复方丹芪颗粒醇提取工艺研究

新疆中医药 2009年 第 27卷 第 2期(总第 120期) 55 与模型对照组相比差异有统计学意义，脾虚症状明 显好转。 参考文献 [1]1 郝丽莉，范越补虚药与抗感染作用．中医药学报，2006，34(5)：1-2． [2】 易杰．李德新．脾虚证动物模型研究思路和方法探析．上海中医药 杂志，20o1。(5)：40--42． [3】杨海燕，张黎莉，袁秀荣．肠安颗粒对脾虚模型小鼠及其免疫功 能的影响．中国实验方剂学杂志，2008，14(1)：43—45． [4] 蔓素云，王耀斌．脾虚证动物模型造模研究方法及治疗概述．辽 宁中医学院学报 ，2002，4(4)：257—258． (收稿日期：20o9—02—06) 复方丹芪颗粒醇提取工艺研究 阿布力克木，于 宁，刘君琳 (自治区药物研究所，新疆 乌鲁木齐 830004) 摘 要 目的：探讨复方丹芪颗粒醇提取的最佳工艺。方法：以丹参酮Ⅱ 含量、醇浸出物量为指标，采用正交 试验设计优选丹参、黄芪、肉苁蓉醇提取条件。结果：确定最佳醇提取条件为：加8倍量80％乙醇回流提取2次，每 次1h。结论：上述实验结果可为复方丹芪颗粒醇提取工艺的确定提供实验依据。 关键词 复方丹芪颗粒；正交试验；丹参酮II ；工艺研究 复方丹芪颗粒是由丹参、黄芪、黄精、桑叶、枸 杞子、肉苁蓉 6味药组成 ，具有益气养阴、祛瘀化 痰、疏风通络作用，用于糖尿病病发周围神经病变， 症见肢体麻木、疼痛、发凉、感觉迟钝、乏力、腰酸腿 困等症状，疗效显著。为了保证制剂质量稳定，进行 了丹参、黄芪、肉苁蓉醇提取工艺研究，筛选出合理 可行的提取工艺。 1 材料与仪器 丹参酮 Ⅱ 对照品(批号 110736—200527)中国 药品生物制品检定所提供；甲醇(色谱纯)；其余试 剂及辅料均为国产试剂 AR级 ；LC一10AVP高效液 相仪(日本岛津公司)。 2 方法与结果 2．1 丹参、黄芪、肉苁蓉醇提取依据 丹参中脂溶性成分主要为二萜类化合物：丹参 酮 I、丹参酮 Ⅱ 、羟基丹参酮 Ⅱ 和黄酮等。具有降 低血糖的作用，均与本方功能主治相关 ，故采用醇 提。 黄芪中主要化学成分为皂苷类及三萜类化合 物，皂苷类成分黄芪甲苷具有较强的生理活性，有 抗炎、降压、镇痛、镇静作用，并能促进再生肝脏 DNA合成和调节机体免疫力的功能。 肉苁蓉中主要化学成分为乙醇苷类、环烯醚萜 及其苷类，如类叶升麻苷、松果菊苷等肉苁蓉总苷、 苯乙醇苷类，具有较强的神经保护活性。 2．2 吸醇率测定 按处方比例称取丹参、黄芪、肉苁蓉加 1O倍量 80％乙醇浸泡至透心，测得吸醇率为 126％(n=3)。 2．3 试验方法睁啕 采用单因素试验设计对影响提取效率的乙醇 浓度、乙醇用量、提取次数、提取时间进行考察，在 单因素试验基础上固定提取次数，再采用正交试验 设计对乙醇浓度、乙醇用量、提取时间进行考察，以 丹参酮 Ⅱ ，含量和醇浸出物量为指标综合评价(权 重系数为O．8、O．2)，筛选最佳提取条件。 2．3．1 浸出物量的测定 精密吸取供试品溶液 50mL，置干燥至恒重并称重的蒸发皿中，水浴蒸干， 105℃烘箱干燥 3h至恒重，取出，迅速置干燥器中冷 却，称重，重复3次，计算浸出物量。 2．3．2 丹参酮Ⅱ 的含量测定 照高效液相色谱法 (中国药典 2005年版一部附录 VID)测定。 (1)色谱条件与系统适用性试验：用十八烷基 硅烷键合硅胶为填充剂(本实验用为Shim-packODS 150minx4．