·L 盐酸溶液 1O0 L酸化血浆， 混匀后加入提取剂叔丁基甲醚(含内标匹伐他汀 2．5 g·L )2 mL进行提取，涡旋混合 3 min，离心 10 min(3 000 r·min )，分取上层有机相于室温下 氮气流吹干，残留物溶于0．2 mL流动相中，取2() L 进入 HPLC-MS／MS分析。 2．4 生物样本测定 2．4．1 色谱条件 色谱柱：GL Nuclosil C 色谱柱 (5O mm×2 mm，5 m，澳大利亚 SGE公司)；流动 相：甲醇一水一甲酸(7O：30：1)；流速：0．25 mL·min～； 柱温：35℃。质谱检测条件：离子源为电喷雾离子 源，离子喷射电压5 000 V，温度为 3O0 oC；气帘气体 (N2)压力为 10 unit，离子源气体 GS1(N2)压力为 14 unit，离子源气体 GS2(N )压力为7 unit，碰撞气 CAD(N：)压力为 7 unit；正离子方式检测；扫描方式 为多反应监测(MRM)；用于定量分析的离子反应 分别为m／z 481．9一m／z 258．3(瑞舒伐他汀)和 m／ z 422．4一m／z 290．3(内标匹伐他汀)；瑞舒伐他汀 和内标的DP电压分别为 120 V和 95 V，碰撞能量 (CE)分别为47 eV和38 eV。 2．4．2 标准曲线的制备 取标准系列血浆样本 0．5 mL，分别对应瑞舒伐他汀质量浓度0．05，0．1， 0．2，0．5，1，2，5，1() g·L～，按“2．3”项下操作， 色谱图，以待测物瑞舒伐他汀的浓度为横坐标，以待 测物与内标的峰面积比值为纵坐标，线性回归，得回 归方程：y=0．339X +0．014 9，r=()．999 2，最低检 测浓度为0．05 g·L～。 2．4．3 精密度和准确度 制备瑞舒伐他汀低、中、 高(0．1，1，10 g·L )3个质量浓度的质控样品 (QC)，6样本，连续测定 4 d，并与标准曲线同时进 行，计算 Qc样品的测得浓度，与配制浓度对照，求 得本法的精密度与准确度，以RSD示。0．1，1，10 g·L 日间精密度 RSD分别为9．9 ，6．3 ， 3．7 ；日内精密 度 RSD 分别 为9．6 ，6．2 ， 7．2 。 2．4．4 回收率试验 制备瑞舒伐他汀低、中、高 (0．1，1，1() g·L )3个质量浓度的质控样品，比较 经提取后的质控样品与未提取的标准溶液的峰面 积，计算方法的提取回收率。3个浓度水平测得的 回收率分别为(92．2±9．1) ，(92．3±6．1) 和 (9O．3±5．6) ( =6)。 2．5 数据分析 采用 WinNonlin药动学软件(4．1 版，美国Pharsight公司)非房室模型法计算药动学 参数。主要药代参数组间比较采用t检验法。 2．6 药动学参数 健康受试者单次和多次口服瑞 舒伐他汀钙片 5，1()，20 mg后，瑞舒发他汀的主要 药动学参数见表 1，平均药一时曲线见图1。 2．7 瑞舒伐他汀的药动学特征 受试者单剂量空 腹 口服瑞舒伐他汀 5，10，20 mg后，达峰浓度 维普资讯 http://www.cqvip.com 中国医院药学杂志2007年第 27卷第 1 I期 Chin Hosp Pharm J，2OO7 Nov，VoI 27，No．1I · 1499 · 表 1 健康受试者单次、多次口服瑞舒伐他汀 5。10，20 mg后的主要药动学参数 Tab 1 Main pharmacokinetics parameters of rosuvastatin after oral single-dose and multi—dose dose of rosuvastatin calcium 5， 10，20 mg 参数 单剂量(n=8) 多剂量(11=8) t1 2／h 了 ／h Gm ／pg·I 一 Cav／pg·L一 AUG,。。／pg·h-I ’) Clss／F(I ·h ) MRTr 。。／h FI／ R 14．5±4．2 3．8± 1．9 6．5± 1．5 60．1± 13．1 88．【)±25．9 9．7±【)．9 12．3± 1．9 3．5± 1．3 12．6± 4．4 125．8±36．3 91．4±49．1 1【)．5± 1．1 1()．3± 1．9 2．9± 1．() 39．7±34．8 27()．【)±161．5 1()2．9±64．0 9．0± 1．2 15．6±3．1 3．6±0．7 6．1± 1．4 2．4±【J．2 74．9±7．6 87．7±7．6 15．()±3．2 233±56 1．2±(1．3 11．2±1．4 3．()±0．9 35．8± 19．8 12．8± 4．7 364．5± 129．( 72．4±23．3 12．(1±2．3 251±5() 1．5±()．5 注：R (蓄积系数)=AUGl_2 (第 9天)／AUG”4(第 1天) 75 60 =】4s en 0 30 15 0 图 I 健康受试者单剂量空腹口服瑞舒伐他汀 5，10，20 mg后的平 均血药浓度一时问曲线 一 ▲一 5 mg(n=8)：一 一10 mg(n=8)：一 -一 2(1 mg(n=8) Fig 1 Plasma concentration-time curves of rosuvastatin after oral administration of rosuvastatin calcium 5，I【l，20rag 一 ▲一 5 mg(n 8)：一 ◇一 10 mg(n：8)：一 -一 2f)mg(n 8) Cl眦 分另4为 (6．5±1．5)，(12．6±4．4)，(39．7± 24．8)／*g·L一，AUC 分 别 为 (58．5± 12．9)， (123．5±36．5)，(268．1±161．1)gg·h·L ，回归 分析显示， AUC在各个剂量组之间存在明显 的线性关系；方差分析显示 了 和C1／F在 3个剂量 组之间差异无显著性；消除半衰期 t 在3个剂量组 之间差异有显著性。 