6ram，5 m)；甲醇一水(75：25)为流动相；检 测波长为270nm。理论馋蒯 丹参酮Ⅱ ，峰计算应不 低于 2000。 作者简介：阿布力克木(1972一)，男，助理研究员，主要从事中药制剂研究。电话：13999239880。 56 新疆中医药 2009年 第 27卷 第 2期(总第 120期) (2)对照品溶液的制备：精密称取丹参酮Ⅱ ，对 照品 2．5mg，置 25mL棕色量瓶中，用甲醇溶解并稀 释至刻度，摇匀。再精密量取 4mL置25mI_／棕色量瓶 中，加甲醇至刻度，摇匀，制成每lmL含丹参酮Ⅱ 161~g 的溶液，即得。 (3)供试品溶液的制备：取提取液经微孔滤膜 (0．451xm)滤过，取续滤液，即得。 (4)测定法：分别精密吸取对照品溶液与供试 品溶液各 lOl~L，注入液相色谱仪，测定，即得。 2．4 试验 内容和结果17-91 2．4．1 单因素试验 按处方比例称取各味药材，进 行乙醇浓度(50％、60％、70％、80％、95％)、乙醇用量 (6、8、l0、12倍)、提取次数(1、2、3、4次)、提取时间 (o．5、1．0、1．5、2．Oh)单因素考察，滤液定容至 1 O00mL， 分别测定丹参酮Ⅱ 含量和醇浸出+物量，结果见 1、表 2、表 3、表4。 表 1 乙醇浓度的单因素考察结果 表 2 乙醇用量的单因素考察结果 表 3 提取时间的单因素考察结果 表 4 提取次数的单因素考察结果 从表 1结果可见，随乙醇浓度的增大，综合评 分呈现先增加后降低的趋势，说明乙醇浓度越大或 越小均不合适，当乙醇浓度为 80％时，综合评分最 大，为 98．O7分，故选择 60％--80％乙醇进一步进行 正交试验。从表2结果可见，综合评分随乙醇用量 的增大而增大，当乙醇用量在 8倍量以上时，综合 评分大于90，故选择 8倍量～12倍量乙醇进一步进 行正交试验。从表 3结果可见，综合评分随提取时 间的增大，先增大后又略下降，选择 1．0～2．0h进一 步进行正交实验。从表4结果可见 ，提取次数在 2 次以上时，对综合指标的影响不大，结合生产实际 和节约成本，确定为提出次数为 2次。 2．4．2 正交试验 按处方比例称取各味药材，按表 5安排正交试验，滤液浓缩并定容至 1 O00mL。分别 测定丹参酮Ⅱ ，含量和醇浸出物量，结果见表6、表 7 表 5 因素水平表 225．8 242．7 250．3 254．5 259．0 256．5 2印．2 259．0 2gl-2 266．8 25S．S 252．s 55．4 24．1 9．9 6．5 新疆中医药 2009年 第27卷 第2期(总第 120期) 57 由直观分析知，各因素对提取效果影响大小顺 序为：A(乙醇浓度)>B(提取时间)>C(乙醇用量)， 每个因素三个水平之间的趋势为A3>A2>A。，B3>B2> B ，C2>Cs>C ，直观分析得最佳提取工艺为 A3B。C：， 即加 10倍量80％乙醇提取2次，每次2．0h，采用方 差分析进一步优化。 由方差分析可知：A因素的影响具有显著性 (P<0．05)，B、c因素的影响无显著性(P>0．05)，从大 工业生产和节能降耗等全面综合考虑，将 B。调为 B。，c 调为C ，由此得最佳提取工艺为A，B。c ，即丹 参、黄芪、肉苁蓉醇提取工艺条件为：加 8倍量 80％ 乙醇提取2次，每次 1h。