受试者多次口服瑞舒伐他汀 5，10，2(1 mg第 9 天达稳态后，稳态达峰浓度 C 分别为(6．1±1．4) g·L一 、(16．1±6．())t-tg·I ～ 、(35．8± 19．8)／*g· I ～、AUCss分 别 为 (71．4± 6．2)／*g·h·I 、 (168．6±50．4)／*g·h·L 、(359．4± 128．2)t-tg·h· L一。平均稳态血药浓度 Ca 和蓄积系数 R 随剂量 增加而增加， 稳态清除率 Clss／F和波动度 DF (9／6)在 3个剂量组之间差异无显著性；消除半衰期 t ，有随剂量增加下降趋势。 5，1(／，2(／mg3个剂量组的单次给药药动学参 数与多次给药达稳态后的药动学参数比较，C 差 异不大，AUC显著增加；达峰时间 ￡一 和消除半衰 期 t ／：差异无显著性。 2．8 瑞舒伐他汀的不良反应 1例受试者(5 mg 组)于末次药后 24 h发现双侧面颊出现红色皮疹， 其表现程度为轻度，未予以任何医疗处理措施，皮疹 于末次药后 5 d消失，表现为已知的瑞舒伐他汀的 不 良反应 。 3 讨论 虽然目前已有文献表明瑞舒伐他汀的药动学存 在种族差异，但是目前为止只有少部分的瑞舒伐他 汀亚洲人群药动学参数l5]，而国内外尚无完整的中 国人群瑞舒伐他汀的药动学研究结果报道。本实验 旨在全面地研究瑞舒伐他汀在中国人体的药动学特 征，包括单剂、多剂、递增剂量下的瑞舒伐他汀的药 代特征。 在每日口服 5～20 mg剂量范围内，从 AUC和 C 结果看，瑞舒伐他汀表现出良好的线性药动学 特征，但单剂和多剂计算所的药物半衰期均表现出 随剂量增加而下降，统计学差异并具有显著性，与线 性药代的特征不符。半衰期的差异主要源于 20 mg 单剂量与其他两剂量组的存在显著差异，多次服药 后，药物在 3个剂量组间差异均存在显著性，其原因 可能与试验例数少，组间个体差异大有关。多次服 药后，波动度在 3个剂量组间接近(波动度随剂量上 升而增加没有统计学的显著性)，而药物随剂量的增 加蓄积程度有增加趋势，但差异无显著性。同一剂 量组内，单次服药和多次服药间达峰时间 ￡一 和消 除半衰期 t 差异无显著性，表明多次给药未使消 除特征改变。瑞舒伐他汀在亚洲人的吸收程度约为 欧洲人的两倍，在本研究的剂量范围内，试验结果基 本与报道相符[5 ]，瑞舒伐他汀的 AUC和 Cl眦 约为 白种人的两倍，￡ 和 t 与白种人数据比较接近。 本研究中24名健康受试者仅有一例观察到的 轻度不良反应，说明 20 mg瑞舒伐他汀剂量在中国 人群中耐受性良好。 参考文献： [1] Browh WV，Bays HE，Hassman DR，et a1．Efficacy and safety of rosuvastatin compared with pravastatin and simvastatin in patients with hypercholesterolemia： A randomized，doublm 5 4 1 O O 8 ^l 2 L L +一 +一 +一 +一 +一 + 一 + 一 +一 +一 8 9 2 2 5 8 b 7 他 ¨ 2 维普资讯 http://www.cqvip.com 中国医院药学杂志 2007年第 27卷第 1I期 Chin Hosp Pharm J，2007 Nov。Vol 27，No．II blind，52一week trial[J~．Am Heart J，2002，144：1036-1043． E2] Hull CK，Penman AD，Smith CK，eta1．Quantification of rosu— vastatin in human plasma by automated solid-phase extraction using tandem mass spectrometric detection[J]．J Chromatogr B Analyt Technol Biomed Life Sci，2002，772(2)：219-228． [3] Oudhoff KA，Sangster T，Thomas E，et a1．Application of mi— crobore HPLC in combination with tandem MS for the quanti— fication of rosuvastatin in human plasma[J]-J Chromatogr B Analyt Technol Biomed Life Sci，2006，832(2)：191-196． [4] Hull CK，Martin PD，Warwick MJ，el a1．Quantification of the N-desmethyl metabolite of rosuvastatin in human plasma by automated SPE followed by HPLC with tandem MS detection [J]-J Pharm Biomed Anal，2004．35(3)：609—614． [5] Lee E，Ryan S，Birmingham B，el a1．Rosuvastatin pharmacoki- netics and pharmacogenetics in white and Asian subjects resi— ding in the same environment[J]．Clin Pharmacol Ther，2005， 78(4)：33O一341． [6] Martin PD，Warwick MJ，Dane AI ，el a1．A double-blind，ran— domi zed，incomplete crossover trial to assess the dose propor- tionality of rosuvastatin in healthy volunteers[J]．