由于优选的工艺未包括在 正交设计表的9次试验中，故对其进行了验证试 验，结果与正交试验结果一致，表明此工艺稳定可 行。 3 讨论 3．1 本处方组方复杂，各药味有效成分理化性质各 异，不能简单地一锅煎煮，而应按指导原则将处方 药材分为：(1)丹参、黄芪、肉苁蓉先采用醇提取脂 溶性成分 ；(2)丹参、黄芪、肉苁蓉醇提药渣再与黄 精、桑叶、枸杞子采用水提取水溶性成分，这样可较 好地提取有效成分并保留了药物的药理活性成分， 保证了药效的发挥。 3．2 指标性成分的选择，中药复方的功效是多种有 效部位、有效成分共同作用的结果，单以君药中丹 参酮Ⅱ 含量作为醇提指标难免存在局限，为了整体 考察其中的有效成分，本试验选用丹参酮Ⅱ 含量和 醇浸出物量多重指标进行考察，使工艺优选试验在 更全面合理的依据下进行，并为质量控制提供了更 多标准，相对于一种有效成分为指标的试验，无疑 更科学、更合理，也能提供更多的研究信息。 参考文献 [1]1 范慧霞．中药丹参药理作用研究概况．新疆中医药，2007，25(5)： 113-117． [2]杨巧巧，高君柱．丹参提取工艺条件的优选．中成药，2004，26 (1)：84—85． 【3】 陈国辉，黄文风．黄芪化学成份、药理活性与临床应用概述．海峡 药学，2008，20(3)：13—16． [4】 景富春，陈虹．肉苁蓉的神经保护作用研究进展．时珍国医国药 ， 2006，17(1O)：1878—1879． 【5】 中华人民共和国药典．2005年版，一部． [6】孙彩华，钱松洋，陈水英．反相高效液相色谱法测定活骨胶囊中 丹参酮 Ⅱ 含量冲 国药业 ，2007，16(7)：1 l7． [7】尚丽霞，罗惠善，尹寿玉．多指标正交实验优选清热达郁口服液 提取工艺．时珍国医国药，2007，18(2)：426-427． 于鲁海，孙力，李燕菊，等．多指标试验公 虫斑鸠 菊的提取工艺．中国现代中药，2007，9(11)：29—30． [9】刘明，王慧森，李更生。等．正交试验法优选地黄管食通颗粒的乙 醇提取工艺．海峡药学 ，2007，19(7)：17—18． (收稿 日期：2009—02-23) 复方红景天滴丸成型工艺的研究 陆 路 ，王在魁 ，薛桂蓬 (1．自治区第二济困医院，新疆 乌鲁木齐 830011； 2．自治区药物研究所，新疆 乌鲁木齐 830004) 摘 要 目的I确定复方红景天滴丸的最佳成型工艺。方法：采用单因素实验设计。以滴丸的圆整度、硬度、滴 制情况、平均丸重为评价指标，对基质种类、药粉与基质的配比、冷却剂、滴头内，外径、冷却液温度进行筛选；采用 正交实验设计，以滴丸的丸重差异和外观质量为评价指标，对料液温度、滴速和滴距进行筛选。结果I确定最优滴丸 成型工艺为：药粉与PEG4000 配比为 1：2．0，滴口内，外径2．5／3．5mm，冷却剂为二甲基硅油，冷却液温度采用梯度冷 却方式(15℃一2O℃)，药液温度95℃，滴速5O～6O滴／min，滴距8em。结论：优选的滴丸制备工艺稳定、可行。 关键词 复方红景天滴丸；成型工艺；聚乙二醇；正交实验 复方红景天滴丸由红景天、赤芍2味药组成， 具有活血止痛、益气养阴的作用，可迅速缓解冠心 病引起的心绞痛等症状。滴丸是指固体或液体药物 与基质混匀加热熔化后，滴人不相混溶的冷却液 作者简介：陆路(1961一)，男，副主任药师，主要从事中药制剂研究。电话：(0991)3782200。