Clin Ther， 2003，25(8)：2215—2224． [7] Martin PD，Warwick MJ，Dane AI ，el a1．Ab~lute oral bio— availability of rosuvastatin in healthy white adult ma le volun— teers[J]．Clin Ther，2OO3，25(1O)：2553—2563． [收稿13期]2007—01-12 北柴胡皂苷类成分的特征(指纹)图谱研究 李媛媛 ，秦雪梅 ，王玉庆 ，岳建英。，郝建平 ，张丽增’，郭小青 (1．山西大学化学化工学院药学系，山西太原 030006；2．山西农业大学农学院，山西 太谷 030801；3．山西省生物研究所，山西 太原 030006~山西大学生命科学院，山西 太原 030006) [摘要] 目的：通过研究39个柴胡样品的特征(指纹)图谱，建立北柴胡高效液相色谱法(HPLC-UV)的指纹图谱分析方法， 提供北柴胡药材质量综合评价体系。方法：样品酸化后 HPLC-UV法测定柴胡皂苷类成分的指纹图谱；色谱条件：乙腈一水梯 度洗脱，检测波长240 nrn，流速1．()mL·min ，柱温 3【)℃；运用 SPSS软件分析得到的相似度数据。结果：建立了北柴胡 HPLC-UV指纹图谱共有模式，得到不同产地柴胡药材的相似度数据，通过聚类分析将样品分为6大类。结论：可以通过与共 有模式比较得到的相似度推测柴胡的种源；建议选用中柴 1号和山西左权的柴胡种子作为大面积推广的优 良品种；建立的指 纹图谱具有较广泛的应用范围，为研究柴胡类药材的指纹图谱分析鉴定提供了较好的科学参考数据。 [关键词] 北柴胡；柴胡皂苷；高效液相色谱法；指纹图谱 [中图分类号]R927．2 [文献标识码]A [文章编号]1001—5213(2007)I 1—1500—04 Study on specific chromatogram of saikosaponin in Bupleurum chinense LI Yuan-yuan ，QIN Xue-mei ，WANG Yu—qinga，YUE Jian-ying3，HAO Jian-pin4，ZHANG Li—zeng ，GUO Xiao-qing (1．School of Chemistry and Chemical Engineering，Shanxi University，Shanxi Taiyuan 030006，China；2 ． College of Agriculture，Shanxi Agricultural University，Shanm Taigu 030801，China；3．Institute of biology，Shan~ provience 030006，Chi— na；4．) AINIllACT：0BJECrlⅦ To establish an HPLC method for identification of Bupleurum chinense and make comparison with chromatograms of Radix Bupleuri collected from different areas so as to establish a sensitive and specific method for control— ling the quality of Radix Bupleuri．METItODS The HPLC—UV chromatogram of Radix Bupleuri was conductes using acidifi— cation samples with a C18 analytica1 column gradient elution with a mixture consisting of acetonitrile and water at a flow rale of 1．0 mL·min and the UV detector at 240 nm REsI】I The mutua1 mode of HPLc-UV specific chromatogrem was set uP， and the similar degrees to the crude drugs of different habitats were compared．Samples were separated into six species by SPSS．CONCLUSION It is simple and quick to identify Bupleurum chinense from different habitats with the method that can be used as quality controlitem for Radix Bupleuri． KEY WORDS：Bupleurum chinense；saikosaponim HPL(>UV；fingerprints 中国药典2005年版一部规定柴胡为伞形科柴 胡属植物北柴胡(Bupleurum chinense DC．)和狭叶 柴胡(B．scozonerifolium willd)的干燥根，具有解 表和里、疏肝解郁、升举阳气之功效 。目前，野生 [基金项目]国家自然科学基金(编号：30570174)；山西省自然科学基金(编号：20051085)；山西省科技攻关项 目(编号：051077-2) [作者简 介]李嫒嫒，女，硕士研究生 [通讯作者]秦雪梅，女，博士研究生，教授，电话：0351—7011202，E-mail：qinxm@sxu．edu．cn 维普资讯 http://www.cqvip.com